Cubierta Lecciones Inmunologia OK curvas copy.pdf 4/6/ :21:48 AM C M Y CM MY CY CMY K

Transcripción

1 Cubierta Lecciones Inmunologia OK curvas copy.pdf C M Y CM MY CY CMY K 4/6/ :21:48 AM

2 UR

3

4 INMUNOLOGÍA Diagnóstico e interpretación de pruebas de laboratorio

5

6 INMUNOLOGÍA Diagnóstico e interpretación de pruebas de laboratorio Heber Orlando Siachoque Montañez

7 COLECCIÓN LECCIONES DE MEDICINA Centro Editorial Universidad del Rosario Universidad Colegio Mayor de Nuestra Señora del Rosario Facultad de Medicina Heber Orlando Siachoque Montañez ISBN: Primera edición: Bogotá, D.C., marzo de 2006 Coordinación editorial: Centro Editorial Universidad del Rosario Corrección de estilo: Leonardo Holguín Diagramación: Ángela María Echavarría S. Diseño de cubierta: Ángela María Echavarría S. Impresión: Cargraphics Centro Editorial Universidad del Rosario Calle 13 No Tels.: /83, Todos los derechos reservados. Esta obra no puede ser reproducida sin el permiso previo escrito del Centro Editorial Universidad del Rosario. SIACHOQUE MONTAÑEZ, Heber Orlando Inmunología diagnóstico e interpretación de pruebas de laboratorio / Heber Orlando Siachoque Montañez. Facultad de Medicina.-- Bogotá: Centro Editorial Rosarista, p. : fot.-(colección Lecciones de Medicina) Incluye bibliografía. ISBN: Inmunología / Células / Laboratorios clínicos / Técnicas de laboratorio clínico / Técnicas microbiológicas / Tecnología médica / Sangre - Análisis / Fagocitosis / Toxoplasmosis - Diagnóstico / I. Título / II. Serie. NLM QW Impreso y hecho en Colombia Printed and made in Colombia

8 CONTENIDO Módulo 1 Separación de componentes celulares y diagnóstico serológico Introducción Capítulo 1 El laboratorio en la clínica Objetivos Reacciones de precipitación Inmunodifusión simple Inmunodifusión doble tipo I Inmunodifusión doble tipo II Inmunodifusión radial simple Inmunoelectroforesis Aglutinación Aglutinación directa Aglutinación indirecta (pasiva) Aglutinación reversa Hemoaglutinación Inmunofluorescencia Inmunofluorescencia directa Inmunofluorescencia indirecta Análisis de inmunoabsorción unida a enzimas (ELISA) Pruebas de fijación del complemento Perfil inmunológico Exámenes de un perfil inmunológico Procedimiento Cuestionario Capítulo 2 Preparación de diluciones y determinación cuantitativa de leucocitos Objetivos Materiales... 23

9 2.3. Procedimiento Condiciones para tomar una muestra de sangre Condición de las muestras de suero para pruebas inmunológicas Inactivación Preparación de concentraciones Ejercicios Cámara cuenta células Ensayo de recuento de leucocitos Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Capítulo 3 Órganos linfoides Introducción Órganos linfoides primarios El timo Médula ósea Órganos linfoides secundarios Objetivos Materiales Procedimiento Órganos linfoides Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Capítulo 4 Suspensiones celulares de timo, bazo y ganglios linfáticos Separación de poblaciones de linfocitos Objetivos Materiales... 39

10 4.4. Procedimiento Suspensiones Suspensión de timo Suspensión de bazo Conteo de células Determinación de viabilidad Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Capítulo 5 Fagocitosis Introducción Objetivos Materiales Procedimiento Observación de neutrófilos Diferenciación del proceso fagocítico Informe práctico Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Capítulo 6 Separación de linfocitos T Introducción Separación de linfocitos en gradiente de densidad en Ficoll Isopaque Aislamiento de subpoblaciones linfocitarias: formación de rosetas Aislamiento de subpoblaciones linfocitarias: separación en placa Técnica de Elispot Prueba de estimulación de linfocitos Objetivos Materiales... 57

11 6.4. Métodos Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Capítulo 7 Técnica de inmunodifusión radial Introducción Alteración en la concentración de algunas proteínas séricas y su relación con algunas patologías Objetivo Procedimiento Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Capítulo 8 Inmunofluorescencia Introducción Objetivo Materiales Reactivos Procedimiento Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Capítulo 9 ELISA (enzimoinmunoanálisis) Introducción Objetivos Materiales... 68

12 9.4. Procedimiento Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Talleres de interpretación diagnóstica Taller Taller Capítulo 10 Electroforesis de proteínas Introducción Principios de la electroforesis Objetivos Técnica Procedimiento Electroforesis en agarosa Cuestionario Informe de laboratorio Resultados Discusión de resultados Conclusiones Bibliografía Módulo Libros de consulta Textos para las clases prácticas Glosario Lista de siglas y acrónimos Normas de bioseguridad... 86

13 Módulo 2 Ensayo de inmunización con péptidos inmunogénicos de Toxoplasma gondii como herramienta terapéutica y ayuda diagnóstica Introducción Objetivos General Específicos Justificación Impacto esperado Marco teórico Toxoplasmosis Taxonomía Estructura básica y ciclo de vida Taquizoitos Bradyzoitos y quistes tisulares Estado enteroepitelial Oocisto Respuesta inmune Inmunidad mediada por linfocitos T Papel de los macrógafos y las células NK Activación temprana de LT Modulación de la activación de linfocito T Regulación de las citoquinas Mecanismos efectores del INFg en la infección por Toxoplasma gondii Estructura y función del interferón g Papel del IFNg en la infección por Toxoplasma gondii. Aportes del estudio de la respuesta inmune en el modelo murino Mecanismos efectores del IFNg durante la infección por Toxoplasma gondii. Diferencias entre macrófagos murinos y humanos Nuevo mecanismo efector del INFg Diseño metodológico Materiales y métodos Tipo de estudio y población Criterios de selección

14 2.2. Técnicas de secuenciación y síntesis de péptido Unión del primer aminoácido Desprotección y neutralización Acople del siguiente aminoácido Desprotección y clivaje con HF del péptido con resina Extracción y liofilización Oxidación Diálisis del péptido Marcaje y almacenamiento del péptido Selección del modelo animal e inoculación de los péptidos Reto con los péptidos Sangrías Reto con los parásitos Variables Definición de variables Variables independientes Variables controladas Bibliografía Módulo Glosario Lista de siglas y acrónimos

15

16 Cubierta Lecciones Inmunologia OK curvas copy.pdf C M Y CM MY CY CMY K 4/6/ :21:48 AM