Laboratorio No. 9 Titulo: MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE MONOSACÁRIDOS Y ALMIDÓN
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- Josefa Emilia Botella Moya
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1 Laboratorio No. 9 Titulo: MÉTODOS DE IDENTIFICACIÓN DE MONOSACÁRIDOS Y ALMIDÓN 1.- Introducción Los monosacáridos son la fuente de energía más importante e inmediata del ser humano, por lo que son uno de los componentes más comunes dentro de los componentes de la dieta usual. Algunos se encuentran como tales, en su forma libre, mientras que otros se encuentran formando disacáridos y hasta polisacáridos. Uno de los polisacáridos más útiles para la nutrición humana es el almidón, ya que está formado enteramente por unidades de glucosa y es posible digerirlo enteramente, a diferencia de la celulosa. El almidón, además de ser un alimento, también es utilizado dentro de algunos procedimientos químicos como indicador de titulación gracias a su interacción con el yodo molecular. En esta práctica se presenta al alumno los principales métodos de identificación de monosacáridos y del almidón para determinar su presencia en varios alimentos. Los carbohidratos, que son las biomoléculas más abundantes de la naturaleza, se definen como polihidroxialdeídos (aldosas) o polihidroxiacetonas (cetosas). Los carbohidratos más simples son unidades conocidas como monosacáridos, tales como la glucosa o la fructosa. La unión de dos monosacáridos unidos por enlaces glucosídicos forma un disacárido, como la sacarosa y lactosa. Cuando se unen más de dos monosacáridos en cadena por medio de los mismos enlaces glucosídicos, se forma un polisacárido, tal como el almidón, el glucógeno y la celulosa. Los carbohidratos son la fuente principal de energía para el organismo, contribuyendo con 50 a 60% del total de calorías usadas por el mismo. Los carbohidratos complejos son una mejor fuente de energía que los azúcares simples refinados. En adulto sano, los carbohidratos se almacenan como glucógeno, principalmente en músculo y en el hígado. Además de ello, se ha descubierto que los carbohidratos intervienen en procesos celulares importantes, tales como la unión entre células, la transducción de señales y la endocitosis. Los carbohidratos también se encuentran como partes integrales de otras biomoléculas, como glucoproteínas y glucolípidos. Algunos monosacáridos se encuentran formando parte de las moléculas informativas principales, el ADN y el ARN. Los carbohidratos que reducen los reactivos de Fehling o de Benedict y el
2 reactivo de Tollens se conocen como azúcares reductores. Todos los monosacáridos y la mayoría de disacáridos son azúcares reductores, con la importante excepción de la sacarosa (azúcar de mesa), la cual no es reductora. 2.- Objetivos Que el estudiante: Diferencie experimentalmente entre algunos monosacáridos y el almidón. Pueda identificar la presencia de algunos monosacáridos y almidón en artículos caseros. Conozca la diferencia entre métodos cualitativos y cuantitativos Interprete resultados de pruebas cualitativas. Diferencie entre azúcares reductores y no reductores Diferencie entre monosacáridos, disacáridos y polisacáridos. 3.- Materiales React ivos Solución de glucosa (dextrosa) Solución de fructosa Solución de sacarosa Solución de almidón Alfa naftol al
3 Crista lería Instrumen tación 5% en etanol Ácido sulfúrico concentrad o Pi p e t a s P a st e u r Erlenme yers de 250 ml. 15 tubo s de ensa yo Gradilla para tubos de ensayo E s t u
4 f a 4.- Procedimiento 1. Preparación de tubos de ensayo a. En una gradilla coloque 15 tubos de ensayo y numérelos claramente como sigue, y coloque unas veinte gotas de las siguientes soluciones en ellos. Tubo solución tubo solución 1 Agua destilada 9 Sacarosa 2 Glucosa 10 Almidón 3 Fructosa 11 Agua destilada 4 sacarosa 12 Glucosa 5 Almidón 13 Fructosa 6 Agua destilada 14 Sacarosa 7 Glucosa 15 almidón 8 fructosa 2. Prueba de Benedict para monosacáridos a. Agregue a los primeros cinco tubos (1-5) de dos a cuatro gotas de reactivo de Benedict y caliente en baño María durante cinco minutos. b. Anote cualquier cambio de color. 3. Prueba de Molish para carbohidratos a. Al siguiente grupo de tubos (6-10) agregue 5 gotas de alfa naftol.
5 b. Cuidadosamente, añada ácido sulfúrico concentrado deslizándolo por las paredes y sin agitar. c. Observe cuidadosamente la interfase, buscando un anillo rojo o violeta. 4. Prueba de Lugol para almidón (amilosa) a. Al último grupo de tubos (11-15) agregue dos a cuatro gotas de Lugol. b. Anote cambios de color. 5.- Prelabora torio En forma individual, conteste las siguientes preguntas, este pre-laboratorio debe de entregarlo en hojas tamaño carta sin líneas, no debe de llevar fólder, identifíquelo en la parte superior de la hoja con su nombre, carné y sección NO CARÁTULA. La entrega es el día del laboratorio, si la entrega es posterior al laboratorio, no tendrá valor. Únicamente lo pueden entregar en el laboratorio los estudiantes que tienen práctica en ese momento. 1. Indique las diferencias entre azúcar reductor y azúcar no reductor. 2. Indique la base bioquímica de las pruebas de Benedict para monosacáridos 3. Indique la base bioquímica de las pruebas de Lugol para almidón.
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