Mejora de las prácticas de laboratorios: Larvas sanas que maximizan rendimientos con bioseguridad

Transcripción

1 Mejora de las prácticas de laboratorios: Larvas sanas que maximizan rendimientos con bioseguridad Diego Flores, Zeigler Brothers, Inc. Representante Técnico Latinoamérica.

2 Producción Global de PLs 510,000,000,000 Production numbers based on GOAL 2017 estimates

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4 Tendencias en producción de laboratorios Más y mejores programas de cultivo, crianza y reproducción Diversificación de esas estrategias Laboratorios más grandes Mejora de los estándares de producción Reemplazo de alimentos vivos y congelados Incremento en la integración Consolidación de la industria

5 Por qué? Economías de escala Permiten inversiones más elevadas Infraestructura Recursos Humanos Tecnología Nutrición Costo Reducido por PL Producción mayor para apoyar la inversión en programas de mejora, investigación y desarrollo, certificaciones La Integración mejora las opciones de financiamiento Paquetes crediticios para semilla, alimento, mercadeo

6 Mejorando las tecnologías de producción de semilla Programas de mejora Selección de lugar para laboratorio Diseños de sistemas de maduración Manejo de reproductores Diseños de sistemas larvarios Alimentos para larvas y alimentación Manejo y control de calidad Sistemas de gestión y bioseguridad

7 Programas de mejora SPF Specific Pathogen Free (libre de patógenos específicos) SPR Specific Pathogen Resistant (resistente a patógenos específicos) APE All Pathogen Exposed (expuestos a todo patógeno, Modelo Ecuatoriano) Centros de reproducción y crianza, bioseguridad

8 Patógenos no virales: más difíciles de excluir Vibrio parahemolyticus AHPND (y otros) Bacterias con plásmidos que codifican toxinas virulentas No se compromete, sobrevive y se propaga en el medio ambiente Enterocytozoon hepatopenaei EHP Transmitido por el canibalismo y la convivencia Las esporas persisten en el medio ambiente No se trata solo de genética El manejo del laboratorio es crítico Las postlarvas deberán estar libres del problema (EMS & EHP) al sembrarse Thitamadee et al. 2016

9 Selección de sitio y tratamiento de agua Sitios costeros desarrollados permiten mejor flexibilidad y logística Sitios alejados tierra adentro para una mejor bioseguridad Cercanía a otros laboratorios Ordenamiento regional y zonificación Calidad de agua Salinidad, temperatura, etc. Disponibilidad, contaminación, etc. Tecnologías de tratamiento de aguas (afluente y efluente)

10 Diseño de sistemas de Maduración y Desoves Redondos o rectangulares tanques largos lo suficiente para cortejo y cópula Sistemas de ciclo abierto o recirculación para mejora en bioseguridad Cópulas naturales o inseminación artificial Temperaturas C Machos para inseminación <25 C Filtrado, desinfección, carbón activado y EDTA para el tanque de desove Temperaturas superiores a 30 C pueden elevar deformidades Lavado/desinfección de huevo para reducir problemas con bacterias Tanques separados de eclosión Lavado y/o tratamiento de Nauplii La limpieza es crítica!

11 Alimentos para Maduración Requerimientos altos de proteínas para un buen desarrollo de los huevos Los Lípidos son muy importantes, particularmente HUFAs Carotenoides, vitaminas, minerales, antioxidantes Típicamente alimentos frescos Calamar Gusanos poliquetos marinos Artemia adulta (biomasa) Bivalvos Alimentación suplementaria con alimentos preparados Los reemplazos completos deben de mantener cópulas, desoves, fertilización y eclosión exitosamente iguales o mejor que los alimentos frescos Además de contribuir a la calidad del agua

12 Pruebas de EMS Resultados de PCR de detección de PCR AP2 con muestras de enriquecimiento - : no especímenes Flegel et al. TARS 2014

13 Diseño de sistemas Larvarios Tanques fondo V o U para una mejor suspensión y circulación. En tanques de fondo plano evitar la acumulación de materia orgánica es crítico Agua marina desinfectada de alta calidad, salinidad, temperatura óptima constante Uso de probióticos para control de vibrios (colonizar agua previo uso) Sistema de cosecha y transferencia de dos fases en PL2-6 a tanques raceways Consolidar tanques de PL para mejor predicción de cosechas Mover los animales a tanques limpios mejora la producción y supervivencia de PL2 a PL12 El uso de productividad natural y sistemas de biofloc para producir PLs mas robustas Recambiar o No Recambiar, esa es la cuestión

14 Alimentos Larvarios y alimentación Protozoea típicamente alimentados con Algas Mysis y postlarvas típicamente alimentados con Artemia y trazas de algas Alimentos líquidos y/o secos, particulados, flakes, microextruidos o microencapsulados Monitoreo de desarrollo para alimentar por estadio Multiples alimentaciones por día (más dósis o más continuidad) Evitar sobrealimentar para mantener calidad de agua! Los alimentos frescos y vivos pueden ser vectores significativos para introducción de bacterias patógenas Monitoreo bacteriológico de las algas Desinfección o reemplazo de Artemia

15 Vibriosis en laboratorios El control de vibrios patógenos es fundamental para la calidad de la larva Monitoreo Microbiológico, conteos en placa, pruebas PCR (si es posible)

16 Manejo y control de calidad Desinfecciones de Edificios e infraestructura - Salas de cultivo (Cloro, Formol, Paraformaldehído, combinaciones) - Tanques (Cloro, ácido, Productos especiales, combinaciones) - Líneas de distribución de agua (Cloro, ácido, Productos especiales, combinaciones) - Líneas de distribución de aire (Cloro, ácido, Productos especiales, combinaciones) - Líneas de distribución de microalgas (Cloro principalmente) Pero sobre todo hacer hincapié en la comprobación de desinfección

17 Manejo y control de calidad Colecta de muestras de larvas de los tanques para observación directa de las siguientes caracteristicas: Estadio Larval (homogeneidad), actividad y comportamiento natatorio Condición del Hepatopancreas, tubo digestivo (vacuolas de lípidos) y actividad peristáltica Actividad alimenticia y presencia de hilos fecales Nauplii de Artemia, alimentos secos y/o mudas en el agua. Color (cromatóforos expandidos) y opacidad muscular Signos Clínicos de enfermedad, adherencias, necrosis, deformidades Mortalidad Larvaria Revisión de microalga: Calidad y cantidad Parámetros del agua Luminiscencia

18 Calidad de las Larvas Factor Crítico para rentabilidad de granja Alta capacidad de supervivencia y buena forma física Mejora el potencial de producción Manejo efectivo de los estanques Mayores densidades y crecimiento en maternidades Vector clave para la introducción de enfermedades Potencial Genético Crecimiento Resistencia a enfermedades

19 Sistemas de Gestión y bioseguridad La bioseguridad ha sido definida como «el conjunto de prácticas que reducirán la probabilidad de introducción de patógenos y la subsiguiente propagación de un sitio a otro» (FAO, 2004). El principal objetivo de la bioseguridad es: Garantizar un determinado nivel de estado Sanitario. Enfocado a proteger las inversiones cuidando: Personal Instalaciones (propias y de terceros) Organismos en cultivo (en todas las etapas) Insumos y materiales

20 Para resumir esta etapa

21 Elaborar Procedimientos Son específicos para cada instalación Capacitar Sistemas de Gestión y bioseguridad Transmitir al personal los procedimientos Equipar Proporcionar lo necesario para cumplir Concientizar * La parte complicada Actualizar Si hay algún cambio en procedimientos o en infraestructura

22 Sistemas de Gestión y bioseguridad

23 Evaluación de Riesgos? Posibilidad de ocurrir Muy Continuamente Moderado Ocasional Probable Muy poco probable Intrascendente Pequeño Grave Mayúsculo Devastador Impacto en la operación

24 Selección de PL Evaluación de calidad de PL Nivel 1 De comportamiento Desempeño de cultivo, rendimientos Nivel 2 Observaciones físicas Supervivencia en test de estrés Nivel 3 Diagnosticos de enfermedades Indice de Calidad Correlación con subsecuentes desempeños de cultivo?

25 Nivel 1: Comportamientos Fototropismo en nauplios Los seleccionados tienen mejor metamorfosis a Zoea No hay diferencias después de estadios Zoea Actividad natatoria de las PL Haciendo remolinos en recipiente Las saludables nadan contra corriente Las mas débiles van al centro del recipiente

26 Nivel 1: Desempeño de producción de laboratorio Fecundidad, fertilización y tasa de eclosión Tasas de Metamorfosis y supervivencia a través de los estadios larvales Tiempo de pase entre estadios Supervivencia a cosecha, historia clínica Evaluación de lotes sobre el tiempo en laboratorio Estandarización entre el complejo del laboratorio Los sistemas de dos fases deben evaluar ambas cosechas (transferencia y venta)

27 Nivel 2: Observaciones Físicas Talla, Peso, índice de condición Deformidades Color, patrón de cromatóforos Relación músculo : intestino (3:1 Vannamei) Formula rostral Desarrollo branquial Adherencias Bacterias, Hongos, Protozoarios Variación de tallas CV = desv estd / media : normal debe ser <15%

28 Edad vs Longitud vs Peso Preferible usar longitud o peso que la edad de la PL cuando se evalúa la calidad o para determinar el tipo de alimento y tasa de alimentación El factor de condición se puede calcular en función de las relaciones de longitud / peso, pero requiere un equipo de peso de precisión analítica Peso (mg) Longitud (mm)

29 Proporción Músculo : Intestino

30 Desarrollo Branquial

31 Formula Rostral Imagen Cortesía Alberto Bayas /Prilabsa

32 Ectoparásitos

33 Prueba de estrés Se usa como una herramienta para evaluar los efectos de dieta con resultados mixtos Salinidad PL temprana es más sensible que la tardía vannamei es más sensible que monodón Exposición a agua dulce 30 min (vannamei PL 12) Supervivencia mayor a 80% La prueba de esfuerzo de salinidad más leve en PL1 se correlacionó con la supervivencia a PL15

34 Pruebas de estrés Otras pruebas de estrés Exposición a formol Baja temperatura y baja salinidad Bajo oxígeno disuelto Toxicidad por Amonio Falta general de evidencia empírica que sugiera correlaciones consistentes con la subsiguiente supervivencia del estanque Demasiada variabilidad en las condiciones del estanque?

35 Nivel 3: Diagnosticos de Enfermedades Exámenes de rutina, fijación rápida y tinción (fresco) Histología H & E de rutina, microscopía electrónica Pruebas basadas en anticuerpos serológicos Hibridación in situ PCR - GeneReach Pockit, kits de prueba IQ Plus

36 Confiabilidad de las pruebas de diagnóstico Sensibilidad: falsos positivos y falsos negativos Prevalencia del patógeno en la población Tamaño de la muestra Etapa de la infección Etapa de vida probada Número de pruebas realizadas

37 Pruebas para EMS

38 Índice de Calidad de PL Los resultados de los análisis de calidad de PL pueden estandarizarse para proporcionar un índice de calidad de PL para orientar las decisiones de compra Nivel 3 - Diagnósticos de enfermedades (Salud) Nivel 2 - Evaluación microscópica (estado físico) Nivel 1 - Observaciones (comportamientos)

39 Recomendaciones de GAA para una producción de laboratorio responsable y eficiente Los laboratorios siempre deben de confiar en reproductores domesticados El monitoreo a las condiciones de cultivo debe implementarse para asegurar un ambiente de alta calidad El diagnóstico de enfermedades debe usarse regularmente. Los efluentes deben ser monitoreados y tratados! Deben implementarse medidas para evitar el escape de animales (normas como BAP y Global GAP lo contemplan) Se deben implementar métodos para reducir el uso de alimentos frescos por ser vectores potenciales de problemas

40 Recomendaciones de GAA para una producción de laboratorio responsable y eficiente Se deben adoptar técnicas para evaluar la calidad de la postlarva Se deben usar procedimientos de control de calidad Se deben abandonar los antibióticos a favor de prácticas sanas de gestión de la salud que se basan en la bioseguridad y una buena gestión de la calidad del agua Los laboratorios deben secarse después de cada ciclo

41 Escoge bien Garantizar la salud y el estado físico de las postlarvas es uno de los requisitos previos más importantes para la rentabilidad de la granja Las inversiones en producción o adquisición de PL de alta calidad se justifican rápidamente incluso con pequeños aumentos en el crecimiento de los cultivos y la supervivencia Los programas de genética y reproducción han tenido un efecto profundo en el potencial de crecimiento del camarón y en la supervivencia después del desafío de la enfermedad

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