Simplexa Spectral Calibration Panel

Simplexa Spectral Calibration Panel REF SC1100 Rev. B Plantillas espectrales para la determinación por PCR en tiempo real de la matriz espectral Para uso diagnóstico in vitro PROPÓSITO DEL ENSAYO Simplexa Spectral Calibration Panel (Panel de calibración del sistema Simplexa ) de Focus Diagnostics está diseñado para estimar la respuesta espectral de cuatro colorantes (FAM, JOE, CFR610 y Q670) a través de cuatro canales en el 3M Integrated Cycler y determinar la matriz espectral. Este producto no tiene fines diagnósticos para ninguna enfermedad o trastorno. RESUMEN Y EXPLICACIÓN El Simplexa Spectral Calibration Panel ofrece cuatro mezclas reactivas predeterminadas (plantillas espectrales) que contienen moléculas de ácidos nucleicos bicatenarias, cebadores y enzimas que se han utilizado para generar señales fluorescentes definidas para ser analizadas con el software Integrated Cycler Studio. Una vez que se ejecuta el panel de calibración del sistema en el 3M Integrated Cycler, el personal del servicio técnico de Focus Diagnostics calculará y suministrará una nueva matriz espectral. Este hecho respalda el uso repetido de ensayos Simplexa en el 3M Integrated Cycler. Los instrumentos que detectan varios tipos de colorantes de longitudes de onda muy cercanas necesitan métodos correctivos para resolver cada una de las señales a lo largo de todos los canales, de manera que los datos brutos del canal se puedan convertir en datos de colorante. En la mayoría de los equipos se emplea una combinación de hardware (filtros ópticos) y software (rutinas químicas y de calibración) para diferenciar las señales de cada colorante. El panel de calibración del sistema Simplexa ofrece una señal fluorescente pura y exclusiva para cada uno de los cuatro colorantes, mediante el diseño químico integral de una sola diana para cada una de las plantillas espectrales. El software Integrated Cycler Studio mide las propiedades espectrales de cada colorante y calcula los valores para diferenciar las contribuciones de las señales de los diferentes colorantes en los canales principales y adyacentes. PRINCIPIOS DEL PROCEDIMIENTO El Simplexa Spectral Calibration Panel (SC1100) está diseñado como un conjunto de mezclas reactivas de plantillas espectrales listas para usar, descongelar y cargar con el formato de disco universal y destinadas al cálculo de la matriz espectral del 3M Integrated Cycler. El panel de calibración del matriz espectral Simplexa está compuesto por tubos de un solo uso que contienen mezclas reactivas preparadas previamente y listas para ser cargadas (plantillas espectrales) específicas para cada uno de los cuatro canales de colorantes: SC0520 FAM, SC0560 JOE, SC0610 CFR610 y SC0682 Q670 del 3M Integrated Cycler. Las plantillas espectrales no están diseñadas para ser mezcladas entre ellas ni con ningún otro tipo de muestra ambiental o de un paciente; han sido fabricadas siguiendo un diseño integral y están listas para el uso. MATERIALES SUMINISTRADOS El Simplexa Spectral Calibration Panel de Focus Diagnostics contiene material suficiente para llevar a cabo dos series de reacciones. Tras recibirlos, conserve todas las plantillas a una temperatura comprendida entre -10 C y -30 C (no use un congelador sin escarcha [no-frost]). Conservadas a una temperatura de -10 C a -30 C, las plantillas permanecen estables hasta el final del mes de caducidad que se indica en el envase del kit. Descripción del kit Nombre del compuesto REF SÍMBOLO CE EN ETIQUETA Color del tapón Número de viales Reacciones por kit/vial Volumen por vial Simplexa Spectral Template 520 SC0520 CONTROL A Verde 2 16/8 100 µl Simplexa Spectral Template 560 SC0560 CONTROL B Azul 2 16/8 100 µl Simplexa Spectral Template 610 SC0610 CONTROL C Rojo 2 16/8 100 µl Simplexa Spectral Template 682 SC0682 CONTROL D Morado 2 16/8 100 µl

Página 2 Descripción de los componentes del kit Componente del kit Simplexa Spectral Calibration Panel QR-Code Card (Tarjeta de códigos QR del panel de calibración del matriz espectral Simplexa ) Descripción de los componentes Parámetros específicos de la prueba MATERIALES NECESARIOS PERO NO SUMINISTRADOS 1. Equipo Integrated Cycler con software Integrated Cycler Studio versión 3,0 o superior. 2. Universal Discs para el equipo Integrated Cycler. 3. Cinta de cubierta para Universal Disc. 4. Micropipeta(s), de canal único, multicanal y/o de repetición, de una precisión de al menos 10 µl. 5. Congelador (eliminación de escarcha manual) de -10 C a -30 C (para guardar congelados los componentes del kit). 6. Microcentrífuga. 7. Puntas para micropipetas, estériles, desechables, exentas de ARNasas/ADNasas, con protección contra aerosoles. 8. Guantes sin polvo desechables. 9. Bloque refrigerador para Universal Disc. ESTABILIDAD Y MANIPULACION 1. Conserve las plantillas a una temperatura entre -10 C y -30 C (no use un congelador sin escarcha [no-frost]). 2. Inicie la prueba antes de que pasen 30 minutos tras sacar las plantillas del congelador. 3. No use las plantillas después de la fecha de caducidad. 4. No utilice el agitador. 5. No combine las plantillas de distintos lotes. 6. No combine las plantillas con ningún otro material externo. 7. No exponga las plantillas a luz brillante durante periodos prolongados de tiempo. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES 1. Para uso diagnóstico in vitro. 2. Siga las precauciones habituales. 3. Cuando manipule las plantillas, use equipos de protección personal, como guantes y batas de laboratorio, entre otros. Lávese las manos minuciosamente cuando termine de realizar la prueba. 4. No pipetee con la boca. 5. No fumar, beber, comer, manipular lentes de contacto ni aplicarse maquillaje en las zonas en las que se usan las plantillas. 6. Elimine las plantillas que no se hayan usado conforme a las normas locales, estatales y autonómicas. 7. La contaminación de las plantillas puede producir resultados erróneos. Utilice técnicas asépticas. 8. Pipetee y manipule las plantillas con cuidado para evitar que se mezclen con muestras de pocillos adyacentes. 9. Utilice técnicas de pipeteo adecuadas y mantenga las mismas condiciones de pipeteo durante todo el procedimiento para garantizar valores óptimos y reproducibles. 10. No sustituya o mezcle plantillas de diferentes lotes o de otros fabricantes. 11. Siga únicamente el protocolo descrito en este prospecto. Las desviaciones del protocolo o el uso de tiempos o temperaturas diferentes de las especificadas pueden producir resultados erróneos. 12. La preparación del ensayo debe realizarse a temperatura ambiente (aproximadamente en el rango de 18 a 25 C). Las plantillas se deben mantener a temperatura ambiente o fría utilizando un bloque refrigerador y el disco universal debe mantenerse en un bloque refrigerador de discos universales precongelado mientras se cargan las plantillas. 13. Inicie el proceso antes de que pasen 30 minutos tras retirar las plantillas espectrales del congelador. 14. No reutilice los Universal Discs que ya han estado expuestos a las plantillas. 15. Deseche el disco usado sin separar ni retirar la cinta de cubierta. 16. La mezcla de reacción contiene un máximo del 5% de glicerol que puede causar irritación si se inhala o entra en contacto con la piel. En caso de inhalación o contacto con la piel deben tomarse medidas de primeros auxilios. 17. Si el envase del kit o su contenido tienen aspecto de estar rotos o deteriorados, no los use y póngase en contacto con Focus Diagnostics. La información de contacto aparece en la última página de este documento. INSTRUCCIONES DE USO A. CONFIGURACIÓN DEL EQUIPO DE PCR EN TIEMPO REAL Consulte el manual del operador del equipo Integrated Cycler para configurar el software Integrated Cycler Studio con el fin de añadir la definición del ensayo, configurar los procesos, analizarlos y exportarlos en el equipo Integrated Cycler. B. ÁREA DE AMPLIFICACIÓN POR PCR EN TIEMPO REAL La preparación del disco universal de 96 pocillos para el Simplexa Spectral Calibration Panel debe llevarse a cabo en una zona habilitada exclusivamente para ello. Use un bloque refrigerador de discos universales mientras configura el ensayo del Simplexa Spectral Calibration Panel. No prepare los tubos en un área de preparación de reactivos sin plantillas.

Página 3 1. Descongele las plantillas espectrales a temperatura ambiente (aproximadamente entre 18 y 25 C). Cada vial de componente del kit contiene una cantidad de plantilla suficiente para 8 reacciones. Antes de cada uso, mezcle suavemente cada uno de los componentes y centrifúguelos brevemente para depositar el contenido en el fondo del tubo. Volúmenes de plantilla espectrales Plantilla espectral Volumen / 1 reacción Simplexa Spectral Template 520 10 µl Simplexa Spectral Template 560 10 µl Simplexa Spectral Template 610 10 µl Simplexa Spectral Template 682 10 µl 2. Utilice las plantillas espectrales antes de que pasen 30 minutos desde la descongelación. 3. Añada 10 µl de las plantillas espectrales directamente a cada pocillo tal y como se describe en la siguiente tabla. 4. El rayo BLANCO (Rayo 5 en la tabla) no recibe material de ningún tipo. 5. Cubra el disco con cinta de cubierta para discos universales. 6. Cargue el Universal Disc sellado en el equipo Integrated Cycler e inicie el proceso. Pocillo Rayo 1 Rayo 2 Rayo 3 Rayo 4 Rayo 5 A SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO B SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO C SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO D SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO E SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO F SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO G SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO H SC0520 SC0560 SC0610 SC0682 BLANCO C. VERIFICACIÓN DE LOS RESULTADOS 1. Examine cada proceso para determinar si es válido. Utilice los valores que se indican en la siguiente tabla. Criterios para una plantilla espectral válida Control Resultado Spectral Template 520 Detectado (0<Ct 45) SOLO en el canal FAM (no en el JOE, CFR610, o Q670) Spectral Template 560 Detectado (0<Ct 45) SOLO en el canal JOE (no en el FAM, CFR610, o Q670) Spectral Template 610 Detectado (0<Ct 45) SOLO en el canal CFR610 (no en el FAM, JOE o Q670) Spectral Template 682 Detectado (0<Ct 45) SOLO en el canal Q670 (no en el FAM, JOE o CFR610) Blanco No detectado D. EXPORTACIÓN DE LOS RESULTADOS 1. Exporte el archivo del análisis como se indica en el manual del operario del equipo 3M Integrated Cycler. 2. Envíe por correo electrónico el archivo del proceso al departamento de Servicio Técnico de Focus Diagnostics calibration@focusdx.com E. CARGA DE UNA NUEVA MATRIZ Una vez recibida la nueva documentación de corrección espectral, cargue la nueva matriz espectral según las instrucciones del manual del operario del 3M Integrated Cycler. LIMITACIONES La corrección espectral es exclusiva para el instrumento. Este ensayo debe ser realizado para cada 3M Integrated Cycler cada 6 meses o cuando sea necesario. CARACTERÍSTICAS DEL ENSAYO ESTUDIOS CLÍNICOS El Simplexa Spectral Calibration Panel no tiene ningún uso clínico directo. Se utilizará para la calibración espectral del 3M Integrated Cycler.

Página 4 REPRODUCIBILIDAD Se evaluó la reproducibilidad del panel de calibración del sistema Simplexa. El laboratorio interno de Focus Diagnostics evaluó la reproducibilidad interequipo, interoperador, interensayo e intraensayo del dispositivo. El ensayo fue llevado a cabo por tres operarios durante 4 días consecutivos. Para considerar el proceso válido al menos cuatro de los ocho pocillos de replicado de cada plantilla espectral no debían manifestar errores. Los operarios no comunicaron ningún error o dificultad durante la preparación y realización de los ensayos. Todos los componentes de la varianza de los valores Ct evaluados cumplieron los criterios de aceptación establecidos, lo que indica que el panel tiene una varianza baja tanto para los valores de Ct como para los valores de corrección espectral tal y como demuestran los ensayos de reproducibilidad interequipo, interoperador, interensayo e intraensayo del dispositivo. Los resultados se presentan en la tabla siguiente. Cálculo de los componentes de la varianza correspondientes a los valores de Ct Colorante Media de Ct Fuente de variabilidad Varianza DE % CV Interequipo 0,08 0,28 0,9 Interoperador 0,03 0,17 0,6 CFR610 30,0 Interensayo 0,00 0,00 0,0 Intraensayo 0,21 0,46 1,5 Total 0,32 0,57 1,9 Interequipo 0,18 0,42 1,5 Interoperador 0,00 0,00 0,0 FAM 28,9 Interensayo 0,01 0,08 0,3 Intraensayo 0,02 0,14 0,5 Total 0,21 0,46 1,6 Interequipo 0,21 0,46 1,6 Interoperador 0,00 0,00 0,0 JOE 28,8 Interensayo 0,02 0,16 0,5 Intraensayo 0,03 0,16 0,6 Total 0,26 0,51 1,8 Interequipo 0,04 0,20 0,7 Interoperador 0,01 0,09 0,3 Q670 29,0 Interensayo 0,05 0,22 0,8 Intraensayo 0,13 0,36 1,3 Total 0,23 0,48 1,7

Página 5 Cálculo de los componentes de la varianza correspondientes a los valores de las matrices espectrales Componentes de las matrices CFR610 a 682 FAM a 560 JOE a 520 Fuente de variabilidad Varianza (%) DE (%) Interoperador 0,0000 0,01 Interensayo 0,0005 0,02 Intraensayo 0,0023 0,05 Total 0,0028 0,05 Interoperador 0,0010 0,03 Interensayo 0,0108 0,10 Intraensayo 0,0296 0,17 Total 0,0414 0,20 Interoperador 0,0000 0,00 Interensayo 0,0004 0,02 Intraensayo 0,0038 0,06 Total 0,0042 0,06 REFERENCIAS 1. 3M Integrated Cycler Studio Operator Manual (PI.MOL1101.IVD, PI.MOL1101.OUS, PI.MOL1101.QQD, PI.MOL1101UD) El uso de sondas Scorpions para el diagnóstico in vitro en seres humanos está protegido por una licencia de Focus Diagnostics, Inc. de DxS, Ltd. Los colorantes Black Hole Quencher, CAL Fluor y Quasar son marcas registradas de Biosearch Technologies, Inc. ('BTI'). La tecnología de los fluoróforos Black Hole Quencher, CAL Fluor y Quasar está autorizada según un contrato con BTI y estos productos se venden exclusivamente con fines clínicos, diagnósticos o de investigación y desarrollo. AVISO AL COMPRADOR Y USUARIO: LICENCIA LIMITADA LEA ESTE DOCUMENTO ATENTAMENTE. ESTE ES UN CONTRATO ENTRE USTED Y FOCUS DIAGNOSTICS, INC. ACERCA DEL USO QUE USTED HAGA DE ESTE PRODUCTO Y PROCESO. EL PRESENTE CONTRATO DE LICENCIA CONTIENE LIMITACIONES A LA LICENCIA. EL USO QUE PUEDE HACER DE ESTE PRODUCTO Y PROCESO ESTÁ SUJETO A LOS TÉRMINOS Y CONDICIONES QUE FIGURAN EN ESTE CONTRATO DE LICENCIA Y, SI USA ESTE PRODUCTO, SE COMPROMETE A HACERLO SEGÚN DICHOS TÉRMINOS Y CONDICIONES. SI NO ACEPTA DICHOS TÉRMINOS Y CONDICIONES, DEBE DEVOLVER EL PRODUCTO A LA MAYOR BREVEDAD JUNTO CON SU ENVASE ORIGINAL A FOCUS DIAGNOSTICS, INC. Y SE LE REEMBOLSARÁ EL PRECIO DE COMPRA. Este producto y proceso contiene información comercial secreta propiedad de Focus Diagnostics, Inc., entre otras, la formulación y la identidad de los reactivos y el modo de utilización del producto para ajustar la respuesta espectral del Integrated Cycler. Asimismo, la descripción del proceso que figura en el prospecto está sujeta a derechos de autor. El precio de compra de este producto incluye el derecho limitado, no exclusivo y no transferible del comprador de utilizar solamente la cantidad de producto comprada para poner en práctica el proceso descrito en este prospecto en el Integrated Cycler del comprador. Todos los derechos de propiedad, titularidad y propiedad intelectual del producto y el proceso descritos en este prospecto son propiedad de Focus Diagnostics, Inc. y sus filiales en todo momento, sujetos a su derecho de consumir los reactivos comprados. Focus Diagnostics, Inc. tiene el derecho a otorgarle esta licencia. Todos los derechos no otorgados por esta licencia quedan reservados a Focus Diagnostics, Inc. y sus filiales. Restricciones 1. Prohibida la utilización, análisis, evaluación, modificación ni recreación, total o parcial, del producto, del proceso o de la documentación asociada, excepto de la manera en la que permite este contrato. 2. Prohibida la aplicación de ingeniería inversa para identificar la formulación de los reactivos o el proceso de ajuste de la respuesta espectral, así como la utilización del producto para comparar, desarrollar o evaluar productos o procesos similares. 3. Prohibida la retirada del producto o de la documentación ninguna indicación de advertencia, secreto comercial, derechos de autor o propiedad. 4. Prohibida la modificación, venta, alquiler, transferencia, reventa, préstamo o distribución del producto o del proceso, y la creación de trabajos derivados basados en el producto, el proceso o cualquiera de sus partes o cualquier interés sobre los mismos. 5. Usted acepta utilizar el producto exclusivamente bajo el cumplimiento de todos los reglamentos, leyes y normativas aplicables. REPRESENTANTE AUTORIZADO mdi Europa GmbH, Langenhagener Str. 71 30855, Langenhagen-Hannover, Alemania INFORMACIÓN PARA COMPRAS Teléfono: (800) 838-4548 (solo EE.UU.) (562) 240-6500 (Internacional) Fax: (562) 240-6510 PI.SC1100 Rev. B Fecha de redacción:19 mayo 2016

Página 6 ASISTENCIA TÉCNICA Teléfono: (800) 838-4548 (solo EE.UU.) (562) 240-6500 (Internacional) Fax: (562) 240-6526 Visite nuestro sitio web en www.focusdx.com Cypress, California 90630, EE.UU.