MANUAL PRÁCTICO SOBRE LA TOMA DE MUESTRAS PARA EL ESTUDIO CITOLÓGICO

Transcripción

1 MANUAL PRÁCTICO SOBRE LA TOMA DE MUESTRAS PARA EL ESTUDIO CITOLÓGICO Realizado y distribuido por ONKOS-

2 INDICE Prólogo Pág.3 Punción con aguja fina PAF y Punción-aspiración con aguja fina PAAF.. Pág.4 1. Que jeringuilla y aguja utilizo?..... Pág.4 2. Cuál es el mejor punto de aspiración?.. Pág.5 3. Cómo hago una PAAF?..... Pág.6 4. Cómo hago una PAF?..... Pág.7 5. Qué criterio debo seguir de cara a la obtención de una muestra?....pág.8 6. Consideraciones específicas según órgano - tejido Pág.9 Improntas - Frotis por improntas. Pág.12 Raspados Pág.14 Bastoncillos - Hisopos..... Pág.15 Formas de extender una muestra.... Pág.16 2

3 PROLOGO El manejo de la muestra es un factor muy importante, hasta el punto, que afecta a la fiabilidad del diagnóstico del tejido remitido. Una buena citología depende de: - una recogida de muestra representativa - una correcta extensión en el portaobjetos - una tinción adecuada - y la observación de la muestra en un buen microscopio. Cuando alguno de estos puntos falla, el diagnóstico se afectará negativamente. Por eso, ONKOS. a través de este sencillo y práctico manual, describe la mejor forma para obtener, extender y fijar cualquier muestra, independientemente de su localización. Esperamos que te sea de utilidad. Recibe un cordial saludo. Vet. Pablo Cigüenza del Ojo. Director de ONKOS- 3

4 PUNCIÓN CON AGUJA FINA (PAF) Y PUNCIÓN-ASPIRACION CON AGUJA FINA (PAAF) La punción con aguja fina se realiza usando una jeringuilla y una aguja, y podemos aplicar aspiración (PAAF) o no (PAF). Seguramente es el método de elección para cualquier masa o lesión de tipo proliferativa o cualquier órgano glandular subcutáneo (ganglio linfático, mama y glándula salival). Además, es un método muy válido y de mínima invasión, para la toma de muestras de órganos o masas internas. 1. QUÉ JERINGUILLA Y AGUJA UTILIZO? Las agujas que se usan normalmente van de los 20 a los 25 G, principalmente la de 23 G (azul), aunque cada vez más se utiliza la amarilla de 20 G, obteniendo muestras muy representativas. Dichas agujas están unidas a jeringuillas que van de 5 a 20 ml (normalmente de 10 ml). ** Cuanto más blando sea el tejido, más pequeña será la jeringuilla y la aguja ** 4

5 2. CUÁL ES EL MEJOR PUNTO DE ASPIRACIÓN? Para las muestras de cavidades, la zona se limpiará y se preparará quirúrgicamente. En el resto de los casos, la piel se preparará como para cualquier inoculación. Como norma general, intentaremos coger muestra del centro de la masa o por lo menos apuntar hacia esa posición y así asegurar coger muestra representativa, ya que si intentáramos coger de la periferia, probablemente nos quedaríamos fuera. **Si son muestras ecoguiadas, NO USAR GEL DE ECOGRAFÍA, y limpiar bien la zona para no dejar restos** 5

6 3. CÓMO HAGO UNA PAAF? Con una mano debemos estabilizar la masa, mientras que con la otra introduciremos la aguja unida a la jeringuilla hasta el centro de la masa. Una vez llegado al punto de elección aplicaremos una presión negativa de aproximadamente tres cuartas partes del volumen de la jeringuilla utilizada y si la masa lo permite (por tamaño, localización ) mientras mantenemos la presión negativa moveremos la aguja de adelante a atrás repetidamente. Sin sacar la aguja de la masa, podemos repetir el proceso en distintos puntos. **La presión negativa no debe sobrepasar en ningún punto más de dos o tres segundos** Al finalizar la toma de muestra, quitamos la presión negativa y retiramos la aguja. A continuación, separamos la aguja de la jeringuilla, llenando esta última de aire, para después volverla a conectar a la aguja y expulsar el aire en el centro del portaobjetos. 6

7 4. CÓMO HAGO UNA PAF? Con esta técnica, obtendremos muestras de igual o mejor calidad que las que obtenemos con la PAAF. Este método funciona para la mayoría de las masas, especialmente las que tienen elevada vascularización. Es similar a la PAAF, sólo que aquí la jeringuilla se llena de aire (tres cuartas partes de su volumen) antes de conectarla a la guja y empezar la toma de muestra, para poder así realizar una rápida expulsión de la misma. Estabilizaremos con una mano la masa y con la otra introducimos la aguja unida a la jeringuilla cargada de aire hasta el centro de la masa. Una vez llegado al punto de elección, movemos la aguja de adelante a atrás (es a elección del técnico hacer la punción en varios trayectos, pero para evitar contaminación hemática se aconseja hacer sólo uno). Al finalizar retiramos la aguja y expulsamos el material sobre el portaobjetos (al estar la aguja conectada a la jeringuilla podemos hacer la extensión antes de que se coagule la muestra o que las células se desequen). 7

8 **Si es posible, repetir la PAF en distintos puntos de la masa, así nos aseguramos obtener suficiente material** 5. QUÉ CRITERIOS DEBO SEGUIR DE CARA A LA OBTENCIÓN DE MUESTRA?. Realizar y procesar muestras múltiples. Así disminuimos mucho la probabilidad de obtener muestra insuficiente, y de cara al diagnóstico, aumentaremos mucho la precisión del mismo.. Evitar la contaminación hemática (en la medida de lo posible). La PAF recogerá tejido de menor resistencia, si rompemos vasos sanguíneos, la sangre será ese tejido de menor resistencia. Las dos principales causas de contaminación hemática son las aspiraciones prolongadas y el uso de agujas de menos de 22 G.. La punción debe ser rápida y lo suficientemente profunda (el centro de la masa) 8

9 7. CONSIDERACIONES ESPECÍFICAS SEGÚN ORGANO - TEJIDO - Ganglios cuando se quiere coger muestra de este tejido nunca aspiramos, se hace PAF, y a la hora de extender la muestra no se aprieta, ya que son células muy frágiles y se romperían. - Hígado lo haremos cuando exista hepatomegalia o alteraciones de ecogenicidad. Se puede hacer PAF ó PAAF o las dos. La única precaución es que las plaquetas estén normales. - Bazo lo haremos en enfermedades difusas, o localizadas (cuidado con los quistes), pero nunca PAAF, sólo PAF. - Páncreas si somos rápidos y sólo hacemos PAF, no provocaremos pancreatitis. Tiene un gran valor diagnóstico. - Riñón sólo en masas o renomegalia. Haremos solamente PAF y sin mover mucho la aguja. 9

10 - Vejiga para masas o engrosamientos de mucosa. Como la orina es muy irritante, lo mejor es hacer, previamente a la citología, lavados de la vejiga. Podemos hacer PAAF, pero lo mejor es hacer sondaje traumático. - Próstata se hará cuando exista heterogeneidad, masas o quistes. Podemos hacer tanto PAF como PAAF. En los quistes aconsejamos hacer aspiración de todo el líquido. - Líquidos tienen la complicación de que degeneran muy rápidamente, de tal forma que, si no hacemos nada, en dos horas las células empiezan a degenerar. Siempre se mandará extensión y líquido en EDTA y como truco para mantener más tiempo y mejor las células pondremos un par de gotas de suero del paciente, ya que las proteínas estabilizan las membranas de las células. Sólo en el sinovial no haría falta poner unas gotas de suero o procesarla tan rápidamente, ya que de por sí es un líquido muy rico en proteínas. 10

11 - Tiroides cuando exista aumento de tamaño, quistes o masas aisladas. Se puede hacer PAF o PAAF. - Masas Intratorácicas lo más frecuente suelen ser masas a nivel del mediastino craneal. Podemos hacer PAF o PAAF. 11

12 IMPRONTAS - FROTIS POR IMPRONTAS Normalmente son de lesiones superficiales ulceradas o exudativas, pero también se usan muestras obtenida mediante cirugía o necropsias: 1.- Lesiones superficiales y úlceras normalmente sólo se obtendrán células inflamatorias (aunque sea secundaria) y del frotis puede que no se exfolien suficientes células. Por esta razón debemos, siempre que sea factible, hacer PAF - PAAF de la lesión (por debajo de la úlcera) a parte del frotis. La impronta suele ser útil para determinar la presencia de infecciones bacterianas o fúngicas primarias o secundarias. ** En las úlceras se hace impronta antes y después de limpiar con gasa y suero salino** 12

13 2.- Tejidos recogidos por cirugía - necropsia lo primero es obtener una superficie limpia y fresca, y para ello tenemos que cortar o tallar la muestra. Luego con material absorbente y limpio secamos el exceso de sangre y además eliminamos el exceso de tejido, de esta manera facilitaremos la adhesión de células al portaobjetos. Una vez hecho todo esto, presionamos la parte central de la muestra contra el portaobjetos y levantamos sin deslizarlo. 13

14 RASPADOS Su uso principal es para lesiones externas, aunque alguna vez se usa para muestras obtenidas en cirugías o necropsias. Su principal inconveniente es el mismo que con las improntas, la obtención de muestras con contaminación o inflamación superficial. Su uso más frecuente y más eficaz es para lesiones del complejo granuloma eosinofílico felino y las dermatofitosis. Cuando raspamos superficies muy secas, debemos profundizar lo suficiente como para crear suero o sangre, y así favorecer la cohesión de células para luego poder extenderlas sobre el portaobjetos. 14

15 BASTONCILLOS - HISOPOS Su principal indicación es para muestras vaginales y del conducto auditivo externo, así como para trayectos fistulosos. Si la muestra es de lesiones secas, podemos humedecer el hisopo con suero salino, pero no usaremos geles lubricantes. **El bastoncillo se rueda sobre el portaobjetos no se desliza** 15

16 FORMAS DE EXTENDER UNA MUESTRA 16