INSTITUCIÓN EDUCATIVA INEM JORGE ISAACS LABORATORIO Nº1 DE BIOLOGÍA EL MICROSCOPIO NORMAS DE TRABAJO 1. La práctica en la biología implica con frecuencia el uso de elementos químicos, biológicos o físicos punzantes. El estudiante debe asumir todo el cuidado del caso para protegerse de posibles accidentes. En primera instancia debe atender con precisión a su instinto de conservación, y absolver cualquier duda de procedimiento, con el docente. 2. El estudiante será responsable del material y equipo que emplee y en el caso de que, dentro de un grupo, no se pueda determinar individualmente a los responsables del daño, todo el grupo se considerará responsable asumiendo su costo. 3. Se recomienda que el estudiante porte una bata de laboratorio blanca, llevar el cabello recogido, usar tapabocas, guantes y gafas de seguridad. Los estudiantes que no cuenten con estos materiales, deberán comunicarle al docente quien hará las recomendaciones. 4. Los estudiantes deberán seguir ciertas normas de comportamiento, como: no fumar, no comer, no hacer regueros, no correr, no jugar, no bromear, no utilizar encendedores ni fósforos, ni perturbar el orden y silencio que requiere el trabajo. 5. Debe ser puntual, al inicio de la práctica, de ello dependerá su éxito en el laboratorio. 6. Leer las fichas técnicas y de seguridad de los productos que van a usarse durante la práctica. Atender las recomendaciones del docente respecto al manejo de los materiales, equipos y reactivos. 7. Evite ingerir, probar o inhalar compuestos químicos, soluciones y sus vapores. 8. En caso de accidente, derrame, salpicadura o situaciones imprevistas, mantenga la calma y avise al docente. 9. Se deben respetar y conservar todas las formas de vida. 10. Al terminar una práctica, el aula debe quedar en buen estado de orden, aseo, presentación y disposición adecuada los desechos o basuras. PRÁCTICA DE LABORATORIO Nº 1 EL MICROSCOPIO Objetivo: Desarrollar la metodología experimental a través de la observación, uso y cuidado del Microscopio. Introducción: El Microscopio es un instrumento óptico, compuesto por una serie de lentes que permiten ver de cerca y aumentados objetos pequeños y detalles estructurales imperceptibles a simple vista. Existen diferentes tipos de microscopio los cuales varían en su poder de aumento y resolución. Los rangos aproximados de magnificación se encuentran entre 4X y 40X (Microscopio Estereoscópico), 20X y 25X (Microscopio Simple o Lupa), 400X 1500X (Microscopio Compuesto), 10.000X y 16.000X (Microscopio Electrónico), donde X es el número de veces que se aumenta el tamaño real del objeto. Además de estos existen algunos microscopios especiales como los Microscopios de Contraste de Fase y los Microscopios invertidos. PARTES DEL MICROSCOPIO COMPUESTO 1. PARTE MECÁNICA: 1
Es el conjunto de piezas que sujetan o permiten el manejo de la parte óptica. Consta de: PIE O BASE: Que lo sostiene. COLUMNA O BRAZO: Articulado con el pie sostiene el tubo del Microscopio y permite trasladarlo de un lugar a otro. TUBO: Es un cilindro hueco que lleva en su parte inferior los objetivos y en la parte superior los oculares. TORNILLO MACROMÉTRICO: Permite acercar el objetivo a la platina para observar la muestra. PLATINA: Sostiene el objeto que se observa, lleva en su centro un orificio que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente luminosa, puede ser fija o móvil. TORNILLO MICROMÉTRICO: De enfoque fino. Permite mover lentamente el tubo y afinar la visión. 2. PARTES ÓPTICAS Son las partes que aumentan la imagen, consta de dos sistemas concéntricos o convergentes de lentes de aumento que son el objetivo y los oculares, a los cuales debe agregársele el sistema de iluminación, que facilita y mejora la observación microscópica. OCULAR: Conjunto de lentes especializadas en aumentar la Imagen previamente formada por el objetivo. OBJETIVOS: Conjunto de Lentes responsables de aumentar y resolver (distinguir las diferentes partes) el objeto a observar. Son dos o tres tubos colocados en el extremo inferior del tubo. El más corto es el de menor aumento. Lleva el número de su poder de ampliación seguidos siempre por una X, que significa aumento. La ampliación verdadera de la imagen es el producto de este número que tiene el objetivo multiplicado por el número que tiene el ocular. PORTAOBJETIVOS REVÓLVER: Gira en uno u otro sentido y permite alinear con el tubo el objetivo deseado. ESPEJO: Refleja la luz procedente de la lámpara u otra fuente luminosa. DIAFRAGMA: Sistema para controlar la cantidad de luz que llega al objeto. CONDENSADOR: Conjunto de lentes que focalizan la luz sobre la muestra. 2
AMPLIACIÓN DE LA IMAGEN= # OCULAR X # OBJETIVO EJEMPLO ----------------------------- 10X X 5X = 50X = 50 aumentos USO DEL MICROSCOPIO Tome el microscopio del brazo con una mano y coloque la otra mano bajo la base. Coloque cuidadosamente el microscopio sobre la mesa donde va a trabajar. Localice las partes del microscopio y aprenda los nombres y funciones de cada una de ellas. 1. PREPACIÓN DE LA MUESTRA: Sobre un portaobjetos, coloque el objeto en el centro, deje caer una gota de la sustancia indicada (Agua, lugol, azul de metileno, etc, según lo indique el experimento), cubra lentamente con la laminilla cubreobjetos, dejándola caer de modo que el agua o sustancia vaya expulsando el aire, para evitar burbujas. 2. ENFOQUE: Coloque la preparación sobre la Platina. Gire el revólver y ubique el objetivo de menor aumento. Utilizando el tornillo macrométrico, se baja el objetivo, sin mirar por el Ocular sino por fuera. Observando por el Ocular, sube lentamente el objetivo, utilizando el Macrométrico. La imagen aparecerá; aclárala con el Tornillo Micrométrico. Pase a otro Objetivo de mayor aumento girando el revólver; quedará enfocado automáticamente; aclara si es necesario con el Tornillo Micrométrico. Mueve el Diafragma y elige la iluminación deseada. 3
MANTENIMIENTO Y PRECAUCIONES *No se deben tocar nunca las lentes con las manos, sino con pañuelos especiales para lente. *Para cambiar el objetivo, utilice siempre el revólver. *Cuando finalice el trabajo, ponga el objetivo de menor aumento en posición de observación y aleje la platina. *Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión de práctica. EL ESTEREOSCOPIO Tiene dos lentes objetivos y posee una profundidad de foco mucho mayor que la del microscopio compuesto; ambas características le permiten producir imágenes tridimensionales. El poder de resolución y de aumento del estereoscopio son mucho menores que las del microscopio compuesto y por esta razón el estereoscopio se usa para estudiar objetos y especímenes relativamente grandes (razón por la cual también se le llama microscopio de disección). Las partes de este microscopio son prácticamente las mismas que las discutidas para el microscopio compuesto. En este ejercicio se aprenderá el uso correcto del estereoscopio. CÓMO FUNCIONA EL MICROSCOPIO? 1. Diámetro del campo óptico: para hallar el diámetro del campo óptico, coloque en la lámina porta objeto un recuadro de papel milimetrado, agregue una gota de agua, observe en el objetivo de menor valor, pase al siguiente objetivo. Dibuje lo observado y escriba el valor del diámetro del campo óptico. Cada cuadrito del papel equivale a un milímetro. 2. Recorte la letra e minúscula y colóquela invertida en la lámina portaobjetos, agregue una gota de agua y cúbrala con la lámina cubre objetos. Observe y dibuje en 5X, 10X y 20X 3. Qué ocurre con el campo óptico a medida que aumenta el valor del objetivo? 4. Explique desde el punto de vista de la física por qué se invierten las imágenes en el microscopio óptico. Para recordar: Siempre que debe dibujar lo observado en el microscopio, lo debe hacer dentro del campo óptico, colocando en la parte superior derecha el valor del objetivo en el que realizó la observación. Todo lo dibujado se hace a lápiz y lo más aproximado a la realidad. EXPERIMENTACIÓN Realice las siguientes experiencias y escriba los resultados de las observaciones en su cuaderno de ciencias: MATERIALES: (Todos aportados por el docente) 4
Microscopio óptico Compuesto, Estereoscopio, lupas, laminillas portaobjetos y cubreobjetos, pinzas de laboratorio, bisturí, Lugol, azul de metileno, agua estancada, laminillas preparadas de tejido sanguíneo, trozos de cebolla, trozos de tomate, hojas de elodea, flores o semillas de plantas. 1. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS VEGETALES: A. Remueve la piel interna de un pedazo de cebolla cabezona, coloca un trocito de ella sobre una lámina portaobjetos, agrega una gota de solución de Yodo (Lugol), cubre la preparación con una laminilla cubreobjetos, observa al Microscopio con menor y mayor aumento. Dibuja lo observado en tu cuaderno, comenta con tus compañeros y responde Cómo son las células observadas, cuál es su forma, cómo están unidas? B. Toma una hoja de Elodea, colócala en la lámina portaobjeto, agregue agua y una gota de Azul de Metileno, cúbrala con una laminilla cubreobjeto y obsérvela al microscopio. -Describa la organización general de éstas células y dibuje su observación en menor y mayor aumento. Ubique los cloroplastos y el núcleo. Observe los Cloroplastos, su movimiento qué sentido tienen. Consulta cómo se denomina este movimiento. C. A través del estereoscopio observe un trozo de cebolla. Dibuje lo observado D. A través del estereoscopio observe una hoja de elodea. Dibuje lo observado E. Observe un órgano completo de una planta a través del estereoscopio. Dibuje lo observado 2. OBSERVACIÓN DE CÉLULAS ANIMALES: A. Tome una gota de agua estancada o de cultivo de microorganismos, deposítela en una laminilla portaobjetos, cúbrala con una laminilla cubreobjetos y observe al microscopio con menor y mayor aumento, compare con sus compañeros, trate de identificar el mayor número de microorganismos..- Qué estructuras se hacen más visibles?, describa como se desplazan los microorganismos que observe. Describa la forma corporal. Identifique organelos y estructuras de locomoción si las hay. Describa el patrón de movimiento y el comportamiento general. -Dibuje, compare con los dibujos de los libros, repita la experiencia pero agregando azul de metileno B. Observación de células Sanguíneas: Observe al microscopio el extendido sanguíneo proporcionado por el docente. Dibuje esquemáticamente las células observadas. Debe poder diferenciar dos tipos de células: glóbulos rojos, y glóbulos blancos. Indique las estructuras y el aumento con que se realizó la observación. TALLER 1. Escribe dentro del paréntesis la o las respuestas correctas: a. OCULAR ( ) Parte del sistema mecánico sobre la cual se b. BASE O PIE coloca la preparación. c. OBJETIVOS ( ) Se utiliza para acercar o alejar el objetivo a la muestra. d. BRAZO e. TORNILLO MICROMÉTRICO ( ) Lente o lentes que se encuentran colocadas en la f. TORNILLO MACROMÉTRICO parte superior del tubo. g. PLATINA ( ) Lámina de vidrio sobre la cual se coloca la muestra h. DIAFRAGMA que se va a observar. i. PINZAS ( ) Pieza giratoria en la cual se encuentran los objetivos j. CONDENSADOR k. PORTAOBJETOS ( ) Pequeña lámina de vidrio que se coloca sobre la muestra l. TUBO que se va a observar. m. REVÓLVER. ( ) Se utiliza para afinar el enfoque. n. CUBREOBJETOS. ( ) Sirve para ajustar la intensidad de luz. ( ) De estas partes se toma el microscopio cuando se va a trasladar. ( ) Lentes que se encuentran próximas a la preparación. 2. Colóquele los nombres a las partes del microscopio: 5
3. Qué es el campo óptico? 4. De acuerdo con sus observaciones, realice un cuadro comparativo en el que se observen las diferencias entre el microscopio compuesto y el estereoscopio 5. Qué conclusiones se pueden sacar de las experiencias observadas? 6