1. INFORMACIÓN DEL CERTIFICADO Número de certificado: 14CDA38EEC5 Fecha de la última actualización del conjunto de datos: 2015-04-21 URL del conjunto de datos: http://ipt.sibcolombia.net/crsib/resource.do?r=255_ptar_20150420 Número de registros biológicos reportados: 1 2. INFORMACIÓN DEL PERMISO Autoridad Autoridad Nacional de Licencias Ambientales Número del permiso 0255 Titular Nit o cédula 899999063-3 Fecha de emisión del permiso 2014-03-14 3. INFORMACIÓN DEL RECURSO Título del proyecto DIVERSIDAD BACTERIANA ASOCIADA A UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES (PTAR) Y ESTUDIO DE MICROORGANISMOS PRESENTES INVOLUCRADOS EN LA DEGRADACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS. Resumen Recolección de especímenes de agua y sedimento en cuatro partes diferentes de la planta: canal inspección a la salida del humedal de tratamiento Palabras clave PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES, DIVERSIDAD MICROBIANA, LIPASAS, INDENTIFICACIÓN MOLECULAR, Specimen
3.1 Contacto del recurso Lina Marcela Silva Bedoya 3.2 Contacto del permiso Claudia Ximena Moreno Herrera Docente investigador cxmoreno@unal.edu.co 3.3 Proveedor de los metadatos Lina Marcela Silva Bedoya 3.4 Cobertura geográfica
Recolección de especímenes de agua y sedimento en cuatro partes diferentes de la planta: canal inspección a la salida del humedal de tratamiento Coordenadas: 6 10'12''N y 6 10'12''N Latitud; 75 22'12''W y 75 22'12''W Longitud 3.5 Cobertura taxonómica Recolección de especímenes de agua y sedimento en cuatro partes diferentes de la planta: canal inspección a la salida del humedal de tratamiento Categorías taxonómicas Dominio: Bacteria s comunes: Bacteria 3.6 Cobertura temporal 21 de septiembre de 2014-21 de junio de 2015 3.7 Métodos de muestreo Los muestreos se llevarán a cabo en la planta de tratamiento de aguas residuales de una empresa de alimentos procesados del municipio de Rionegro en el departamento de Antioquia. La planta consta de un canal de entrada que canaliza el agua residual hacia el tanque homogenizador, un sistema CAF que retira la mayor parte de las grasas por métodos físicos y químicos, un tanque Imhoff y un humedal de tratamiento de flujo horizontal subsuperficial. Se realizarán 3 muestreos, con un intervalo de dos meses entre ellos. Se tomarán muestras en cuatro partes diferentes de la planta: Canal de entrada, entrada tanque Imhoff, caja de inspección a la salida del tanque Imhoff y caja de inspección a la salida del humedal de tratamiento. La muestra se depositará en un frasco estéril y se transportaran inmediatamente en refrigeración al Laboratorio de Biología Celular y Molecular de la Universidad Nacional de Colombia sede. En cada muestreo también se tomarán muestras para los análisis físico-químicos y serán enviados para un análisis externo. Una vez en el Laboratorio de Biología Celular y Molecular las muestras serán procesadas inmediatamente para los análisis dependientes e independientes de cultivo. Método dependiente de cultivo De cada muestra se realizarán diluciones seriadas para la siembras en agares seleccionados e incubados en condiciones según lo recomienda Sanders et al., 2010. El total de las colonias crecidas en los medios de cultivo (UFC/ ml), serán colectadas como barridos totales para determinar la fracción cultivable de la comunidad. Se seleccionaran algunos aislados según características fenotípicas y genotípicas. La fracción cultivable y los aislados puros se guardarán para el análisis molecular en glicerol al 30% a -20 y -80ºC en el cepario del grupo de investigación de Microbiodiversidad y Bioprospección de la Universidad Nacional sede. Determinación de microorganismos productores de lipasas Para observar la producción de lipasas, los aislados serán cultivados sobre placas de agar Spirit Blue con una solución de reactivo lipasas según lo recomienda Frank &Yousef, 2004. El procedimiento de cuantificación se realizará según el protocolo de Hasanuzzaman (2004) con las modificaciones de Pérez-Carrascal, 2012. La extracción del ADN de los aislados puros se realizará con el kit UltraClean Microbial DNA Isolation Kit (MO BIO Laboratorios) siguiendo las instrucciones del fabricante. La amplificación de la región ITS (la región espaciadora inter-génica entre el 16-23S rdna) de los diferentes aislados obtenidos se analizará con los primers G1 (GAAGTC GTAACAAGG) y L1(CAAGGCATCCACCGT) para comparar las diferencias genéticas entre ellos (Jensen et al., 1993). Amplificación del gen ribosomal 16S ADNr: Los aislados diferentes se identificaran por la amplificación usando los iniciadores Eubac 27F (AGA GTT TGA TCC TGG CTC AG), 1492R (GGT TAC CTT GTT ACG ACT T) (Espejo et al., 1998). Aproximadamente 25 ng del DNA bacteriano será usado como
molde para la reacción. La mezcla y el programa de la reacción serán usados como describe Moreno et al. (2006) y Espejo et al.,(1998). Los productos de PCR del ADNr 16S serán purificados y secuenciados por la empresa MACROGEN (Corea) bajo condiciones estandarizadas por ellos. Una vez obtenidas, las secuencias los resultados serán analizados usando BLAST (Altschul et al., 1997) y el proyecto de base de datos ribosomal (RDP) (Cole et al., 2009). Alineamientos serán realizados usando la herramienta Clustal W del programa Bioedit (Hall, 1999) y los árboles filogenéticos serán construidos usando el programa (MEGA 5.0) (Tamura et al., 2007). 3.8 Datos de la colección de la colección Laboratorio de Biomineralogía y Biohidrometalurgia Identificador de la colección LBB Identificador de la colección parental 199 Método de conservación de los especímenes Congelado 3.9 Datos del proyecto Título DIVERSIDAD BACTERIANA ASOCIADA A UNA PLANTA DE TRATAMIENTO DE AGUAS RESIDUALES (PTAR) Y ESTUDIO DE MICROORGANISMOS PRESENTES INVOLUCRADOS EN LA DEGRADACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS. Claudia Ximena Moreno Herrera Rol Investigador Principal Fuentes de financiación CONVOCATORIA DEL PROGRAMA NACIONAL DE PROYECTOS PARA EL FORTALECIMIENTO DE LA INVESTIGACIÓN, LA CREACIÓN Y LA INNOVACIÓN EN POSGRADOS DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA 2013-2015 Modalidad 2: Nuevos proyectos de investigación, creación o innovación Descripción del área de estudio Los muestreos se llevarán a cabo en la planta de tratamiento de aguas residuales de una empresa de alimentos procesados del municipio de Rionegro en el departamento de Antioquia. La planta consta de un canal de entrada que canaliza el agua residual hacia el tanque homogenizador, un sistema CAF que retira la mayor parte de las grasas por métodos físicos y químicos, un tanque Imhoff y un humedal de tratamiento de flujo horizontal subsuperficial. Descripción del proyecto Objetivo general Caracterizar la diversidad microbiana asociada a una planta de tratamiento de aguas residuales (PTAR) usando métodos dependientes e independientes de cultivo y evaluar cepas involucradas en la degradación de ácidos grasos presentes en el agua residual Objetivos específicos Identificar los aislados asociados a la PTAR por análisis molecular Seleccionar y evaluar a nivel de laboratorio algunas cepas involucradas en la degradación de ácidos grasos presentes en el agua residual. Analizar la comunidad bacteriana asociada a la PTAR usando métodos dependientes de cultivo 3.10 Partes asociadas
Lina Marcela Silva Bedoya La veracidad de este certificado se puede corroborar en la siguiente dirección web: http://ipt.sibcolombia.net/cr-sib/pdf.do?r=255_ptar_20150420&n=14cda38eec5