Manual Toma de Muestras Human PCR Kit

Transcripción

1 Manual Toma de Muestras Human PCR Kit

2 Tabla de contenido 1. Introducción Infecciones del tracto respiratorio superior... 1 a. Secreción de la zona nasal... 1 b. Secreción de área nasofaríngea... 2 c. Aspirado nasofaringe... 2 d. Secreción de la faringe... 3 e. Senos paranasales Infecciones del tracto respiratorio inferior... 4 a. Esputo por expectoración espontánea... 4 b. Esputo inducido... 5 c. Secreción traqueal... 5 d. Lavado o cepillado broncoalveolar... 6 e. Muestras obtenidas por abordaje percutáneo... 6 i. Punción pulmonar aspirativa transtorácica:... 7 ii. Punción biópsica pulmonar... 7 iii. Biopsia pulmonar por toracotomía Bibliografía Introducción Las infecciones respiratorias agudas comprenden numerosos cuadros clínicos, los que pueden dividirse de acuerdo a su localización en dos grupos, infecciones del tracto respiratorio agudo superior e infecciones del tracto respiratorio agudo inferior. Pueden ser causadas por distintos patógenos, los cuales varían de un cuadro a otro. Las principales bacterias involucradas son Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae, en las cuales se ha visto el desarrollo de resistencia a los antibióticos de uso habitual. 2. Infecciones del tracto respiratorio superior a. Secreción de la zona nasal Evitar las gotas y los baños nasales antes de tomar la muestra. El frotis y cultivo nasal no es el cultivo para diagnóstico de sinusitis, otitis media o infecciones del tracto respiratorio inferior. Sólo se recomienda tomar cultivo de fosas nasales anteriores para la detección de portadores de Staphylococcus aureus o en lesiones nasales. Para búsqueda de hongos se recomienda la misma técnica.

3 Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz. Levantar la cabeza del paciente y con la otra mano introducir la tórula 1 cm en el interior de las fosas nasales, rotarla y luego retirarla e identificar de qué fosa nasal se tomó la muestra. Guantes no estériles. Tórulas estériles. Lámina de vidrio y tubo con medio de transporte. Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz. Introducir la tórula flexible hasta la nasofaringe posterior evitando trauma. Rotar la tórula por 10 a 15 segundos para permitir la impregnación del hisopo y retirar lentamente Barreras de protección (mascarilla y protección ocular). Guantes no estériles. Tórulas estériles flexibles. Tubo estéril. b. Secreción de área nasofaríngea La persona que obtiene la muestra debe usar barreras de protección (mascarilla, protección ocular). No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea. Tomar la muestra preferiblemente en ayunas. c. Aspirado nasofaringe La persona que obtiene la muestra debe usar barreras de protección (mascarilla, protección ocular). No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea Tomar la muestra preferiblemente en ayunas.

4 Es colectado mediante el paso de una sonda nelaton de un calibre apropiado dentro de la nasofaringe. Aspirar luego el material con una jeringa estéril u otro mecanismo de succión y colocarlo en tubo estéril seco. En caso de no poder recolectar la muestra en la jeringa, envíe el extremo distal de la sonda con el material aspirado en el tubo estéril seco. Barreras de protección (mascarilla y protección ocular). Guantes no estériles. Tubo estéril seco o medio de transporte para virus. Sonda nelaton. Jeringa estéril. d. Secreción de la faringe No contaminar la tórula con secreción de cavidad oral o dientes. El hisopado de garganta está contraindicado en pacientes con diagnóstico de epiglotitis. No hacer gárgaras ni limpieza con ninguna solución bucofaríngea. Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz. Con un bajalenguas, presionar la lengua hacia abajo para visualizar los pilares de la faringe y del área tonsilar para localizar el área de inflamación y exudado. Rotar la tórula estéril sobre el área. Guantes. Tórulas estériles. e. Senos paranasales Se realiza la punción-aspiración de los mismos, lo que requiere un especialista en otorrinolaringología. Este tipo de muestra no se realiza de rutina en caso de sinusitis aguda, sino que en general se reserva para casos de

5 sinusitis crónica, para aquellos casos que no responden al tratamiento instaurado y en aquellos casos que el especialista considere necesario. Desinfectar el lugar de la punción con yodo povidona. Introducir una aguja en el antrum maxilar por debajo del cornete inferior, o en el seno frontal por debajo del marco supraorbital del ojo. Aspirar el líquido del seno. Cuando no se obtenga líquido, instilar 1 ml de suero salino estéril y aspirarlo nuevamente. Inyectar la muestra en un medio de transporte para anaerobios o en su defecto tubo estéril. Yodo povidona al 10%. Contenedor de boca ancha estéril, con tapa de rosca. Material quirúrgico de otorrinolaringología. 3. Infecciones del tracto respiratorio inferior a. Esputo por expectoración espontánea El esputo no es la muestra ideal para el diagnóstico de neumonía; se recomienda preferiblemente el lavado broncoalveolar. Recolectar la muestra en la mañana, en ayunas preferiblemente. Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado de la lengua sólo con agua para remover el exceso de flora oral y retirar prótesis dental en pacientes de edad. Para pacientes pediátricos incapaces de producir un esputo, la terapeuta respiratoria debe obtener la muestra a través de succión. En pacientes ambulatorios sintomáticos respiratorios con sospecha de tuberculosis, la primera muestra se toma el día de la consulta médica y las otras dos al día siguiente, cumpliendo las recomendaciones descritas para paciente hospitalizado. Instruir al paciente para que tosa con fuerza y profundamente, con el fin de obtener una muestra que provenga del tracto respiratorio inferior, libre de saliva contenida en la cavidad oral, la cual debe expectorar directamente en un recipiente estéril de boca ancha de tapa rosca.

6 Frasco estéril de boca ancha, de 5 cm de diámetro, de tapa rosca, con capacidad de 30 a 50 ml, de material fácil de rotular. b. Esputo inducido Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado de lengua solo con agua. Realizar nebulización con solución salina normal. Para pacientes pediátricos incapaces de producir un esputo, la terapeuta respiratoria debe obtener la muestra a través de succión. Instruir al paciente para que tosa con fuerza y profundamente, con el fin de obtener una muestra que provenga del tracto respiratorio inferior, libre de saliva contenida en la cavidad oral, la cual debe expectorar directamente en un recipiente estéril de boca ancha de tapa rosca. Frasco estéril de boca ancha de tapa rosca de 5 cm de diámetro, con una capacidad de 30 a 50 ml y material fácil de rotular. Nebulizador. Solución salina normal. c. Secreción traqueal Realice el procedimiento con técnica aséptica. De acuerdo con las características de las secreciones, irrigar con solución salina normal previo a realizar el procedimiento. Introducir la sonda sin hacer succión a través del tubo endotraqueal o cánula de traquestomía, hasta ubicarla en el espacio traqueal. Ocluya el orificio distal de la sonda y comience a succionar, retire la sonda lentamente mientras la va limpiando externamente con una gasa estéril. Tenga precaución de suspender la succión, retirando la oclusión de la sonda para que se conserve la muestra obtenida

7 en el trayecto de la misma. Coloque la muestra obtenida en frasco estéril cortando el segmento distal de la sonda, si no es posible el depósito de la muestra sola, para lo cual retira la presión en el orificio de la sonda lo que permitirá la expulsión de la muestra en el recipiente. Guantes estériles. Mascarilla con protección ocular. Sonda de nelaton. Hoja de bisturí. Solución salina normal. Gasas estériles. Frasco de boca ancha estéril o trampa recolectora. d. Lavado o cepillado broncoalveolar El paciente debe estar en ayunas para realizar el procedimiento, ya que se requiere de sedación. A través de técnica de fibrobroncoscopia. Conecte una trampa de Lukens al fibrobroncoscopio. Irrigar con 10 ml de solución salina a través del canal abierto. Succione para obtener la muestra en dos frascos estériles de boca ancha. Equipos de fibrobroncoscopia. Sistema de succión. Recipiente de boca ancha estéril de tapa rosca. e. Muestras obtenidas por abordaje percutáneo Son todos procedimientos médicos. Dentro de las técnicas invasivas son las que permiten la obtención de muestras más representativas del parénquima pulmonar, no obstante, sólo deben emplearse cuando fracasen otros métodos menos invasivos o cuando la situación del enfermo haga imprescindible conocer el diagnóstico etiológico. Técnica a realizar por personal entrenado. Pueden emplearse las siguientes:

8 i. Punción pulmonar aspirativa transtorácica: Obtención del exudado de las lesiones pulmonares a través de una punción transtorácica con aguja ultrafina con control radioscópico o ecográfico. Debe aplicarse ante infiltraciones densas (no intersticiales) y sobre todo si son periféricas. Contraindicado en pacientes con bullas, trastornos de coagulación y sospecha de hidatidosis. Posibles complicaciones, como neumotórax y hemoptisis. Es una muestra ideal para estudio en infección anaerobia grave en niños, especialmente en edades tempranas. ii. Punción biópsica pulmonar Biopsia transtorácica con trocar. Sólo en casos excepcionales y en caso de lesiones muy periféricas debido al alto riesgo de neumotórax. iii. Biopsia pulmonar por toracotomía Permite la selección visual del área neumónica a cielo abierto. 4. Bibliografía Carlberg, D. Cleanroom microbiology for the non microbiologist. Interpharm Press. INC. Buffalo Grove, Illinois CercenadoE, Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. SEIMC. España, Collins CH, Lyne PM, Grange JM. Microbiological methods. 7ma edition. Oxford Forman MS, Valsamakis A, Specimen collection, transport, and processing: Virology. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; Guerrero Gómez C; Sánchez Carrillo C. Procedimientos en microbiología clínica. Recogida, transporte y procesamientos general de las muestras en el laboratorio de microbiología, Miller JM, Holmes HT. General principles in specimen collection, transport and storage. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; Organización Mundial de la Salud. Guía para transporte seguro de sustancias

9 infecciosas y especímenes. Ginebra (Suiza): WHO/EMC/97.3; Thomson BR (JR.), and Miller M. Specimen collection, transport, and processing: Bacteriology. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; 2003.