Módulo de IHQ GENERAL. 34ª Ronda. control local es tumoral, correspondiendo la mayoría de los casos a Tumores
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- Pedro Sánchez Soriano
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1 SEAP Calle Ancora, 3, 2º B MADRID Tfno. y Fax MAIL: SEAP@SEAP.ES Programa de Garantía de Calidad en Patología Módulo de IHQ GENERAL 34ª Ronda Antígeno probado: CD117(C-Kit) Tejido probado: SEAP-GCP: Hígado-apéndice LOCAL: EL tejido más frecuentemente empleado como control local es tumoral, correspondiendo la mayoría de los casos a Tumores del Estroma Gastrointestinal (GIST) seguido por tejido no tumoral, predominando el apéndice ileocecal. Instrucciones: Los participantes fueron invitados a teñir con CD117 la preparación remitida por el programa (sección de tejido no tumoral con fijación controlada correspondiente a un corte de apéndice normal y otra sección de hígado con 24 horas de fijación en formol al %), y su propia preparación control. Ambas preparaciones fueron devueltas para su evaluación, así como las condiciones y protocolos de tinción utilizados. Los criterios de tinción óptima para CD117 fueron: 1
2 Apéndice: Tinción intensa en las células intersticiales de Cajal sin tinción en las células musculares lisas, y ausencia o mínima tinción en los enterocitos. Los mastocitos también muestran inmunotinción predominantemente de membrana. Hígado: Ausencia de tinción en los hepatocitos y conductos biliares. Número de laboratorios participantes: - Remitidos: 82 GCP - Contestados: 68(82,9%)(GCP) y 67(81,7 % )(Control Local) Estudio de los controles remitidos por el GPC: Los resultados de la evaluación fueron los siguientes: CD117 GCP 30 Nº centros POBRE (4-9) REGULAR (-11) BUENO (12-15) ÓPTIMO (16-20) Puntuación asesores Considerando como aceptable una puntuación superior a 12, sólo el 38,2 % de las preparaciones remitidas fueron consideradas como aceptables, es decir, alcanza el nivel mínimo para considerar que la técnica pueda aplicarse de manera rutinaria y un 61,7% no aceptable, es decir, no alcanza el nivel mínimo para considerar que la técnica pueda aplicarse de manera rutinaria. 2
3 Sólo un 13,2% de los centro obtuvieron una puntuación correspondiente a una valoración óptima o muy buena (igual o superior a 16) Se ha observado un marcado descenso en las puntuaciones obtenidas respecto a este anticuerpo en la anterior ronda (ronda 28), en la que se obtuvo un 63% de puntuaciones aceptables con resultados superiores a 12 (frente al 38,2% de la ronda actual), aunque sólo un 2,8% de valoraciones óptimas (frente al 13,2% de la ronda actual). Más de la mitad de los centros participantes no han obtenido un nivel superior al mínimo considerado para aceptar la técnica en su aplicación rutinaria para el diagnóstico, aunque se han obtenido resultados de valoraciones óptimas superiores a los apreciados en la ronda previa para este anticuerpo. Los principales problemas detectados por los que no se obtuvo una puntuación óptima fueron con mayor frecuencia (64% de los casos), una marcada disminución de la intensidad de tinción esperada con tinción ligera muy ligera, e incluso inexistente en las células diana, seguida por un pretratamiento excesivo con degradación de los tejido (20,5%), y tinción inespecífica(11,7%) de algunas células que no deberían mostrar nmunotinción para CD117 y presencia de fondo(5,8%). Estos problemas encontrados en la ronda actual coinciden con los observados en la ronda anterior(ronda 28) para este anticuerpo. 3
4 Estudio de los controles de cada centro: Los resultados en la evaluación fueron los siguientes: CD117 LOCAL 45 Nº centros POBRE (4-9) REGULAR (-11) BUENO (12-15) ÓPTIMO (16-20) Puntuación asesores Considerando como aceptable una puntuación superior a 12, el 79,1 % de las preparaciones remitidas fueron consideradas como aceptables, correspondiendo sólo el 17,9% a puntuación igual o superior a 16/20 consideradas óptimas o muy buenas. A diferencia de los datos observados en el control GCP, sólo el 20,8 % obtuvieron una puntuación considerada no aceptable. Respecto a la puntuación de CD117 en el control local de la ronda anterior(ronda 28) se ha observado un porcentaje similar para las preparaciones con puntuación aceptable (81,4% en la ronda anterior, con sólo un 20% de puntuaciones óptimas). Los tejidos empleados como control local han sido muy heterogéneos, siendo los más frecuentemente empleados los tumores del estroma gastrointestinal (41%), seguido por apéndice ileocecal (26,8%). En un 11,9% 4
5 de los casos incluían otros tumores (mastocitosis, neoplasia intratubular de células germinales o seminomas). En un 7,4% de los casos se utilizaron tejidos no tumorales diferentes(amígdala, mucosa colónica, hígado y piel). Un 4,4 % de los centros emplearon muestras endoscópicas de tejido tumoral. Un porcentaje importante de centros han incluido como control local exclusivamente tejido tumoral, fundamentalmente tumores del estroma gastrointestinal sin presencia de tejido no tumoral, en los que la interpretación de los resultados es dificultosa. Los principales problemas detectados fueron con mayor frecuencia pretratamiento excesivo con degradación del tejido (40,2%), seguido de tinción de fondo (22,3%), tinción inadecuada de algunas células(17,9%) y contaste escaso (4,4%). En 3 casos(4,4%) se utilizó un control inadecuado por corresponder a una muestra tumoral obtenida mediante BAG o endoscopia. Resultados de la autoevaluación: La autoevaluación es una parte importante del Programa de Garantía de Calidad. El 67 % de los técnicos y el 77,9 % de los patólogos participantes remitieron su valoración de las preparaciones del GCP. Se ha observado un claro descenso en la participación de técnicos y patólogos en la valoración de los controles GCP respecto a la ronda anterior( 87,3% de los técnicos y 95,7% de los patólogos emitieron su valoración en ronda previa).en el caso de los controles locales este porcentaje fue del 86,5 % y el 97 % respectivamente. Los resultados obtenidos fueron los siguientes: Control GCP 5
6 CD117 GCP 20 Nº centros POBRE (4-9) REGULAR (-11) BUENO (12-15) ÓPTIMO (16-20) Puntuación técnico CD117 GCP 25 Nº centros POBRE (4-9) REGULAR (-11) BUENO (12-15) ÓPTIMO (16-20) Puntuación patólogo 6
7 En la autoevaluación remitida de los controles GCP los resultados siguen la tónica de otros anticuerpos y rondas con una tendencia a la sobrevaloración tanto de los técnicos, con un 69,5 % de los casos con valoración aceptable (igual o superior a 12), como de los patólogos con un 71,1 %, situándose muy por encima de la evaluación realizada por los observadores externos del GCP (38,2%). Control Local CD117 LOCAL 50 Nº centros POBRE (4-9) REGULAR (-11) BUENO (12-15) ÓPTIMO (16-20) Puntuación técnico 7
8 CD117 LOCAL 50 Nº centros POBRE (4-9) REGULAR (-11) BUENO (12-15) ÓPTIMO (16-20) Puntuación patólogo La percepción local de los resultados de la técnica es sólo ligeramente inferior a la valoración de los observadores externos. El 77,5% de los técnicos y el 77,2% de los patólogos participantes puntúan los controles locales como aceptables (igual o mayor de 12), mientras que el 79,1 % de los casos fueron puntuados como aceptables por los asesores de la evaluación externa. La mayor discrepancia se observa en las puntuaciones óptimas; un 74,1 % de los técnicos y un 72,7% de los patólogos valoran como óptimas los controles locales, mientras que los asesores sólo consideran óptimas un 17,9% de las preparaciones. IMMUNOTINCIÓN ÓPTIMA: Los criterios consensuados usados en la evaluación para considerar la tinción de CD117 como óptima fueron los siguientes: Apéndice: Tinción intensa y definida en las células intersticiales de Cajal sin tinción en las células musculares lisas, y ausencia o mínima 8
9 tinción en los enterocitos. Los mastocitos también presentan inmunotinción con predominio de patrón de membrana. Hígado: Ausencia de tinción en los hepatocitos y conductos biliares. Se valoró como inespecífica la tinción en el hígado de hepatocitos y células canaliculares biliares, y en el apéndice ileocecal la tinción de fondo en células musculares y enterocitos, generalmente asociadas a un pretratamiento excesivo. La mayoría de casos con tinciones débiles o negativas mostraron una reacción débil o negatividad en las células intersticiales de Cajal. Este hecho fue valorado como el umbral de sensibilidad deseable para la valoración de la inmunotincion con CD117. En los casos de control local correspondientes a tumor(gist), la mayoría de las células tumorales han de mostrar fuerte tinción con CD117. La tinción óptima en ambos tejidos se debe acompañar de una adecuada relación en la intensidad de la tinción respecto al contraste empleado y con mínimo o ausente artefacto tanto de técnica inmunohistoquímica (degradación del tejido por sobrecalentamiento tinción de fondo, etc) como de técnica histológica (contraste adecuado,. etc). Anticuerpos empleados: En la ronda actual el 0% de los centros especificaron el anticuerpo empleado, siendo la información remitida por los centros como se indica en la siguiente tabla: 9
10 Anticuerpo Casa comercial Laboratorios Polyclonal DAKO 33 Clon 9.7 ROCHE 22 Clon YR145 MASTER DIAGNOSTICA Clon T595 NOVOCASTRA 2 Clon SP26 SPRING BIOSCIENCE 1 Mejores métodos (puntuación 19/20) (De los casos en los que el método ha sido descrito): Método: ENVISION Bloqueo: Agua oxigenada Automatización: DAKO AUTOSTAINER Digestión enzimática: No Recuperación antigénica con calor: Si :PT LINK. Buffer Tris EDTA Ph alto 20 Anticuerpo primario: Dako policlonal. Dilución 1/ minutos. Temperatura ambiente Cromógeno: DAB DAKO Comentarios: - Se ha observado discrepancia en los resultados según se analicen los controles GCP y locales. Para el control GCP se ha observado un descenso en
11 los resultados obtenidos para CD117 en esta ronda respecto a la ronda anterior(ronda 28) (38,2% aceptables en la ronda actual frente al 63% de la ronda anterior). Es llamativa también la disminución de resultados óptimos para el control GCP respecto a la ronda previa (13,2% puntuaciones óptimas en la ronda actual frente al 2,8% en la ronda anterior). Para el control local se mantienen unos resultados similares tanto para el porcentaje de puntuaciones aceptables como de valoraciones optimas. -Las diferencias observadas respecto a las valoraciones emitidas por los asesores en el control GCP y local radica en la naturaleza de los controles empleados. La mayoría de los centros remitieron para su valoración como control local un GIST. Este tejido se considera un buen control aunque para la valorar la sensibilidad de la técnica sería recomendable asociar un apéndice o incluir junto con el tumor sección no tumoral del órgano. En el apéndice ileocecal se obtiene buena sensibilidad de la técnica por la posibilidad de valorar las células intesticiales de Cajal que han de mostrar una inmunotinción fuerte y definida así como mastocitos en el corion ; además es un buen control de posibles reacciones inespecíficas por su riqueza en otros elementos, como es el músculo liso de la pared, enterocitos, así como vasos, troncos nerviosos y estroma fibroso de la submucosa. -Las principales causas responsables de la discrepancia entre la valoración de ambos tipos de controles(gcp y local) es la observación de una tinción ligera, muy ligera e incluso inexistente en las células intersticiales de Cajal apendiculares que puede ser causa de falsos negativos, y la presencia de tinción inadecuada de algunas células(sobre todo músculo liso y enterocitos apendiculares) la mayoría de las veces debido a pretratamiento excesivo con degradación del tejido que puede originar falsos positivos. En los controles 11
12 locales que incluían exclusivamente tumor, estos datos no han podido ser evaluados. -Por último, destacar que todavía algunos centros emplean como control local pequeñas muestras de tumor obtenidas mediante endoscopia o BAG, necesarias para determinaciones futuras de posible gran valor terapéutico para el paciente. 12
Módulo de PATOLOGÍA QUIRÚRGICA GENERAL. Ronda nº 4
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