i-fob Turbidimetric CLONATEST i-fob Turbidimetric Latex Turbidimetry SUMMARY REFERENCE VALUES REAGENTS QUALITY CONTROL PREPARATION
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- Nicolás Fernández Mora
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1 i-fob Turbidimetric Latex Turbidimetry CONTENTS CONTENTS CONTENTS R1. Reagent 1 x 32 ml R1. Reagent 5 x 32 ml R1. Reagent 11 x 32 ml R2. Reagent 1 x 8 ml R2. Reagent 5 x 8 ml R2. Reagent 11 x 8 ml For in vitro diagnostic use only SUMMARY The latex particles coated with anti-human hemoglobin are agglutinated when they react with feces samples containing human hemoglobin. The latex particles agglutination is proportional to the concentration of the hemoglobin in the sample and can be measured by turbidimetry. 1 REAGENTS R1. Diluent. Glycine buffer, 100 mmol/l, ph 10. R2. Latex. Latex particles coated with polyclonal anti-human hemoglobin antibodies, ph 8.2. Precautions: The reagents contain sodium azide 0.95 g/l. Avoid any contact with skin or mucous. PREPARATION R1. Ready to use. R2. Ready to use. Mix gently the vial by inversion before use (Note 4). Calibration curve: Use i-fob Calibrator Set (ref. CT39000). The set contains 4 different levels of human hemoglobin concentration. Use ClNa 9 g/l or distilled water as calibrator 0. For additional information, read i- FOB Calibrator Set Insert. STORAGE AND STABILITY 1. The reagents will remain stable until the expiration date printed on the label. For optimal stability store tightly closed at 2-8ºC. Do not use the reagents after the expiration date. 2. Reagent deterioration: Presence of particles and turbidity. SAMPLE COLLECTION For collecting feces sample (Note 1), use only the i-fob SCT Stool Collection Tube ref , following the instructions included in the kit. Keep the specimen at 2-8ºC. Sample in the tube is stable 10 days in dark as long as it has been immediately stored at 2-8ºC (refrigerator). At room temperature (20-25ºC) 7 days and at 25-30ºC 3 days. Temperatures (30ºC and over) and time can affect the test result. Do not freeze. INTERFERENCES Bovine hemoglobin (2.5 mg/l), goat hemoglobin (2.5 mg/l), rabbit hemoglobin (2.5 mg/l, pork hemoglobin (2.5 mg/l), do not interfere. Ascorbic ac. (100 mg/l), BSA (18 g/l), do not interfere. Lipemia (2 g/l), interferes. Other substances or drugs may interfere. 7 ADDITIONAL EQUIPMENT KROMA Analyzer. Laboratory equipment. Cleaning solutions Ref. KR18100, KR18200, KR18300, KR AUTHOMATIC TECHNIQUE For automatic assays the application method is included. Any application to an instrument should be validated to demonstrate that results meet the performance characteristics of the method. It is recommended to validate periodically the instrument. CALIBRATION Recalibrate weekly, when a new lot of reagent is used, when control recovery falls out of the expected range or when adjustments are made to the instrument. A reagent blank should be run daily before sample analysis. REFERENCE VALUES It is recommended that each laboratory establish its cut off value, according to the population and purposes. Bibliography 2 shows different results of sensitivity and specificity according the cut-off level. As a general role: Cut off (µg/l) Sensitivity (%) Specificity (%) Physiological intestinal bleeding is estimated to be mg hemoglobin/g stool. 3 QUALITY CONTROL i-fob Controls set Ref are recommended to monitor the performance of automated assay procedures. It is recommended to use Each laboratory should establish its own Quality Control scheme and corrective actions if controls do not meet the acceptable tolerances. DIAGNOSTIC CHARACTERISTICS 3-7 i-fob Turbidimetric is an immunoturbidimetric kit for the quantification of human hemoglobin in human feces. Hemoglobin is the major protein in blood red cells. The presence of hemoglobin in feces is indicative of the presence of blood as a result of bleedings associated to some pathologies of the gastrointestinal track (Fecal Occult Blood, FOB). Such pathologies are colon polyps, adenomas, colorectal carcinoma, ulcerative colitis and Crohn s disease. Colonoscopy is recommended as definitive test. This method is worthless as screening test for diseases of uppergastrointestinal tract. 5 PERFORMANCE CHARACTERISTICS Performance characteristics are available on request. NOTES 1. Feces sample should no be collected during a menstrual period, or if patient suffers from bleeding hemorrhoids. Alcohol, aspirin and other drugs taken in excess may cause gastrointestinal irritation producing occult bleeding. Avoid these substances 48 hours before testing. Dietary restrictions are not necessary. 2. The linearity limit depends on the sample/reagent ratio. It will be higher by decreasing the sample volume, although the sensitivity of the test will be proportionally decreased. 3. Clinical diagnosis should not be made on findings of a single test result, but should integrate both clinical and laboratory data. 4. For automatic instruments, avoid the presence of bubbles in the reagents that may interfere with the assay results. BIBLIOGRAPHY 2. Vilkin A, et al. American Journal of Gastroenterology; 100(11): (2005). 6. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd Ed. Burtis CA, Ashwood ER. WB Saunders Co., (1999). 7. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests. 3th ed. AACC Press (1997). KR /1402
2 Aplicaciones en KROMA Applications on KROMA i-fob TURBIDIMETRIC Two reagents method i-fob Turbidimetric (1 x 40 ml), Ref. KR31000 i-fob Turbidimetric (5 x 40 ml), Ref. KR31002 i-fob Turbidimetric (11 x 40 ml), Ref. KR31005 USO USE METODO METHOD MUESTRA SAMPLE REACTIVOS REAGENTS CALIBRADOR STANDARD CALIBRACION CALIBRATION CONTROL CALIDAD QUALITY CONTROL DETERMINACIONES NUMBER OF TESTS LINEALIDAD LINEARITY EFECTO PROZONA PROZONE EFFECT NOTA NOTE NOTA DE AVISO WARNING Reactivo de diagnóstico in vitro para la determinación de hemoglobina en heces humanas. In vitro diagnostic reagent for the determination of haemoglobin in human faeces. Turbidimetría. Turbidimetry. Heces humanas recogidas en tubo extracción Code Human faeces collected in extraction tube Code Reactivo 1: Usar el Diluyente: Reactivo 2: Usar el Látex. Reagent 1: Use the Diluent. Reagent 2: Use the Latex. Linear i-fob-cal Ref Linear i-fob-cal Ref i-fob Calibrator set CT39000 Curva de calibración Calibration curve Linear i-fob Control N-I + N-II Ref tests/kit, Ref. KR tests/kit, Ref. KR tests/kit, Ref. KR31005 (no se considera el volumen muerto). (dead volume is not taken in consideration). Sin post-dilución automática: ng/ml Without automatic post-dilution: ng/ml Hasta ng/ml Up to ng/ml Para más información lea el prospecto del reactivo. For additional information read reagent packaging insert. La aplicación incluida se da solamente como pauta. Cualquier aplicación deberá ser validad con el fin de demostrar que se cumplen las características analíticas del método. The reported application is given only as a guideline. Any application to an instrument should be validated to demonstrate that results meet the performance characteristics of the method.
3 KROMA i-fob TURBIDIMETRIC Fecal Name N. of Standards N. of rep. Units Stability i-fob Turbidimetric 5 1 ng/ml entered by the user KR /0907
4 i-fob Turbidimétrico Látex Turbidimétrico CONTENIDO CONTENIDO CONTENIDO R1. Reactivo 1 x 32 ml R1. Reactivo 5 x 32 ml R1. Reactivo 11 x 32 ml R2. Reactivo 1 x 8 ml R2. Reactivo 5 x 8 ml R2. Reactivo 11 x 8 ml Sólo para uso diagnóstico in vitro FUNDAMENTO Las partículas de látex sensibilizadas con anticuerpos anti-hemoglobina humana, son aglutinadas cuando reaccionan con la hemoglobina presente en las muestras de heces humanas. La aglutinación de las partículas de látex es proporcional a la concentración de hemoglobina en la muestra y puede ser medida por turbidimetría. 1 REACTIVOS R1. Diluyente. Tampón glicina, 100 mmol/l; ph 10. R2. Látex. Suspensión de partículas de látex sensibilizadas con anticuerpo policlonal anti-hemoglobina humana, ph 8,2. Precauciones: Los reactivos del kit contienen azida sódica 0,95 g/l. Evitar el contacto con piel y mucosas. PREPARATION R1. Listo para su uso. R2. Listo para su uso. Mezclar suavemente por inversión del vial antes de usar (Nota 4). Curva de Calibración: Usar i-fob Calibrator Set (ref. CT39000) contiene 4 niveles distintos de concentración de hemoglobina humana. Utilizar ClNa 9 g/l o agua destilada como calibrador 0. Para mas información, consultar la metódica del i-fob Calibrator Set. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD 1. Todos estos reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial. Para una estabilidad optima mantener los reactivos bien cerrados y conservados a 2-8ºC. No usar los reactivos una vez caducados. 2. Indicadores de deterioro: Presencia de partículas y turbidez. MUESTRAS Para la recolección de muestras (Nota 1), utilizar sólo el tubo i-fob SCT ref , siguiendo las instrucciones incluidas en el kit. Mantener la muestra a 2-8ºC. La muestra en el tubo es estable 10 días protegida de la luz, siempre que se almacene inmediatamente a 2-8ºC (refrigerador). A temperatura ambiente (20-25ºC) 7 días y 3 días a 25-30ºC. La temperatura (30ºC o superior) y el tiempo pueden afectar el resultado. No congelar. INTERFERENCIAS La hemoglobina bovina (2,5 mg/l), hemoglobina de cabra (2,5 g/l), hemoglobina de conejo (2,5 g/l, y la hemoglobona de cerdo (2,5 g/l), no interfieren. El ac. ascórbico (100 mg/l), la albúmina bovina (18 g/l), no interfieren. La lipemia (2 g/l), interfiere. Otras sustancias pueden interferir 7. EQUIPO ADICIONAL Analizador KROMA. Material de laboratorio. Soluciones de lavado Ref. KR18100, KR18200, KR18300, KR TECNICA AUTOMATICA Seguir las instrucciones incluidas en la adaptación del analizador. Cualquier adaptación a un instrumento deberá ser validada con el fin de demostrar que se cumplen las características analíticas del método. Se recomienda validar periódicamente el instrumento. CALIBRACION Recalibrar semanalmente, al cambiar el lote de reactivos, cuando los valores del control estén fuera del rango de aceptación o cuando se realicen ajustes en el instrumento. Se recomienda hacer un blanco del reactivo cada día de trabajo antes de analizar las muestras. VALORES DE REFERENCIA Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia, de acuerdo al tipo de población y objetivos propuestos. La bibliográfia 2 muestra resultados de sensibilidad y especificidad de la población según el nivel discriminante escogido. Como norma general: Nivel discriminante (µg/l) Sensibilidad (%) Especificidad (%) 50 79,4 89, ,5 95, ,6 95,9 El valor fisiologico del sangrado intestinal se estima en 0,1-0,3 mg de hemoglobina/g de heces 3. CONTROL DE CALIDAD Se recomienda utilizar controles i-fob Controls set Ref para controlar los ensayos tanto en procedimiento manual como en automático. Cada laboratorio debería establecer su propio Control de Calidad y establecer correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias exigidas. SIGNIFICADO CLINICO 3-7 i-fob Turbidimetric es un kit inmunotrubidimetrico para la cuantificación de hemoglobina en heces humanas. La hemoglobina es la proteína principal de los hematíes de la sangre. La presencia de hemoglobina en las heces o sangre oculta en heces (FOB) es indicativa de algunas patologías asociadas al tracto gastrointestinal, como pólipos de colon, adenomas, carcinoma colorectal, colitis ulcerativa y enfermedad de Crohn s. Se recomienda la prueba de la colonoscopia como ensayo definitivo para el diagnóstico. El método turbidimétrico no es adecuado como método de cribado para las enfermedades del tracto gastrointestinal superior. CARACTERISTICAS ANALITICAS Las características analíticas están disponibles bajo solicitud. NOTAS 1. La muestra de heces no debería recolectarse durante el perdió menstrual, o en procesos hemorroidales. El alcohol, la aspirina y otros fármacos tomados en exceso pueden causar irritación gastrointestinal. Evitar el consumo de estas sustancias, 48 horas antes de la toma de muestra. 2. La linealidad del ensayo depende de la relación muestra/reactivo. Disminuyendo el volumen de muestra, se aumenta el límite superior de linealidad, aunque se reduce la sensibilidad. 3. El diagnóstico clínico no debe realizarse únicamente con los resultados de un único ensayo, sino que debe considerarse al mismo tiempo los datos clínicos del paciente. 4. En instrumentos automáticos, evitar la presencia de burbujas en los reactivos que pueden interferir en el resultado de los análisis. REFERENCIAS 2. Vilkin A, et al. American Journal of Gastroenterology; 100 (11): (2005). 6. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd Ed. Burtis CA, Ashwood ER. WB Saunders Co., (1999). 7. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests. 3th ed. AACC Press (1997).
5 i-fob Turbidimétrico Látex Turbidimétrico CONTEÚDO CONTEÚDO CONTEÚDO R1. Reagente 1 x 32 ml R1. Reagente 5 x 32 ml R1. Reagente 11 x 32 ml R2. Reagente 2 x 8 ml R2. Reagente 5 x 8 ml R2. Reagente 11 x 8 ml Exclusivamente para utilização no diagnóstico in vitro PRINCÍPIO As partículas de látex, sensibilizadas com anticorpos anti-hemoglobina humana, são aglutinadas quando reagem com a hemoglobina presente nas amostras de fezes humanas. A aglutinação das partículas de látex é proporcional à concentração de hemoglobina na amostra e pode ser medida por turbidimetría. 1 REAGENTES R1. Diluente. Tampão de glicina, mmol/l; ph 10. R2. Látex. Suspensão de partículas de látex sensibilizadas com anticorpo policlonal anti-hemoglobina humana, ph 8,2. Precauções: Os reagentes do kit contêm azida de sódio a 0,95 g/l. Evitar o contacto com a pele e as mucosas. PREPARAÇÃO R1. Pronto a usar. R2. Pronto a usar. Misturar suavemente por inversão do frasco antes de usar (Nota 4). Curva de calibração: Usar i-fob Calibrator Set (ref. CT39000). O conjunto contém 4 diferentes níveis de hemoglobina humana. Usar ClNa a 9 g/l ou água destilada como calibrador 0. Para obter mais informações, verifique o i-fob Calibrator Set metódica. ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE 1. Todos estes reagentes são estáveis até ao prazo de validade indicado no rótulo do frasco. Para uma estabilidade óptima, manter os reagentes bem fechados e conservados a 2-8 ºC. Não usar os reagentes depois de caducados. 2. Indicadores de deterioração: Presença de partículas e turvação. AMOSTRAS Para a colheita de amostras (Nota 1), utilizar o i-fob Collection tube ref (1x100 tubos), seguindo as instruções do método incluídas no kit. Manter a amostra de 2-8 C. A amostra é estável no tubo 10 dias ao abrigo da luz, desde que ele é imediatamente armazenado a 2-8 C (frigorífico). À temperatura ambiente (20-25 C), 7 dias e 3 dias a C. A temperatura (30 C ou superior) e o tempo pode afectar o resultado. Não congelar. INTERFERÊNCIAS A hemoglobina bovina (2,5 mg/l), a hemoglobina de cabra (2,5 g/l), a hemoglobina de coelho (2,5 g/l) e a hemoglobina de porco (2,5 g/l) não interferem. O ácido ascórbico (100 mg/l) e a albumina bovina (18 g/l) não interferem. A lipemia (2 g/l) interfere. Há outras substâncias que podem interferir 7. EQUIPAMENTO ADICIONAL Analisador KROMA. Equipamentos de laboratório. Soluções de lavar Ref. KR18100, KR18200, KR18300, KR TÉCNICA AUTOMÁTICA Seguir as instruções incluídas na adaptação do analisador. Qualquer adaptação a um instrumento deverá ser validada a fim de demonstrar que se cumprem as características analíticas do método. Recomenda-se a validação periódica do instrumento. CALIBRAÇÃO Recalibrar semanalmente, ao mudar o lote de reagentes, quando os valores do controlo estiverem fora do intervalo admissível ou quando se efectuarem ajustes no instrumento. Recomenda-se a realização de um ensaio em branco do reagente diariamente antes de analisar as amostras. VALORES DE REFERÊNCIA Recomenda-se que cada laboratório estabeleça os seus próprios valores de referência, de acordo com o tipo de população e os objectivos propostos. A bibliografia 2 mostra resultados de sensibilidade e especificidade da população segundo o nível discriminante escolhido. Como norma geral: Nível discriminante (µg/l) Sensibilidade (%) Especificidade (%) 50 79,4 89, ,5 95, ,6 95,9 O valor fisiológico do sangramento intestinal é estimado em 0,1-0,3 mg de hemoglobina/g de fezes 3. CONTROLO DE QUALIDADE Recomenda-se a utilização de controlos de hemoglobina i-fob turbidimetric Control (Ref ) para controlar os ensaios tanto no procedimento manual como no automático. Cada laboratório deverá estabelecer o seu próprio controlo de qualidade e efectuar correcções no caso de os controlos não cumprirem as tolerâncias exigidas. SIGNIFICADO CLÍNICO 3-7 i-fob Controls set Ref: é um kit imunoturbidimétrico para a quantificação de hemoglobina em fezes humanas. A hemoglobina é a proteína principal dos eritrócitos. A presença de hemoglobina nas fezes ou de sangue oculto nas fezes (FOB) é indicativa de algumas patologias associadas ao tracto gastrointestinal, como pólipos do cólon, adenomas, carcinoma colorrectal, colite ulcerativa e doença de Crohn. Recomenda-se a colonoscopia como ensaio definitivo para o diagnóstico. O método turbidimétrico não é adequado como método de rastreio para as doenças do tracto gastrointestinal superior. CARACTERÍSTICAS ANALÍTICAS As características analíticas estão disponíveis mediante pedido. NOTAS 1. A amostra de fezes não deve ser colhida durante o período menstrual ou em processos hemorroidais. O álcool, a aspirina e outros fármacos tomados em excesso podem causar irritação gastrointestinal. Evitar o consumo destas substâncias, 48 horas antes da colheita da amostra. 2. A linearidade do ensaio depende da relação amostra/reagente. Diminuindo o volume da amostra, aumenta-se o limite superior de linearidade, ainda que se reduza a sensibilidade. 3. O diagnóstico clínico não deve ser efectuado apenas com os resultados de um único ensaio, devendo também ser considerados os dados clínicos do doente. 4. Em aparelhos automáticos, evitar a presença de bolhas nos reagentes que podem interferir com os resultados das NÁLISES. BIBLIOGRAFIA 2. Vilkin A, et al. American Journal of Gastroenterology; 100 (11): (2005). 6. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3 rd Ed. Burtis CA, Ashwood ER. WB Saunders Co., (1999). 7. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests. 3 th ed. AACC Press (1997).
i-fob Turbidimetric CLONATEST i-fob Turbidimetric Latex Turbidimetry REFERENCE VALUES SUMMARY REAGENTS QUALITY CONTROL PREPARATION
Latex Turbidimetry 1 x 40 ml 5 x 40 ml 11 x 40 ml CONTENTS CONTENTS CONTENTS R1.Reagent 1 x 32 ml R1.Reagent 5 x 32 ml R1.Reagent 11 x 32 ml R2.Reagent 1 x 8 ml R2.Reagent 5 x 8 ml R2.Reagent 11 x 8 ml
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