un continuo desafío MARTA ROCCHI Especialista en Bacteriología -UNC Hospital Nacional de Clínicas - UNC

Transcripción

1 IDENTIFICACION DE BNF MAS FRECUENTES un continuo desafío MARTA ROCCHI Especialista en Bacteriología -UNC Hospital Nacional de Clínicas - UNC

2 Qué sabemos de los BNF??? ampliamente distribuídos dos en el ambiente sobreviven en el ambiente hospitalario hay especies multirresistentes hay especies psicrófilas bancos de sangre pacientes hospitalizados con tratamiento antibiótico tico pueden colonizarse

3 Patógenos obligados Burkholderia pseudomallei Burkholderia mallei Bordetella pertussis - B. parapertussis Brucella Patógenos oportunistas Pseudomonas aeruginosa Acinetobacter baumannii Stenotrophomonas maltophilia Complejo Burkholderia cepacia Achromobacter xylosoxidans

4 generalmente son oportunistas de baja virulencia se presentan en cultivos mixtos es difícil determinar cuándo realizar pruebas de identificación n y de susceptibilidad

5 Cuándo identificamos un BNF? según n la significancia clínica cuando se lo recupera de un sitio normalmente estéril

6 Es fácil f llegar a identificar a nivel de especie? Y hay géneros g que sís por lo general no es sencillo se requiere de paciencia si llegamos a género Aleluia!!

7 Cómo sospechamos un BNF en el laboratorio

8 TSI Pico alcalino desarrolla pobremente a las 24 hs en agar sangre o triptosa soja bacilo o cocobacilo gram negativo alcaliniza el pico del TSI y no produce cambios en el fondo Fondo neutro

9 primero debemos tener en cuenta morfología a de las colonias: tamaño, bordes, consistencia, aspecto presencia de pigmento el olor: frutal (Pseudomonas aeruginosa, Alcaligenes faecalis, Myroides, Empedobacter brevis, Chryseobacterium gleum-indologenes indologenes), amoniacal Stenotrophomonas Stenotrophomonas maltophilia,,,, etc

10 una vez seleccionada la colonia, hacemos el GRAM Es fundamental y orientativo ver la MORFOLOGIA de la bacteria en cuestión Es un bacilo?? un cocobacilo?? cocoide??

11 Veamos pues cómo c identificar: Pseudomonas fluorescentes Acinetobacter baumannii Complejo Burkholderia cepacia Stenotrophomonas maltophilia Alcaligenes faecalis (ex A.odorans) Achromobacter xylososoxidans Elizabethkingia meningoseptica Myroides Chryseobacterium gleum-indologenes

12 Las pruebas CLAVE para iniciar la identificación n son: OXIDASA (+) (-) (+) (-) (-) (+) MOVILIDAD

13 ARBITRARIAMENTE + Movilidad OXIDASA - Movilidad GRUPO A GRUPO B GRUPO C GRUPO D

14 Género Pseudomonas Pseudomonas aeruginosa P.fluorescens - P.putida P.veronii - P.monteilii P.mosseilii - P.stutzeri P.stuzeri like (CDC grupo Vb3) P.mendocina-P.alcaligenes P.pseudoalcaligenes Ex Pseudomonas Burkholderia-Ralstonia- Cupriavidus-Pandoraea Comamonas (Delftia) Acidovorax-Brevundimonas GRUPO A Achromobacter Alcaligenes faecalis Rhizobium- Balneatrix Shewanella Methylobacterium Roseomonas Ochrobactrum Sphingomonas Agrobacterium Oligella - Bordetella CDC grupo I; WO-1; O- 1; O-2; O-3; OFBA-1

15 + Movilidad OXIDASA + GRUPO A Grupo luorescente

16 Grupo fluorescente pioverdina King B FLN P. aeruginosa P. fluorescens P. putida P. veronii P. monteilii P. mosseilii

17 Grupo fluorescente Testigo ADH + ADH + 42ºC 4ºC Gel P. aeruginosa + - +/- P. fluorescens P. putida - - -

18 ENTEROBACTERIA ARGININA DEHIDROLASA BNF Testigo ADH + Testigo ADH +

19 + Movilidad OXIDASA + GRUPO A Grupo luorescente Pruebas marcadoras fenotípicas

20 RUPO A Pruebas marcadoras fenotípicas mínimasm Acido de lactosa Resistencia al colistín Decarboxilación de Lisina Hidrólisis de la Acetamida Denitrificación Pigmento Acido de glucosa Hidrólisis de la Arginina

21 RUPO A Acido de LACTOSA (FLN OF) Burkholderia Sphingomonas Rhizobium Agrobacterium Grupo O3 Ralstonia Pseudomonas spp Lisina decarboxilasa positiva cido Complejo Burkholderia cepacia

22 Complejo B. cepacia RUPO A Resistencia al COLISTÍN Burkholderia Ralstonia Pandoraea LDC positiva

23 RUPO A ACETAMIDA positiva P. aeruginosa - Alcaligenes faecalis Achromobacter spp - B. cepacia (50%) Bordetella - Delftia + +. aeruginosa Xilosa + ADH - Achromobacter xylosoxidans LDC + Complejo B. cepacia Olor frutal y Gas NO - 2 Alcaligenes faecalis

24 RUPO A Denitrificación. aeruginosa no fluorescente.mendocina - P.stutzeri. stutzeri-like (CDC grupovb3) chromobacter xylosoxidans.picketti-ochrobactrum ligella-rhizobacterium urkholderia pseudomallei ADH Almidón n + Maltosa + Manitol + P stutzeri

25 RUPO A PIGMENTO PARDO/TOSTADO P.stutzeri P stutzeri-like (CDC Shewanella ROSADO Roseomonas Methylobacterium Azospirillum (CDC grupovb3) AMARILLO B.vesicularis P. mendocina Sphingomonas Agrobacterium Balneatrix Acidovorax Grupos CDC NARANJA B. vesicularis

26 RUPO A ARGININA dehidrolasa positiva Pseudomonas grupo fluorescente P. mendocina P. stutzeri-like (CDC grupovb3) P. luteola Ochrobactrum anthropi Burkholderia pseudomallei B. mallei Acidovorax facilis-delafieldii ADH +

27 RUPO A Acido de GLUCOSA negativa (OF) BNF inactivos, inertes a los H de C significación n clínica dudosa identificación n fenotípica dificultosa Bordetella Oligella Delftia Alcaligenes faecalis - Cupriavidus (ex R.paucula) Roseomonas Methylobacterium Shewanella A.xylosoxidans subsp denitrificans Pseudomonas CDC grupo 1 - P.pseudoalcaligenes - Olor frutal y Gas NO - 2 Alcaligenes faecalis

28 + Movilidad OXIDASA + GRUPO A - GRUPO B Grupo luorescente Pruebas marcadoras fenotípicas

29 GRUPO B Elizabethkingia meningoseptica C. gleum-indologenes Empedobacter brevis Myroides spp Sphingobacterium spp. Pedobacter spp Sphingomonas paucimobilis Oligella urethralis Psycrobacter immobilis (gluc v) Psycrobacter phenilpyruvicus Weeksella virosa Bergeyella zoohelcum Neisseria weaveri N. elongata subsp. nitroreducens Moraxella spp Paracoccus yeei (EO-2) Bacilo Gilardi Grupo 1 CDC grupo IIc, IIe, IIg, IIh, IIi CDC grupo EO-3, EF-4b Brucella spp Advenella incenata Haemabacter Lanbacter Alishewanella

30 Nuevos géneros g ex GéneroG nero Flavobacterium Elizabethkingia F. meningosepticum meningoseptica Chryseobacterium F. gleum F. indologenes F. balustinum - CDC llb F. indoltheticum Empedobacter brevis F. breve Myroides spp F. odoratum Flavobacterium spp F. aquatile aquatile y otras especies no encontradas en muestras clínicas

31 + Movilidad OXIDASA + GRUPO A - GRUPO B Grupo luorescente INDOL + - Pruebas marcadoras fenotípicas

32 GRUPO B INDOL + GLUCOSA + ESCULINA + DNAsa + Manitol + DNAsa - Manitol - Elizabethkingia meningoseptica Chryseobacterium gleum-indologenes

33 GRUPO B INDOL - GLUCOSA - Myroides Neisseria weaveri - Myroides N. elongata subsp. nitroreducens Moraxella spp-bacilo Gilardi Grupo 1 CDC grupo IIc, IIe,IIg, IIh, IIi DNAsa + Urea + Myroides spp

34 + Movilidad OXIDASA - Movilidad + GRUPO A - GRUPO B + GRUPO C Grupo luorescente INDOL + - Pruebas marcadoras fenotípicas

35 GRUPO C Stenotrophomonas maltophilia Complejo Burkholderia cepacia (14% ox - ) Burkholderia gladioli (53% (53% ox - ) Pseudomonas luteola (ex Chryseomonas) Pseudomonas oryzihabitans (ex Flavimonas) Bordetella trematum Sphingomonas paucimobilis (6% son ox -) Massilia timonae

36 RUPO C Lisina decarboxilasa positiva Testigo + Stenotrophomonas maltophilia + DNAsa - Complejo Burkholderia cepacia

37 + Movilidad OXIDASA - Movilidad + GRUPO A - GRUPO B + GRUPO C - GRUPO D Grupo luorescente INDOL LDC Pruebas marcadoras fenotípicas

38 RUPO D Acinetobacter spp. CDC grupo EO-5 CDC grupo NO-1 Bordetella holmessi Bordetella parapertussis Sphingomonas paucimobilis (es móvil m entre ºC, no a 37ºC) Brucella canis

39 Acinetobacter spp. morfología cocoide a cocobacilar NO reducen los NO 3- a NO 2-32 genoespecies 17 especies Glucosa(+) no hemolítico 44ºC A.baumannii Glucosa(+) hemolítico A haemolyticus Glucosa (-)( A lwoffii

40 REPASANDO Y CONCLUYENDO MOVILIDAD y OXIDASA Punto de partida Elementales en la identificación n de BNF AROMA DEL CULTIVO CARACTERISTICAS CULTURALES olor frutal, amoniacal Pigmentos solubles e insolubles Forma, borde. Consistencia PERFIL de RESISTENCIA Polimixina,, AG, Carbapenemes API 20 NE Rápido, de fácil f manejo

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