EFECTIVIDAD DE HONGOS ENTOMOPATÓGENOS EN EL CONTROL DEL PSÍLIDO DE LOS CÍTRICOS Diaphorina citri (HEMIPTERA: PSYLLIDAE) EN COLIMA

Transcripción

1 EFECTIVIDAD DE HONGOS ENTOMOPATÓGENOS EN EL CONTROL DEL PSÍLIDO DE LOS CÍTRICOS Diaphorina citri (HEMIPTERA: PSYLLIDAE) EN COLIMA ENTOMOPATHOGENIC FUNGI EFFECTIVENESS IN CONTROL CITRUS PSYLLID Diaphorina citri (HEMIPTERA: PSYLLIDAE) IN COLIMA Marco Antonio Mellín-Rosas, Ismael Hernández-Betancourt, María del Carmen Núñez-Camargo y Hugo César Arredondo-Bernal. Centro Nacional de Referencia de Control Biológico, SENASICA-DGSV, Km. 1.5 Carretera Tecomán-Estación FFCC, CP , Tecomán, Colima, México Resumen. Se evaluó la efectividad en campo de cuatro hongos entomopatógenos contra Diaphorina citri, mismos que se seleccionaron con base en la virulencia; fueron tres cepas de Isaria fumosorosea Pf15, Pf17 y Pf21 y una de Metarhizium anisopliae Ma59, que en pruebas de laboratorio registraron mortalidades del al 100% en ninfas y del al % en adultos. En el estudio, la mortalidad obtenida varió de a 90.34%, y con base en el análisis estadístico se determinó que hubo diferencias entre tratamientos y la comparación de medias señala como mejor a Pf21 con 90.72, seguida de Ma59 con y Pf17 con 58.29%, mientras que Pf15 registró la mortalidad más baja con 47.90%. El testigo tuvo una mortalidad de 38.65%. Considerando mortalidad por micosis comprobada, las cepas Pf21 con y la Pf17 con 45.93% mostraron los mejores resultados y fueron estadísticamente iguales; seguidas de las cepas Pf17 con y Ma59 con 7.40%, las cuales también fueron estadísticamente iguales. El testigo no presentó mortalidad ocasionada por las cepas evaluadas. Palabras clave: Control biológico, Hongos, Diaphorina citri, Isaria fumosorosea, Metarhizium anisopliae. Abstract. The effectiveness of four entomopathogenic fungi in the field against Diaphorina citri was evaluated, they were selected on the basis of virulence were three strains of Isaria fumosorosea Pf15, Pf17 and Pf21 and one of Metarhizium anisopliae Ma59, which in laboratory tests showed mortalities of to 100% on nymphs and to 95.22% on adults. In the study the mortality obtained was of to 90.34%, and based on statistical analysis it was determined that there were differences between treatments and comparison of means indicated as best to Pf21 with 90.72, followed by Ma59 with and Pf17 with 58.29, while the Pf15 recorded the lowest mortality with 47.90%. The control had a mortality of 38.65%. Considering proven fungal mortality, the strains Pf21 with and Pf17 with 45.93%, reported the best results and were statistically equal, followed by Pf17 with and Ma59 with 7.40%, also statistically equal. The control had no mortality caused by the fungal strains tested. Keywords: Biological control, fungus, Diaphorina citri, Isaria fumosorosea, Metarhizium anisopliae. Introducción Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae), es una plaga citrícola importante de amplia distribución mundial (Halbert & Nuñez 2004, Quereshi & Stansly 2009). La importancia económica de D. citri radica en que es vector de la bacteria Gram negativo Candidatus Liberibacter, agente causal de una de las enfermedades más destructivas de los cítricos enverdecimiento de los cítricos, huanglongbing o greening (Bové 2006). La bacteria Candidatus liberibacter no se puede controlar a través de productos químicos, tampoco se ha encontrado alguna planta que tolere el ataque de esta enfermedad. Los árboles infectados reducen su producción y en un periodo de 3 a 5 años estos árboles mueren (Meyer et al. 2008). 367

2 En México se registró por primera vez la presencia del psílido asiático de los cítricos en Campeche, durante De ese tiempo hasta la fecha este psílido se encuentra distribuido en la mayoría de las regiones citrícolas más importantes de México y su control está basado en el uso de agroquímicos y liberaciones de enemigos naturales. El control biológico es una estrategia que juega un papel importante en la reducción de la densidad de población de plagas agrícolas (Quereshi & Stansly 2009), además de que implementar su uso coadyuvaría a disminuir el deterioro ambiental ocasionado por las aplicaciones constantes de agroquímicos. Los hongos entomopatógenos han demostrado ser agentes potenciales en el control microbial de artrópodos (Goettel et al. 2000), por lo que estos puede ser una alternativa al uso de plaguicidas en el control de D. citri. A nivel mundial se reportan ocho géneros de hongos entomopatógenos que intervienen en la regulación natural de poblaciones de D. citri (Hall 2008). En México a través de ensayos de laboratorio se han seleccionado con base en su patogenicidad cuatro cepas de hongos entomopatógenos, mismas que registraron niveles de mortalidad del 93.1 al 100% en ninfas y al % en adultos de D. citri (Mellín-Rosas et al., 2009). Con las cepas de hongos entomopatógenos que resultaron candidatos para emplearse en el control de D. citri, se estableció este estudio para corroborar su efectividad en el control del psílido asiático de los cítricos bajo condiciones de campo en el estado de Colima. Metodología La evaluación se realizó en un predio de limón mexicano, en la localidad de Los Reyes, del Municipio de Armería, Col. Donde se estableció un experimento con un arreglo completamente al azar con cinco tratamientos incluyendo al testigo y tres repeticiones. Los tratamientos fueron las cepas Ma59, Pf15, Pf17, Pf21 y el testigo que consistió de agua más dispersante. Por cada tratamiento se asperjaron 30 árboles infestados por Diaphorina citri, se consideró como repetición cada 10 brotes infestados; los cuales fueron marcados con una cinta distintiva y asignado los datos correspondientes, también se verifico que los brotes seleccionados estuvieran libres de hormigas y enemigos naturales. Se aplicó una suspensión a la concentración de 1 x 10 7 conidios/ml + Aceite mineral 1ml/l + dispersante 1ml/l. El testigo fue asperjado con agua y dispersante. Para la aplicación se utilizó una aspersora de motor a una presión de 200 libras de presión. Después de la aplicación todos los brotes fueron cubiertos con una bolsa de organza, para evitar que los individuos fueran atacados por enemigos naturales u hormigas. Siete días después de la aplicación de la suspensión de cada una de las cepas, los brotes tratados y los del testigo fueron cortados. De cada brote se contabilizaron los individuos vivos, muertos y micozados, tanto de los brotes tratados, como de brotes testigo (Poprawski et al. 1999). Todos los individuos muertos se colocaron en cámara húmeda para favorecer la esporulación, los individuos muertos en los brotes del testigo también fueron colocados en cámara húmeda; el propósito fue verificar si los individuos murieron por la acción de la cepa evaluada o por otro microorganismo. Cada cámara húmeda se marcó con los datos del brote correspondiente y se mantuvieron a una temperatura de ºC. Después de permanecer cinco días en cámara húmeda, se contabilizaron los individuos muertos con desarrollo de micosis. Previa transformación angular, los porcentajes de mortalidad, 368

3 se sometieron a análisis de varianza y prueba de separación de medias mediante DMS (0.05), utilizando SAS (1997). Resultados La humedad relativa durante el día de la aplicación de los hongos entomopatógenos fue de aproximadamente 87.8%, y durante el desarrollo del estudio vario de a 88.35, mientras que la temperatura máxima registrada fue de 28.7 C y la mínima de 13.7 C, no se registraron lluvias (Grafica 1). Grafica 1. Temperatura relativa registrada durante el desarrollo de la evaluación en campo T. Max. T. Min. T. Med. HR 25/02/ /02/ /02/ /02/ /03/ /03/ /03/ /03/2011 FECHA Al analizar los brotes se observaron ninfas y adultos de D. citri con desarrollo de micosis (Fig. 1), el desarrollo del hongos se debe a las condiciones favorables de temperatura y humedad relativa que se registro durante esta evaluación. Figura 1. Ninfas y adulto de Diaphorina citri con desarrollo de infección causada por Isaria fumosorosea. Los resultados muestran que los porcentajes de mortalidad varían de a 90.34%. Con base en el análisis estadístico se determina que hay diferencias entre tratamientos y la comparación de medias señala como mejor a la cepa Pf21 de Isaria fumosorosea, seguida de las cepas Ma59 de Metarhizium anisopliae y Pf17 de I. fumosorosea con y 58.29% 369

4 respectivamente, mientras que la cepa Pf15 registro el nivel de mortalidad más bajo con 47.90%. El testigo presentó un nivel de mortalidad de 38.65% (Cuadro 1). Cuadro 1. Mortalidad de individuos de Diaphorina citri. HONGO CEPA % MORTALIDAD Isaria fumosorosea Pf a Metarhizium anisopliae Ma b I. fumosorosea Pf bc I. fumosorosea Pf cd Testigo d También a través de comparación de medias se determina que las cepas de I. fumosorosea Pf21 y Pf17 fueron las que presentaron mayor cantidad de individuos con desarrollo de micosis y fueron estadísticamente iguales con una mortalidad de y 45.93%, respectivamente; seguidas de las cepas de I. fumosorosea Pf17 y Metarhizium anisopliae Ma59, también estadísticamente iguales con y 7.40% de individuos muertos por micosis, respectivamente (Cuadro 2). Cuadro 2. Mortalidad de individuos de Diaphorina citri con desarrollo de micosis. HONGO CEPA % MORTALIDAD Isaria fumosorosea Pf a I. fumosorosea Pf a I. fumosorosea Pf b Metarhizium anisopliae Ma b Discusión La aplicación de los hongos entomopatógenos afecta a los individuos de D. citri, aunque no en el mismo grado que en las pruebas de laboratorio. La mortalidad en el testigo fue de 38.65%, y se le atribuye al efecto de un hongo (prob. Cladosporium spp.) que suele presentarse de manera natural; su actividad entomopatógena es discutida porque algunas especies son fitopatógenas y la mayoría saprofitas sobre vegetación o sobre el suelo (Pasco et al. 2004). El hecho de no haber desarrollado micosis en el resto de la población de D. citri tratada puede deberse al efecto inhibidor de este hongo saprófito, adicionalmente la mortalidad en el testigo también pudo ser ocasionada por efecto de sus enemigos naturales, por ejemplo comportamiento de alimentación por T. radiata (Fauvergue & Squilici 1991) lo que permitió la oportunidad de crecimiento del hongo saprófito mencionado sobre las ninfas muertas. En importante señalar que el uso de las bolsas de organza para confinar los brotes tratados es fundamental debido a que si no existen la condiciones favorables para el desarrollo de micosis, los individuos muertos se pueden desprender del brote, porque los psílidos muertos no se adhieren fuertemente a las superficie de los brotes (Meyer et al. 2008). Cuando no se utilizan las bolsas para confinamiento, la reducción de población no se puede atribuir al efecto del producto aplicado, debido a que bajo condiciones de campo las ninfas y adultos de D. citri están expuestas a la acción de sus enemigos naturales. Las condiciones ambientales favorables permitieron observar el desarrollo del hongo sobre ninfas y adultos de D. citri, a diferencia de los resultados obtenidos por Hoy et al. (2008) 370

5 en Florida, donde derivado de las condiciones de humedad relativa baja no les permitió observar insectos con desarrollo de micosis en campo, sin embargo bajo condiciones de laboratorio lograron determinar que las ninfas colectadas desarrollaron infección por un hongo morfológicamente similar al que aplicaron. Conclusiones La cepa Pf21 resultó ser la más efectiva para el control de D. citri, con una mortalidad del 90.32%, sin embargo solo el 59.79% de los individuos muertos desarrolló micosis con características morfológicas similares a esta cepa. Las condiciones ambientales favorables para el hongo entomopatógeno permitieron que las ninfas y adultos muertos por efecto de este mismo desarrollaran micosis bajo condiciones de campo. Perspectivas Es necesario realizar nuevamente pruebas en campo que permitan contar con datos más concluyentes del efecto de estas cepas de hongos entomopatógenos sobre las poblaciones de D. citri, de tal manera que tengamos oportunidad de discriminar el efecto de otros factores como el hongo saprófito Cladosporium spp. Evaluar el efecto de estas cepas de hongos entomopatógenos en otras áreas citrícolas del país, para determinar si persiste la efectividad de la cepa Pf21. Realizar evaluaciones en épocas de baja humedad relativa, aplicando los hongos entomopatógenos preferentemente por la tarde y antes o después de un riego. Evaluar la interacción de hongos entomopatógenos e insectos entomófagos en el control de D. citri. Literatura citada Aubert B., J. M. Bove et J. Ettiene La lutte contre lamadie du greening des agrumes á l ile de la Réunion. Resultats et perspectives. Fruits 35: Bové J. M Huanglongbing: a destructive, newly-emerging, century-old disease of citrus. Journal of Plant Pathology 88 (1):7-37. Goettel, M.S., G.D. Inglis & S.P. Wraight Fungi, pp In: L.A. Lacey and H.K. Kaya (eds.), Field Manual of Techniques in Invertebrate Pathology. Klumer Academic Publisher. Printed in the Netherland. Halbert S. E. & C. A. Nuñez Distribution of the asian psyllid, Diaphorina citri Kuwayama (Rhynchota: Psyllidae) in the Caribbean Basin. Scientific Notes. Florida Entomologist 87(3): Hall, D.G Biological control of Diaphorina citri. En: Resúmenes del Taller Internacional sobre Huanglongbing y el Psílido Asiático de los Cítricos. Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria-SAGARPA y Organización Norteamericana de Protección a las Plantas. Mayo de 2008, Hermosillo, Sonora, México. Fauvergue, X. & S. Quilici Etude de certains parameters de la biologie de Tmarixia radiata (Waterston, 1922) (Hymenoptera: Eulophidae), ectoparasitoide primaire de Diaphorina citri Kuwayama (Hemiptera: Psyllidae) vecteur asiatique du greening des agrumes. Fruits 64(2):

6 Hoy, M.A., R. Singh & M.E. Rogers Evaluations of a novel isolate of Isaria fumosoroseafor control of the asian citrus psyllid, Diaphorina citri (Hemiptera: Psyllidae). Florida Entomologist. 93(1): Jason M. Meyer, J.A., M. A. Hoy & D. G. Boucias Isolation and characterization of an Isaria fumosorosea isolate infecting the asian citrus psyllid in Florida. Journal of Invertebrate Pathology 99: Meyer, J.M., M.A. Hoy & D.G. Boucias Isolation and characterization of an Isaria fumosorosea isolate infecting the Asian citrus psyllid in Florida. Journal of Invertebrate Pathology 99: Pasco B. A., J. Faull & M.S.J. Simmonds Effect of different photoperiods on the growth, infectivity and colonization of Trinidadian strains of Paecilomyces fumosoroseus on the greenhouse whitefly, Trialeurodes vaporariorum, using a glass slide bioassay. Journal of Insect Science 4: 38. Poprawski, T.J., P.E. Parker, & J.H. Tsai Laboratory and field evaluation of hyphomycete insect pathogenic fungi for control of brown citrus aphid (Homoptera: Aphididae). Environ. Entomol. 28: Qureshi, J.A. & P.A., Stansly Exclusion techniques reveal significant biotic mortality suffered by Asian citrus psyllid Diaphorina citri (Hemiptera: Psyllidae) populations in Florida citrus. Biological Control 50: SAS Institute, SAS/STAT software: changes and hancements through relese 6.12 SAS Institute, Cary, NC. 372