Universidad de San Carlos de Guatemala Centro Universitario de Occidente Faculta de Ciencias de La Salud Laboratorio de Bioquímica Licda. Edna Pérez Rodas Laboratorio B Tiempo de Coagulación y Sangría. El tiempo de sangría: es una prueba que sirve para evaluar la integridad de los vasos capilares,, plaquetas y la formación del coágulo. Posee baja sensibilidad y espeficidad debido a que se ve afectado por múltiples factores desde una mala técnica de realización del examen, uso de antiplaquetarios o enfermedad concomitante de la hemostasia primaria. Debido a estos factores, el tiempo de sangría no es predictor de hemorragias durante una cirugía, por lo cual ha ido disminuyendo su utilidad entre los exámenes preoperatorios. Tiempo de coagulación: es el proceso por el cual la sangre pierde su liquidez, tornándose similar a un gel en primera instancia y luego sólida, sin experimentar un verdadero cambio de estado. Cuando una lesión afecta la integridad de las paredes de los vasos sanguíneos, se ponen en marcha una serie de mecanismos que tienden a limitar la pérdida de sangre. A la transformación de fibrinógeno en fibrina se le llama coagulación, porque se pasa de un estado líquido (fibrinógeno) a solido (fibrina).esta transformación ocurre en 3 fases, en la primera se desarrolla actividad de tromboplastina por acciones de factores de coagulación en la sangre y por adición de jugos y plasma tisulares. Los sistemas sanguíneos (intrínsecos) y tisulares (extrínsecos) son los responsables del desarrollo de la actividad de tromboplastina, ambos funcionan en defensa fisiológica de la hemostasia. 1) Tiempo de Sangría: Al realizar una punción de tamaño y profundidad estandarizados, la acción conjunta de los vasos y plaquetas detendrá el sangrado en un corto tiempo, el cual es medido y comparado con el normal. Material y equipo: (por mesa) 2 Lancetas estériles 2 Torundas de algodón con alcohol (70%)
Papel filtro o mayordomo Un Cronometro Porta Objetos (*) 1. selecciona uno de los lóbulos de la oreja del paciente (que esté libre de lesiones), dar un masaje suave (esto favorece a la circulación) hasta que la zona este tibia. 2. limpiar el lóbulo de la oreja con una torunda de algodón con alcohol dejar secar la región limpiada. 3. colocar el porta objetos atrás del lóbulo y se hace una punción con la lanceta en el sitio elegido, al mismo tiempo echar a andar el cronometro. La punción debe hacerse en un solo movimiento, y sin hacer movimientos laterales para no rasgar la piel. 4. sin tocar la piel ni comprimir se seca la gota de sangre que salga por el sitio de la punción con papel filtro cada 15 segundos. 5. cuando el papel filtro ya no absorba sangre parar el cronometro. 6. anotar el tiempo. 2) Tiempo de Coagulación: El tiempo necesario para que la primera sangre se coagule en tubo de crista es la medida de la actividad total des sistema intrínseco de la coagulación. La inspección periódica del coagulo permite la valoración de las propiedades físicas del coagulo (tamaño, aspecto y fuerza mecánica). Material y equipo: ( por mesa) 1 Jeringa de 3 cc Cronometro 3 tubos de ensayo (*) Torundas con alcohol (70%). Marcador 1. colocar 3 tubos de 13 x100 mm. Numerarlos del 1 al 3. 2. obtener 5cc de sangre venosa por una punción limpia y extraída con una jeringa de plástico. Con el máximo cuidado de evitar que la sangre se espume 3. colocar 1ml de sangre en cada tubo numerado del 1 al 3. Y el resto en el tubo con citrato, agitarlo en forma de 8. 4. poner en marcha el cronometro cuando la sangre entra en el tubo número 1. 5. cada 30 segundos se inclinan suavemente los tubos hasta que se vea un coagulo en cada uno de ellos; se anota el tiempo y se saca el promedio.
3) TP ( Tiempo de Protrombina) El TP mide el tiempo de coagulación del plasma después de adicionar una fuente da factor tisular (tromboplastina) y calcio. La recalcificación del plasma en presencia del factor tisular genera activación del factor Xa por medio del VII con la consecuente formación de trombina y por último un coágulo de fibrina. El TP se ha aceptado ampliamente para controlar pacientes con terapia anticoagulante oral debido a la reducción de la actividad de los factores de coagulación dependientes de vitamina K ( II, VII, X). Además de determinar los factores de coagulación de la vía Extrínseca y Común. Material y equipo: (por mesa) Tubo de 3.0 ml con citrato (tapón celeste) Reactivo para TP (*) 2 Palillos de madera Pipeta de 50-200ul (*) Puntas amarillas (*) Cronómetro Centrífuga (*) Baño María (*) 2 tubos de ensayo Marcador 1. Poner a centrifugar el tubo con citrato por 10 minutos. 2. Pre incubar de 2 a 5 minutos el reactivo Seruloplastín y agregar 225 ul a un tubo de vidrio. Tubo #1 3. Agregar a un tubo distinto 100 ul de plasma e incubar por 3 minutos. Tubo #2 4. Inmediatamente activar el cronómetro y al minuto exacto agregar 200 ul del tubo #1 al tubo #2.y volver activar el cronómetro 5. A los 8 segundos se coloca el palillo agitándolo, para observar la formación de coágulo. 6. Anotar el resultado.
4) TPT (Tiempo parcial de Tromboplastina) El tiempo parcial de tromboplastina activada se realiza añadiendo el reactivo que contiene un activador de plasma y fosfolípidos a la muestra. Los fosfolípidos sirven como un sustituto de las plaquetas. La muestra se incuba para la activación, después se recalcifica con cloruro de calcio y se contabiliza el tiempo de formación de coágulo. Es una prueba simple y versátil, sensible a las deficiencias de los factores de coagulación en el plasma, excepto el factor VII. Sin embargo se utiliza principalmente para detectar las deficiencias en los factores XII, XI, X, IX, Material y Equipo: ( por mesa) Tubo de 3.0cc con citrato (tapón celeste), se usará el mismo que para TP Reactivo para TPT (*) Reactivo de Calcio (*) 2 Palillos de madera Pipeta de 50-200ul (*) Puntas amarillas (*) Cronómetro Centrífuga (*) Baño María (*) 2 Tubos de ensayo 1. Se precalientan dos tubos. #1 y #2 2. Se agrega al tubo #1 125 ul de CaCl2 3. Al tubo #2 se le agregan 100 ul de plasma y 100 ul de APTT 4. Incubar por 3 minutos ambos tubos 5. Pasados los tres minutos agregar 100 ul de CaCl2 al tubo #2 6. Activar el cronómetro y a los 18 sendos introducir el palillo y empezar a ver la formación de coágulo. 7. Anotar el tiempo Cuestionario En el reporte de laboratorio incluir: 1) Valores de referencia de las pruebas realizadas.
2) Cómo se llaman las pruebas realizadas en la práctica y que otras pruebas existen y la diferencia entre ellas. 3) Cuál sería el significado clínico en los resultados anómalos de las pruebas. 4) Cómo se ven afectados los resultados (errores humanos, defectos adquiridos y genéticos y congénitos). 5) Que drogas podrían alterar el resultado de las pruebas?. ID Y ENSEÑAD A TODOS