11 knúmero de publicación: kint. Cl. 6 : G01N 27/44. k 72 Inventor/es: Birch, Brian Jeffrey y. k 74 Agente: Carpintero López, Francisco

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1 k 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 knúmero de publicación: kint. Cl. 6 : G01N 27/44 k 12 TRADUCCION DE PATENTE EUROPEA T3 k k k k 86 Número de solicitud europea: Fecha de presentación : Número de publicación de la solicitud: Fecha de publicación de la solicitud: k 4 Título: Mejoras en o relacionadas con reacciones electroquímicas. k Prioridad: GB k 73 Titular/es: UNILEVER N.V. Weena 4 13 AL Rotterdam, NL k 4 Fecha de la publicación de la mención BOPI: k 72 Inventor/es: Birch, Brian Jeffrey y Morris, Nicholas Andrew k 4 Fecha de la publicación del folleto de patente: k 74 Agente: Carpintero López, Francisco ES T3 Aviso: En el plazo de nueve meses a contar desde la fecha de publicación en el Boletín europeo de patentes, de la mención de concesión de la patente europea, cualquier persona podrá oponerse ante la Oficina Europea de Patentes a la patente concedida. La oposición deberá formularse por escrito y estar motivada; sólo se considerará como formulada una vez que se haya realizado el pago de la tasa de oposición (art 99.1 del Convenio sobre concesión de Patentes Europeas). Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, Madrid

2 1 ES T3 2 DESCRIPCION Mejoras en o relacionadas con reacciones electroquímicas. Campo de la invención Esta invención se refiere a reacciones electroquímicas. Antecedentes de la invención Hay circunstancias que implican reacciones electroquímicas en las que es necesario proporcionar un entorno particular, por ejemplo, condiciones alcalinas, para que tenga lugar una reacción de interés o en las que se requiere que un reactivo particular, por ejemplo, iones hidrógeno, participe en una reacción de interés. Hasta la fecha esto se ha realizado generalmente suministrando a la mezcla de la reacción un reactivo apropiado, por ejemplo, depositando una capa liberable de reactivo en una celda electroquímica o suministrando a la celda un reactivo en solución. En ciertas situaciones pueden surgir dificultades prácticas. Por ejemplo, puede ser difícil depositar más de una capa de reactivo de tal manera que todas las capas sean liberadas eficientemente en la solución. Además, suministrar una cantidad medida o conocida de reactivo en solución requiere una medición apropiadamente exacta. La presente invención proporciona un procedimiento alternativo. La publicación Sensors and Actuators B Chemical, volumen B7, número 1/3, páginas , de Olthuis et al., describe un dispositivo de valoración culombimétrica en el que se generan iones hidrógeno o iones hidroxilo en un electrodo actuador de un metal noble muy próximo a un ISFET sensible al ph. La publicación Analytical Chemistry, volumen 14, número 7, páginas , de Hawkridge et al., describe una valoración culombimétrica indirecta de hemoproteínas usando un electrodo ópticamente transparente en el que se genera un reactivo de valoración reductor u oxidante. Sumario de la invención En un aspecto la presente invención proporciona un procedimiento para realizar una reacción electroquímica, en el que se genera electroquímicamente una cantidad controlada de un primer reactivo en un electrodo en contacto eléctrico con una solución de una sal electroquímicamente inerte, comprendiendo el procedimiento la etapa de aplicar al electrodo un potencial eléctrico adecuado durante un tiempo adecuado para generar una cantidad controlada del primer reactivo por reacción electroquímica entre el electrodo y una especie en solución, caracterizado porque se fuerza la difusión en solución del primer reactivo para producir, adyacente al electrodo, una capa delgada localizada de dicho primer reactivo que tiene un espesor menor de 1 mm, y porque en el entornodelacapadelgadasesiguelacantidad o presencia del primer reactivo o de una especie adicional producida en solución en respuesta a la producción del primer reactivo. El término capa delgada, tal como se usa en esta Memoria, significa que tiene un espesor menor de 1 mm, preferiblemente en el intervalo de0,1a0,2mm El procedimiento de la invención implica por lo tanto generar el primer reactivo in situ en un electrodo. La difusión del reactivo en la solución que rodea al electrodo originarálacreación de un entorno localizado del reactivo en la proximidad del electrodo, dependiendo la cantidad de reactivo de la corriente generada y del tiempo durante el que se aplica por lo que es controlable de un modo sencillo y fácil. El reactivo generado por este procedimiento se puede usar de dos maneras principales: 1) Para proporcionar un entorno adecuado para permitir que tenga lugar una reacción deseada, por ejemplo, proporcionar un entorno alcalino antes de la medición electroquímica del contenido de un azúcar reductor en una solución, como se describe en la Memoria de la Solicitud de Patente Británica n (publicada como WO 9/16198). En este caso la concentración de reactivo en el entorno localizado no es crítica. Simplemente es suficiente que se proporcione o se supere una concentración mínima especificada. 2) Para proporcionar una cantidad conocida de un reactivo que reaccione estequiométricamente con un analito, por ejemplo, iones hidrógeno, para su uso en una medición por valoración del ph. En este caso es necesario proporcionar una cantidad conocida exacta de reactivo en un tiempo conocido. Estas dos formas se podrían usar también conjuntamente, proporcionando el primer reactivo un entorno necesario y reaccionando estequiométricamente. El primer reactivo puede comprender iones hidrógeno o iones hidroxilo. Éstos se producen fácilmente aplicando un potencial eléctrico al agua, por ejemplo, a una solución acuosa de un reaccionante. Dependiendo de la polaridad de la carga en los electrodos, el agua se descompone de acuerdo con las siguientes ecuaciones: Ánodo 2H 2 O H 2 + H gas acuoso Cátodo 4H 2 O 2H 2 O 2 + 4H + acuoso acuoso 2H 2 O 2 2H 2 O + O 2 gas Por lo tanto,en el ánodo se producen iones hidroxilo junto con gas hidrógeno mientras que en el cátodo se producen iones hidrógeno junto con gas oxígeno. Alternativamente, como primer reactivo se pueden producir otros reactivos, como cloro, bromo y yodo, por tratamiento de soluciones de sales adecuadas, por ejemplo, KCl, KBr y KI. El primer reactivo se puede usar para generar un reactivo adicional que cree un entorno deseado o participe en una reacción deseada. Por ejemplo, cubriendo el electrodo con una membrana de intercambio iónico que contenga un ion de interés, se puede expulsar de la membrana un reactivo, como EDTA, en respuesta al contacto con los iones hidroxilo generados en el electrodo.

3 3 ES T3 4 Puede ser importante evitar la agitación o mezclado de la solución en la proximidad del electrodo en el que se produce el reactivo. Algunas reacciones electroquímicas que producen el primer reactivo implican también la producción de gas, como en la producción de iones hidrógeno o iones hidroxilo, y en estos casos puede ser necesario realizar etapas para evitar la generación o liberación del gas o para anular el efecto del gas en solución. Por ejemplo, los efectos del gas se pueden anular colocando una capa de material poroso sobre el electrodo. El material poroso puede ser papel poroso (como papel secante), material cerámico poroso, material poroso de intercambio iónico, material dieléctrico poroso, polímero poroso, etc. Algunos de estos materiales se pueden aplicar convenientemente por estampación sobre el electrodo o por polimerizacióninsitu, porejemplo, iniciada por exposición a luz ultravioleta. En el caso de gas hidrógeno, su concentración en solución se puede reducir empleando electrodos de paladio porque este material absorbe hidrógeno. En el caso de gas oxígeno, se puede evitar su desprendimiento empleando un ánodo metálico de sacrificio, por ejemplo, de plata, plomo o zinc. También pueden ser posibles otros procedimientos La invención encuentra aplicación particular en mediciones en capas delgadas de reactivo, forzadas en el interior de barreras impermeables, por ejemplo, dispositivos capilares de rellenado (CFD) o tubos huecos estrechos con diámetros de dimensiones de capa delgada pero de longitud no especificada. Es bien conocido el uso de CFD para mediciones electroquímicas, por ejemplo, como las descritas en la patente EP A. Un CFD típico comprende dos placas separadas por un espacio intermedio lo suficientemente pequeño para que el líquido pueda ser aspirado a su interior por acción capilar. El espacio intermedio es generalmente menor de 1 mm, preferiblemente en el intervalo de 0,1 a 0,2 mm. Las caras interiores de las placas llevan electrodos, por ejemplo, depositados por estampación, para hacer mediciones electroquímicas. En un CFD o tubo hueco estrecho, el espacio de la placa o la parte hueca del tubo forzarán la extensión del entorno localizado en la proximidad del electrodo en una dimensión (generalmente perpendicular a la superficie del electrodo). La extensión del entorno localizado en otras dimensiones (generalmente paralelas a la superficie del electrodo, esto es, en dirección lateral) dependerá delaextensión del electrodo y de la velocidad de difusión lateral del primer reactivo en solución. En la práctica, en un CFD se encuentra que la difusión lateral es generalmente lenta, siendo típicamente del orden de 1 mm en 1 segundos. La difusión lateral se puede controlar también, si se requiere, usando un electrodo de guarda, como se describe en la Memoria de la Solicitud de Patente Británica n (WO 9/16198). El entorno de capa delgada también puede ser definido por intersticios o huecos, por ejemplo, poros, pocillos o canales de dimensiones de capa delgada, en matrices sólidas, por ejemplo, de papel, geles (solubles o insolubles en agua), polímeros, membranas de intercambio iónico, etc Dichos entornos de capas delgadas pueden estar en contacto con una solución voluminosa, por ejemplo, con uno o más pocillos formados en un material de una matriz adecuada, permitiendo así la generación eficaz de uno o más entornos localizados de capas finas en comunicación con la solución voluminosa, por lo que se pueden realizar reacciones de diagnóstico, etc. en el entorno de capa delgada. El entorno localizado de capa delgada se puede usar en aislamiento, por ejemplo, en el caso de CFD y tubos huecos estrechos que contienen una muestra. Alternativamente, el entorno de capa delgada se puede emplear conjuntamente con una solución voluminosa, por ejemplo, con un tubo o tira de ensayo que definen un entorno de capa delgada que se sumerge en la solución voluminosa, o como huecos en un recipiente de una solución voluminosa como se ha discutido anteriormente. El electrodo debe ser inerte con respecto a los reaccionantes implicados en las reacciones que tienen lugar, por lo que no ocurren reacciones secundarias no deseadas. Materiales de electrodos adecuados incluyen oro, platino, paladio, plata, carbono, carbono/plata, materiales conductores cerámicos porosos y sustancias poliméricas conductoras eléctricamente, por ejemplo, polipirrol. La sal electroquímicamente inerte proporciona iones inertes que funcionan como portadores de carga durante el proceso. Sales adecuadas incluyen sales de sodio, potasio, litio, amonio, etc., prefiriéndose actualmente las sales potásicas. El componente aniónico puede ser, por ejemplo, nitrato, sulfato, clorato, perclorato, fluoroborato, etc. Las sales preferidas actualmente son sulfato potásico, clorato potásico y nitrato sódico. La sal estará típicamente en solución acuosa y poseerá un potencial de oxidación/reducción suficientemente alto para no participar en el proceso electroquímico. Los potenciales y tiempos eléctricos adecuados dependerán de las reacciones y condiciones implicadas y pueden ser determinados fácilmente en cualquier caso dado. Como ejemplo, en una medición en un CFD puede ser adecuado aplicar una corriente de 3 ma durante aproximadamente segundos o menos. Dependiendo de las reacciones implicadas, puede ser apropiado seguir el primer agente o una especie adicional producida en solución en respuesta a la producción del primer reactivo o ambos compuestos. Por ejemplo, el primer reactivo puede participar en una reacción electroquímica por lo que, siguiendo el empobrecimiento del primer reactivo, se obtiene una indicación de la extensión de la reacción. También se puede aprovechar la producción del primer reactivo para realizar mediciones de flujo, generando un impulso del primer reactivo en un tiempo conocido en una solución fluyente y siguiendo en un detector situado corriente abajo el tiempo interno entre la generación del impulso y la llegada del impulso al detector, proporcionando así una medida de la velocidad de flujo de la solución. En este caso, el seguimiento tiene lugar en una localización lejos del electrodo en elqueseproduceelprimerreactivo. Enlosca- 3

4 ES T3 6 sos que implican soluciones estáticas en lugar de fluyentes, generalmente debe ser apropiado que el seguimiento tenga lugar en la proximidad del electrodo que produce el reactivo. En los casos en los que el primer reactivo permite que tenga lugar una reacción o que participe en una reacción, siguiendo un producto de la reacción se obtiene una indicación del progreso de la reacción. El seguimiento se puede efectuar directa o indirectamente y puede ser cualitativo o cuantitativo. Se puede emplear una diversidad de técnicas de seguimiento diferentes, que implican el seguimiento de una gama de propiedades de la solución. Por ejemplo se puede seguir la apariencia, como el color o la turbiedad, de la solución usando técnicas colorimétricas, espectrofotométricas o turbidométricas. El seguimiento electroquímico es un procedimiento particularmente conveniente y se pueden usar técnicas potenciométricas o culombimétricas (por ejemplo amperimétricas) según sea apropiado, seleccionándose técnicas apropiadas como materia de selección de diseño. Se puede proporcionar fácilmente un sistema interno de referencia electroquímica de una manera conocida, por ejemplo, en un CFD, por medio de un electrodo de referencia adecuado, como un electrodo de plata/cloruro de plata. Como debe ser evidente por lo anterior, la invención se puede realizar en varias formas, incluyendo un CFD y en dispositivos diseñados para su uso con soluciones voluminosas. La técnica puede ser útil también para la generación local de condiciones ácidas o alcalinas en una solución voluminosa que contenga algún analito que requiere manipulación del ph. La ventaja de esta realización sobre las técnicas existentes es que no es necesaria la acidificación/alcalinización de toda la solución, resultando ventajas significativas en costes. La invención se puede aprovechar también para la medición de velocidades de flujo laminar en el interior de tubos. El tubo no necesita ser necesariamente de diámetro de capa delgada: en tubos huecos más anchos el flujo laminar puede originar una capa delgada de medio fluyente (que constituye un entorno de capa delgada) que está presente adyacente a la pared lateral del tubo. Se puede generar un impulso de reactivo, por ejemplo, alcalino/ácido, en algún punto corriente arriba del detector y se puede usar el tiempo entre la generación y la detección para calcular velocidades de flujo. En una realización adecuada, esta técnica se puede usar también para reducir la bioincrustación de tubos, generando iones hidrógeno para descomplejar cualesquiera iones metálicos traza en solución. Esta técnica tiene aplicaciones particulares en las industrias de tratamiento de aguas residuales y cloacales. Siempre que ocurra un mezclado adecuado de la solución en algún punto corriente abajo del impulso, la microflora en los reactores no debe ser afectada porque no hay cambio neto del ph. La invención puede tener también una aplicación particular para la realización de valoraciones de ph, especialmente en un sistema de análisis por inyección de flujo (FIA). Hay una relación sencilla y fija entre el número de culombios de carga que pasan a través de una solución y el número de moles de OH yh + generados. Como ocurren reacciones en el interior de un CFD en un entorno de volumen controlado, se debe comprobar la concentración de álcali o ácido. Por ejemplo, empleando impulsos de carga escalonados y midiendo el potencial intermitente o continuamente se puede determinar la concentración de analito. Un instrumento de autovaloración que emplee dicho sistema tendría ventajas sobre los sistemas existentes en cuanto a una reducción de los costes de reactivos y en el volumen de muestra requerido. Se describirá más detalladamente la invención, amododeilustración, con referencia a los dibujos adjuntos en los que: la figura 1 es una vista esquemática en sección transversal de un CFD de acuerdo con la invención; la figura 2 es una vista en planta del CFD de la figura 1 a escala reducida; la figura 3 es una gráfica de la diferencia de potencial en función del tiempo obtenida usando el CFD de las figuras 1 y 2, con diferentes concentraciones de fructosa en solución; la figura 4 es una versión a escala aumentada de las porciones finales de las curvas de la figura 3; la figura es una gráfica del potencial final en función del logaritmo de la concentración de fructosa obtenida de gráficas como la de la figura 4; y la figura 6 es una vista esquemática en sección transversal de una modificación de la realización de las figuras 1 y 2. Descripción detallada de los dibujos Lasfiguras1y2ilustranesquemáticamente un CFD de acuerdo con la invención y su uso para generar entornos ácidos y alcalinos localizados, a usar, por ejemplo, para determinar la concentración de un azúcar reductor en una solución de ensayo. El CFD es generalmente de construcción convencional, por ejemplo, como el descrito en la patente EP A. El CFD comprende dos placas separadas y 12, por ejemplo, de vidrio, material cerámico o material plástico, separadas por un espacio intermedio de aproximadamente 0,1mm. Laplacainferiorlleva3electrodos: un electrodo de oro 14 generador de ácido, un electrodo de oro 16 generador de álcali y un electrodo de referencia 18 de plata/cloruro de plata. Los electrodos se depositan usando técnicas de estampación convencionales. Los conductores queseextiendenatravés de una capa dieléctrica 22 (mostrada en la figura 2 por medio de un rayado cuadriculado) conectan los electrodos con las respectivas almohadillas terminales o de contacto 24. Encima de los electrodos hay depositada una capa porosa 26 (no mostrada para mayor claridad en la figura 2) para evitar agitación o mezclado de la solución en el CFD en la producción de burbujas de gas en los electrodos. En realizaciones de producción, se puede pensar estampar sobre los electrodos una capa de material cerámico poroso 4

5 7 ES T3 8 o de intercambio iónico. El aparato encuentra aplicación, por ejemplo, para determinar la concentración de un azúcar reductor en una solución de ensayo, usando la técnica que se describe en la Memoria de la Solicitud de Patente Británica n (WO 9/16198). En una serie de experimentos, se hicieron determinaciones de fructosa en una solución que contenía nitrato sódico (1M) y cloruro potásico (0 mm). El nitrato sódico constituye la sal electroquímicamente inerte y el cloruro potásico proporciona una fuente de iones cloruro para un electrodo de referencia de Ag/AgCl. Los experimentos se realizaron usando un CFD como el descrito generalmente en conexión con las figuras 1 y 2. Se aplicó una diferencia de potencial entre los electrodos 14 y 16. Esto originó lageneración de iones hidrógeno y gas oxígeno en el electrodo 14 (el cátodo) y de iones hidroxilo y gas hidrógeno en el electrodo 16 (el ánodo), de acuerdo con las ecuaciones dadas anteriormente. Durante la reacción, los iones hidrógeno y los iones hidroxilo se difunden lentamente desde los electrodos generadores creando una zona ácida localizada 28 (mostrada por líneas diagonales en la figura 2) en la capa porosa en la proximidad del electrodo 14 y una zona alcalina localizada (mostrada por líneas horizontales en la figura 2) en la capa porosa en la proximidad del electrodo 16. Estas zonas están separadas por una frontera neutra aproximadamente a medio camino entre los electrodos por lo que las zonas son mutuamente exclusivas y están en equilibrio. La zona alcalina constituye un entorno adecuado en el que la fructosa (u otros azúcares reductores) puede tener un efecto reductor, reduciendo reactivos reducibles disponibles. En los presentes ejemplos, el oxígeno presente en el sistema se usó como aceptor de electrones para la oxidación de la fructosa. Se siguió la reacción reductora resultante midiendo el potencial en el electrodo 16 productor de hidroxilo usando el electrodo de referencia 18. El electrodo 18 estaba, por lo tanto, localizado en la zona alcalina. En una serie de experimentos, se aplicó alos electrodos 14 y 16 una corriente de 3 ma durante un período inicial de 1 segundos. Durante la duración total de cada ensayo se registró la diferencia de potencial entre el electrodo 18 de referencia y el electrodo 16 sensor/generador de álcali. Mástardesedeterminó el potencial directriz entre los electrodos ácido y alcalino 14 y 16 y se midió el potencial en la región del electrodo alcalino 16 con respecto al electrodo de referencia 18 durante 1 segundos adicionales. El potencial de equilibrio es función del cambio en el potencial químico. Se usaron dos duplicados, cada uno de soluciones que contenían fructosa 0,M y que no contenían fructosa. Además cada solución llevaba cloruro potásico0mmy nitrato sódico 1 M, como se ha indicado anteriormente. Los resultados se muestran en las figuras 3 y 4. La figura es una gráfica de resultados adi cionales obtenidos de una manera generalmente similar, que demuestran una clara relación (logarítmica) entre la concentración de fructosa y el potencial final. La figura muestra la curva de respuesta del potencial a diversas concentraciones de fructosa (0,M, 0,2M, 0,12M, 0,0612M) usando electrogeneración de iones hidroxilo. Condiciones: carga total pasada 0,24 C (4 ma durante s), tiempo de reacción s, tiempo total de análisis 1 s. Los puntos representados muestran electrodo de Au estampado/reactivo electrogenerado (respuesta = 0,2 + 0,18 (log[fructosa]). Se muestran líneas de regresión lineal para datos obtenidos por el reactivo electrogenerador y para la respuesta obtenida usando hidróxido de litio para facilitar la oxidación de la fructosa. Se debe indicar que éstos son resultados preliminares obtenidos en condiciones no optimizadas. Se pueden alterar diversos parámetros para mejorar los resultados, incluyendo: a) maximización de la superficie del electrodo con el fin de minimizar la densidad de corriente; b) minimización del volumen de solución accesible, reduciendo la cantidad de tiempo requerida para conseguir una cierta concentración de H + /OH. Alternativamente, el CFD de las figuras 1 y 2 se puede usar en mediciones del ph. En este caso, el potencial entre los electrodos 14 y 16 se aplica en impulsos cortos, midiéndose el potencial resultante del electrodo 16 (y por lo tanto el cambio del ph en la proximidad de este electrodo) usando el electrodo de referencia 18 entre cada impulso. Representando gráficamente el potencial medido en función de la carga aplicada, se obtiene una curva sigmoidal característica, en la que el punto de inflexión indica el punto de neutralidad. Dicha reacción se puede realizar fácilmente bajo el control de medios adecuados de control por ordenador, programados deseablemente para variar el tamaño de los impulsos aplicados dependiendo de las circunstancias, reduciendo el tamaño de los impulsos cuando se aproxime el punto final de neutralidad para una mayor exactitud. En una realización alternativa de medición del ph, se puede aplicar continuamente la carga y seguir continuamente su efecto, en lugar de por impulsos, usando circuitos de carga y de seguimiento independientes y distintos. En una disposición conveniente, ilustrada esquemáticamente en la figura 6, en lugar del electrodo de referencia 18 de las figuras 1 y 2, uno de los electrodos generadores, a saber el electrodo alcalino 16, lleva un par de electrodos sensores 32 y 34 en su superficie superior, separados de esta superficie por capas dieléctricas respectivas 36. El par de sensores comprende convenientemente un electrodo de oro 32 y un electrodo de plata/cloruro de plata 34. La capa porosa 26 cubre todos los electrodos. Cuando se usa, se aplica la carga continuamente entre los electrodos 14 y 16 y se sigue continuamente en un circuito independiente la diferencia de potencial resultante entre los electrodos 32 y 34. Se obtiene también una curva sigmoidal característica. El procedimiento de la invención se puede

6 9 ES T3 usar, por ejemplo, para determinar la madurez de frutas y verduras. Esto implicaría medir el contenido de fructosa (y de otros azúcares reductores) en el zumo exprimido de una muestra de fruta o verdura, por ejemplo, como se ha descrito anteriormente

7 11 ES T3 12 REIVINDICACIONES 1. Un procedimiento para realizar una reacción electroquímica, en el que se genera electroquímicamente una cantidad controlada de un primer reactivo en un electrodo en contacto eléctrico con una solución de una sal electroquímicamente inerte, comprendiendo el procedimiento la etapa de aplicar al electrodo un potencial eléctrico adecuado durante un tiempo adecuado para generar una cantidad controlada del primer reactivo por reacción electroquímica entre el electrodo y una especie en solución, caracterizado porque se fuerza la difusión en solución del primer reactivo para producir, adyacente al electrodo, una capa delgada localizada de dicho primer reactivo que tiene un espesor de menos de 1 mm, y porque en el entorno de la capa delgada se controla la cantidad o presencia del primer reactivo o de una especie adicional producida en solución en respuesta a la producción del primer reactivo. 2. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, en el que la capa delgada localizada tiene un espesor entre 0,1 mm y 0,2 mm. 3. Un procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2,en el que el primer reactivo comprende iones hidrógeno o iones hidroxilo. 4. Un procedimiento de acuerdo con las reivindicaciones 1 ó 2,en el que el primer reactivo comprende cloro, bromo o yodo.. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el primer reactivo se usa para generar un reactivo adicional. 6. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación, en el que se cubre el electrodo con una membrana de intercambio iónico que contiene un ion de interés que es expulsado de la membrana en respuesta al contacto con el primer reactivo generado en el electrodo. 7. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el gas producido en el electrodo es absorbido en una capa de material poroso localizada sobre el electrodo Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la solución está confinada en la citada capa delgada localizada. 9. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la sal electroquímicamente inerte comprende una sal de sodio, potasio, litio o amonio.. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la sal electroquímicamente inerte comprende un nitrato, sulfato, clorato, perclorato o fluoroborato. 11. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 9 o la reivindicación, en el que la sal comprende sulfato potásico, clorato potásico onitratosódico. 12. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que la sal electroquímicamente inerte está en solución acuosa. 13. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el primer reactivo se genera en un tiempo conocido en una solución fluyente y se controla la llegada del reactivo con un detector situado corriente abajo para proporcionar una medida de la velocidad de flujo de la solución en la citada capa delgada. 14. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que se controla electroquímicamente el primer reactivo de las otras especies adicionales. 1. Un procedimiento de acuerdo con la reivindicación 14, en el que el seguimiento electroquímico se realiza usando un sistema de referencia electroquímico interno. 16. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende una valoración del ph. 17. Un procedimiento de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende la medición electroquímica del contenido de un azúcar reductor en una solución. 0 6 NOTA INFORMATIVA: Conforme a la reserva del art del Convenio de Patentes Europeas (CPE) y a la Disposición Transitoria del RD 2424/1986, de de octubre, relativo a la aplicación del Convenio de Patente Europea, las patentes europeas que designen a España y solicitadas antes del , no producirán ningún efecto en España en la medida en que confieran protección a productos químicos y farmacéuticos como tales. Esta información no prejuzga que la patente esté o no incluída en la mencionada reserva. 7

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