Departamento de Ciencias / Biología Primeros medios Prof. Daniela Gutiérrez G. Instrucciones generales: Guía de laboratorio: Reconocimiento de moléculas orgánicas. - Lean con detención cada una de las indicaciones de esta guía de trabajo. - Asegúrense de tener todos los materiales que se requieren, regístrenlos en cada una de las actividades. - Sean cuidadosos con la manipulación de los materiales, especialmente los de vidrio. - Para cada una de las actividades deben anotar las observaciones correspondientes, ya que, las utilizarán para elaborar el informe de laboratorio. Reactivos: Lugol: es una disolución de yodo molecular (I 2 ) y yoduro potásico KI en agua destilada. Se utiliza para identificar polisacáridos como los almidones, glucógeno y ciertas dextrinas. Ésta sustancia absorbe el yodo produciendo una coloración azul intensa, coloración que desaparece al calentar, porque se rompe la estructura que se ha producido, pero vuelve a aparecer al enfriar. Biuret: contiene CuSO4 en solución acuosa alcalina (de NaOH o KOH). La reacción se basa en la formación de un compuesto color violeta, debido a la formación de un complejo de coordinación entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrógeno que forma parte de los enlaces peptídicos entre los aminoácidos. Sudán III: es un colorante que se utiliza para detectar específicamente las grasas, porque es insoluble en agua y en cambio es soluble en las grasas. Al ser de color rojo, cuando se disuelve tiñe las grasas de color rojo anaranjado. Actividad 1: Reconocimiento de glúcidos. 1 trozo de papa pelada Lechuga 1 trozo de pera y 1 trozo de pan 6 tubos de ensayo Agua destilada Gradilla Solución de glucosa al 20% Mortero Lugol Plumón permanente 1. Pele, lave y triture, con ayuda del mortero, un trozo de papa y un trozo de pera, deje cada uno de los preparados en un vaso precipitado. 2. Triture la hoja de lechuga hasta obtener un jugo, deposítelo en un tubo precipitado. 3. Triture un trozo de pan en el mortero, agregue agua destilada hasta formar una pasta semilíquida, deposítela en un vaso precipitado. 4. Marque los tubos de ensayo del 1 al 6 con plumón permanente.
5. Adicione a los tubos de ensayo lo siguiente: Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 3 ml de papa 3 ml de pera 3 ml de 3 ml de pan solución de molido en glucosa al 20% agua. 3 ml de agua destilada. 3 ml de jugo de lechuga 6. Agregue 1 ml de lugol en cada uno de los tubos y mezclar con precaución. 7. Observe y registre los resultados. Muestra Antes de calentar Observaciones Después de calentar Tubo 4 Tubo 5 Tubo 6 8. Hierva 200 ml de agua en un vaso precipitado y deposite los 6 tubos de ensayo. Déjelos durante 3 minutos y vuelva a registrar sus observaciones. 9. Responda: a. Identifique la variable dependiente y la independiente: Dependiente Independiente b. Por qué en el tubo N 1 se utiliza agua destilada?
Actividad 2: Reconocimiento de lípidos. 1 trozo de pera Gradilla 1 trozo de jamón Mortero 1 ml de aceite vegetal Reactivo Sudan III 5 ml de agua destilada Plumón permanente 5 tubos de ensayo 1. Marque tres tubos de ensayo con los números del 1 al 5. 2. Adicione a los tubos de ensayo lo siguiente: Tubo 4 Tubo 5 1 ml de jugo de 2 ml de jugo pera más 1 ml de de lechuga agua destilada. 1 ml de agua más 1 ml de aceite 1 ml de jamón triturado más 1 ml de agua destilada. 2 ml de agua destilada 3. Agregue a cada uno de los tubos de ensayo 1 gota de reactivo de Sudan III, mezcle con precaución. 4. Observe lo que ocurre en cada uno de los tubos y registre los resultados. Muestra Observaciones Tubo 4 Tubo 5 5. Reconozca la variable dependiente y la variable independiente. Variable dependiente Variable independiente
Actividad 3: Reconocimiento de proteínas. ¼ de sobre de gelatina sin sabor Jugo de lechuga Clara de huevo Jugo de pera 5 tubos de ensayo Gradilla Mortero Plumón permanente 1. Preparar ¼ de sobre de gelatina sin sabor según las indicaciones de la caja. Mantener 20 ml a baño María. El baño María es un método empleado en las industrias (farmacéutica, cosmética, de alimentos y conservas), en laboratorio de química y en la cocina, para conferir temperatura uniforme a una sustancia líquida o sólida o para calentarla lentamente, sumergiendo el recipiente que la contiene en otro mayor con agua que está en ebullición. 2. Separar la clara del huevo (albumina) y dejarla en un vaso precipitado. 3. Marque los tubos de ensayo del 1 al 5 con plumón permanente. 4. Adicione a los tubos de ensayo lo siguiente: Tubo 4 Tubo 5 2 ml de agua 2 ml de solución de 2 ml de clara de 2 ml de jugo de 2 ml de jugo de gelatina huevo pera lechuga 4. Agregar 1 ml de reactivo de Biuret en cada uno de los tubos y mezclar con precaución. 5. Observar y registrar los resultados. Muestra Observaciones Tubo 4 Tubo 5
Actividad 4: Desnaturalización de Proteínas. ¼ de sobre de gelatina sin sabor Clara de huevo Vinagre Leche entera 6 tubos de ensayo Papel ph a. Efecto de la temperatura: 1. Rotule tres tubos de ensayo. 2. Adicione a los tubos de ensayo lo siguiente: 2 ml de clara de huevo 2 ml de solución de gelatina 2 ml de leche entera 3. Hierva 100 ml de agua en un vaso precipitado, y coloque los tubos 1, 2 y 3. Deje los tubos durante 5 minutos y registre sus observaciones. Registre los resultados. b. Efecto del ph. 1. Rotule tres tubos de ensayo. 2. Adicione a los tubos de ensayo lo siguiente: 2 ml de clara de huevo 2 ml de solución de gelatina 2 ml de leche entera 3. Utilizando el papel ph, determine el ph del vinagre y regístrelo. 4. Agregue a cada uno de los tubos de ensayo 1 ml de vinagre (ácido acético) y observe lo que ocurre en cada uno de los tubos. Registre los resultados.