VIII CURSO DE MICROBIOLOGÍA CLÍNICA: Actualizaciones en el Diagnóstico Microbiológico Comité de Microbiología. SOCHINF

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1 VIII CURSO DE MICROBIOLOGÍA CLÍNICA: Actualizaciones en el Diagnóstico Microbiológico Comité de Microbiología. SOCHINF Santiago, 4 y 5 de Mayo de 2009 DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DE LAS INFECCIONES OSTEO ARTICULARES Dra. Loriana Castillo Delgado. Hospital Clínico Mutual de Seguridad

2 DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO DE LAS INFECCIONES ÓSTEO-ARTICULARES Tópicos de la Presentación Aspectos Importantes de Considerar. Diagnóstico Microbiológico Estándar. Nuevas Estrategias.

3 Aspectos Importantes de Considerar La identificación del microorganismo causal es relevante para el diagnóstico y pronóstico. Escasa estandarización del cultivo de muestras OA: Recolección-Traslado-Procesamiento. Alto porcentaje de cultivos Falsos Negativos: 3.1 Tratamiento antimicrobiano previo, cemento con antibiótico y profilaxis antibiótica previa a la toma. J Bon Joint Surg Am 1999;81:672- Clin Ortop and Related Research 2005; 437:83 Clin Microbiol and Infect 2008;3;5:518

4 3.2 Escaso recuento microbiano S0MOS ADHERENTES! A CUBRIRSE CON EL BIOFILM! ATRAPADAS EN UN PMN, PERO VIVAS.. SOMOS VIABLES, PERO NO CULTIVABLES! Science 1999; 284: 1318

5 Aspectos Importantes de Considerar (continuación) 3.3 La cantidad de muestra que puede cultivarse sobre una placa de cultivo es insuficiente para obtener cultivos (+) 3.4 Pueden ser causadas por bacterias que no crecen en los medios de cultivo tradicionalmente utilizados: Anaerobios,Kingella kingae, Mycobacterias, Hongos, Brucella,Streptococcus nut. deficientes. Pediatrics 1993:92:800 MMWR 2004;53:241

6 DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO ESTÁNDAR MUESTRAS LÍQUIDAS Tipos: líquido sinovial, hematomas,abscesos. Número: 1 Volumen: 1-30 ml Recolección: por punción percutánea o punción intraoperatoria MUESTRAS SÓLIDAS Tipos: biopsias de tejido óseo, cápsula articular, sinovial. Número: 3-5 Tamaño: 1cm 2 Recolección: resección de tejidos en PQ (cielo abierto o artroscopía) Manual of Clinical Microbiology Washington DC. ASM 1991.J Clin Microbiol 1998:36:2932

7 ESTUDIO MICROBIOLÓGICO ESTÁNDAR DE LÍQUIDO SINOVIAL Tubo para Microbiología Tubo para Citología y Cristales Frascos de Hemocultivo uye antibiótico hibe complemento. Volumen muestra esarrollo fastidiosos. P.A.S. Tinción de Gram Diagnóstico diferencial de: Artritis Infección prótesis articular VS falla aséptica P.A.CHO.

8 Estudio Microbiológico Estándar de Tejido Ósteo-Articular Caldo BHI Caldo Thioglicolato El estudio histopatológico pesquisa signos de inflamación aguda y crónica, y permite interpretar los hallazgos del cultivo. Formalina Estudios especiales BHI: aerobios y levaduras. THIO:anaerobios Cultivo Koch, BK y PCR para Mycobacterias, Estudio de Hongos o estudios directos.

9 Cada una de las muestras se toma con su propio instrumental estéril. Interpretación: Cuando 3 de 5 muestras son (+) al mismo microorg. la posibilidad que sea una infección es 94,8% Cuando 1 de 5 muestras es (+) la posibilidad es 13,3%. Cuando todos los cultivos son (-) la posibilidad es 3,4% Bisturí Pinzas J Clin Microbiol 1998;36:2932

10 Estudio Microbiológico Estándar de Tejido Ósteo steo-articular Inoculación del tejido en caldo Cerebro- Corazón.

11 Estudio Microbiológico Estándar de Tejido Ósteo steo-articular Inoculación del tejido en caldo Thioglicolato

12 Rendimiento del Estándar Tipo de Muestra Tinción n de Gram Cultivo Liquido Sinovial Artritis Séptica Infec. Prótesis 71% y 45% 12-19% 19% 60-80% 55% Biopsias Ósea Osteomielitis Muy bajo 60% Biopsias Tejido Infec. Prótesis Muy bajo 56,3% Am. J Medical 1976;603:69 -J.Reumatol 1988;15:659 -J.Bon Joint Surg Am 1999;81:672- N.Engl J Med 2004;351:1645- N.Eng J Med 2007;357:654

13 NUEVAS ESTRATEGIAS A. PESQUISAR GENOMA BACTERIANO. 1. Hay o no hay en esta muestra? TÉCNICA PCR UNIVERSAL 2. Cómo se llama la? TÉCNICA SECUENCIACIÓN N GENÉTICA Clin Microb Infect Dis 2004; 17:840

14 NUEVAS ESTRATEGIAS ( CONT) B. AUMENTAR EL NÚMERO DE BACTERIAS CULTIVABLES ULTRASONICACIÓN Trampuz A et al.n Engl J Med 2007;357:654

15 RENDIMIENTO CULTIVO CON Y SIN ULTRASONICACIÓN Trampuz A et al.n Engl J Med 2007;357:654

16 RECOMENDACIONES La muestra de líquido sinovial debe ser cultivada como mínimo en un caldo de hemocultivo aerobio e inoculada en tubo con heparina de sodio y tubo sin anticoag. para citológico y Tinción de Gram + cultivo directo respectiv. El estudio microbiológico de tejidos ósteo articulares requiere de la recolección de 3-5 muestras para cultivo aerobio y anaerobio + 1 muestra para estudio histopatológico, recolectadas al inicio de la IQ, con instrumental quirúrgico independiente y de un tamaño aproximado de 1 cm 2.

17 RECOMENDACIONES El diagnóstico microbiológico certero, al inicio de la infección, MARCA la suerte del enfermo y por lo tanto la buena comunicación entre traumatólogo-infectólogomicrobiólogo constituye un INTRANSABLE. El aumento de las artroplastías demanda la necesidad de evaluar las Nuevas Estrategias para aumentar el rendimiento del estudio microbiológico estándar.