FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA PROFESIONAL: FARMACIA Y BIOQUIMICA CENTRO ULADECH CATÓLICA: TRUJILLO NOMBRE DE LA ASIGNATURA: TOXICOLOGIA I
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- Laura Soler Castillo
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1 FACULTAD: CIENCIAS DE LA SALUD CARRERA PROFESIONAL: FARMACIA Y BIOQUIMICA CENTRO ULADECH CATÓLICA: TRUJILLO NOMBRE DE LA ASIGNATURA: TOXICOLOGIA I CICLO ACADÉMICO: VIII DOCENTE: Q.F. MANUEL HERNANDEZ AGUILAR INTEGRANTES: CABANILLAS GONZALES FANNY GUERRA ARANDA ROY LA TORRE AVALOZ LUZDEY QUISPE VILCHEZ IRENE Tetracloruro de Carbono Página 1
2 EFECTO HEPATOTOXICO DEL TETRACLORURO DE CARBONO RESUMEN En la práctica realizada se determinó el efecto de hepatotoxicidad, nefrotoxicidad y el tiempo de coagulación con el tetracloruro de carbono. Como material biológico se utilizó a 2 cobayos lo cual se los administro 0.34ml de CCl 4, a uno de ellos y al otro se le administro 1.7ml de aceite vegetal con un intervalo de tiempo de 24, 48, 72 y 96 horas respectivamente. Los resultados obtenidos indicaron que el CCl 4 produce hepatotoxicidad y nefrotoxicidad en animales (cobayo) y en el humano si está expuesto por mucho tiempo, si existe una enfermedad existente puede conllevar a cáncer. Tetracloruro de Carbono Página 2
3 I.- INTRODUCCION El hígado es el órgano diana que sirve de indicador para las alteraciones metabólicas inducidas por tóxicos. El daño estructural o funcional que se produce por estas sustancias se denomina hepatotoxicidad. Se ha reportado gran cantidad de agentes hepatotóxicos entre los que se encuentra el tetracloruro de carbono. El mecanismo de daño hepático inducido por este agente químico genera peroxidación lipídica a través de los radicales libres (01). El cloruro de carbono puede entrar al cuerpo por vía endógena o exógena, ya sea por vía inhalatoria o aspirado, por absorción a través de la piel y mucosas, por vía ocular, por vía oral o por heridas abiertas sin cicatrizar. Se elimina por orina o exhalación. Si uno hubiese ingerido depresores del sistema nervioso central como diazepam o clonazepam, o una ingesta abusiva de alcohol, el cuadro clínico se vería mucho más comprometido, pudiendo ocasionar la muerte por fallo hepático grave llegando a mostrar una gráfica plana o paro cardiorespiratorio. Asimismo es un cancerígeno conocido, y puede ser causa de leucemia linfoide, tricoleucemia, cirrosis y cáncer de hígado y cáncer de pulmón. Todos estos daños son irreversibles. Afecta al sistema nervioso siendo depresor del mismo y conllevando leves alucinaciones. También, dependiendo la cantidad ingerida, puede causar mareos, visión borrosa, desmayos, vértigo, vómitos, arcadas, graves alucinaciones con pérdida del conocimiento, bajada en la presión arterial, aumento de la temperatura corporal, fiebres, delirios, agresividad, estados sedativos similares al del coma y dolores de cabeza (02). Tetracloruro de Carbono Página 3
4 1.1 Objetivos: - Determinar el grado de hepatoxicidad y nefrotoxicidad del CCl 4 en cobayos. - Determinar el tiempo de coagulación en cobayos después de administrar CCl 4. Tetracloruro de Carbono Página 4
5 II.- MARCO TEORICO El tetracloruro de carbono es un líquido volátil transparente, incoloro, con un olor dulce característico. Es miscible con la mayor parte de los disolventes alifáticos y tiene a su vez propiedades disolventes. Se llegó a la conclusión de que puede inducir efectos embriotóxicos y embrioletales, pero sólo a dosis tóxicas para la madre, como se observó en los estudios de inhalación realizados en ratas y ratones. El tetracloruro de carbono no es teratogénico. Se han realizado numerosas valoraciones de la genotoxicidad del tetracloruro de carbono. Tomando como base los datos disponibles, se puede considerar que este producto es un compuesto no genotóxico. Induce la formación de hepatomas y carcinomas hepatocelulares en ratones y ratas. Las dosis que inducen la formación de tumores hepáticos son más elevadas que las que producen toxicidad celular. En el ser humano, los síntomas agudos tras la exposición a tetracloruro de carbono son independientes de la ruta de ingestión y se caracterizan por síntomas gastrointestinales y neurológicos, como náuseas, vómitos, dolor de cabeza, desvanecimiento, disnea y la muerte. Después de las 24 horas o más aparecen lesiones hepáticas. Son evidentes los trastornos renales con frecuencia sólo dos o tres semanas después de la intoxicación (03). Tetracloruro de Carbono Página 5
6 2.1.- TOXICOCINETICA: La vía de entrada del tóxico puede ser respiratoria, por inhalación de vapores, digestiva, o a través de la piel, concentrándose posteriormente en el tejido adiposo. Aproximadamente el 50% de la dosis absorbida se excreta a través de los pulmones sin metabolizar, y la mayor parte del otro 50% restante se metaboliza en el hígado. Tiene una vida media muy prolongada en el cuerpo (04). Su absorción lenta en el tracto gastrointestinal se ve favorecida por la presencia de aceites y grasas de origen animal o vegetal esto se debe a que las sustancias no polares que se disuelven en lípidos difunden con mayor rapidez, ya que, la membrana celular que es permeable, se encuentra constituida principalmente por fosfolípidos, y cuya permeabilidad está determinada por las características fisicoquímicas de las sustancias TOXICODINAMIA: El CCl4 ejerce su efecto tóxico al generar el radical libre altamente tóxico (CCl 3 ) por acción de oxidasas ligadas al sistema P-450 en el retículo endoplásmico, paralelamente por una reacción de reducción (vía de eliminación cloro), se formaría el CCl 2. El CCl 3 inicia la rápida peroxidación de lípidos de membrana, lo que provoca una reducción de la fluidez de la membrana la cual es esencial para preservar la función celular. Se rompen las membranas del RE, se liberan los ribosomas. Se acumulan triglicéridos al no existir síntesis de las apoproteínas necesarias para su salida del hígado. Esto se traduce en esteatosis. Por otro lado, la peroxidación de lípidos que afecta a la membrana plasmática se traduce en trastornos en el transporte de iones, ingreso masivo de agua, sodio y calcio. De manera que dependiendo de la magnitud y tiempo de la acción del tóxico las consecuencias fisiopatológicas difieren, pudiendo encontrarse esteatosis o necrosis masiva. Tetracloruro de Carbono Página 6
7 Dado lo anterior, la necrosis inducida por CCl 4 es más severa en las células centro lobulillares del hígado quienes contienen la más alta concentración de la isoenzima P-450, la cual es la responsable de la activación del CCl 4. Además, se ha observado que el daño hepático, se expresa a través de dos tipos celulares morfológicamente diferentes, necrosis balonizante y necrosis hialina, los cuales alcanzan su máximo a las 24 horas luego de administrado el tóxico (04). III.- MATERIALES Y PROCEDIMIENTO: MATERIAL: Equipos: Macroscópico. Balanza. Equipo de disección Reactivos: 2 ml de tetracloruro de carbono. 5 ml de aceite vegetal. Solución salina fisiológica Material biológico: 2 cobayos Otros materiales: Tubos de ensayo. 1 gradilla porta tubos. 2 jeringas de 5 ml. Pipetas. 2 placas Petri. Vasos de precipitación Guantes Tetracloruro de Carbono Página 7
8 3.2.- PROCEDIMIENTO: - En primer lugar se procedió a pesar a los cobayos, el peso fue de g y de g respectivamente. - En segundo lugar se le suministro al cobayo de mayor peso 0.34ml de CCl 4, y al segundo se administró 1.7ml de aceite vía oral, a ambos animales se les administro en un tiempo de 24, 48, 72 y 96 horas. - En tercer lugar se procedió a sacrificar a los cobayos en una cámara, con cloroformo por un periodo de 10 min. (Ver anexo 01) - Una vez sacrificados los cobayos se procedió a extraer los órganos a trabajar entre ellos el hígado y el riñón. ( Ver anexo 02) - Con una jeringa de 5ml se extrajo 3ml de sangre y se colocó en 3 tubos de ensayo para observar el tiempo de coagulación. ( Ver anexo 03) - Después se llevó las muestras extraídas al macroscópico para observar el daño producido por el CCl 4. ( Ver anexo 04) Tetracloruro de Carbono Página 8
9 IV.- RESULTADOS: Tabla 01: Patologías por CCl 4. Patologías Hígado Riñón Hepatomegalia - - Hígado Congestivo Cirrosis - - Edema - - Esteatosis - - Cambio de color y de estructura Fuente: Laboratorio de Toxicología I de la Uladech Trujillo. Leyenda: Alto: +++; Medio: ++; Bajo: +; Nulo: - Tabla 02: Diferencias de tiempo de coagulación. Animal de experimento Cobayo con CCl 4 Cobayo con Aceite vegetal Tiempo 1min. No coagulo. Fuente: Laboratorio de Toxicología I de la Uladech Trujillo. Tetracloruro de Carbono Página 9
10 IV.- DISCUSIÓN: Al observar la tabla 01 podemos apreciar que el daño que ocasiona el CCl 4 en el hígado es de gran consideración ya que produce cambios en la estructura y en el color; el hígado se vuelve congestivo es decir hay aumento de flujo sanguíneo lo que ocasiona hemorragias tal como se observa en el anexo 04. En la tabla 02 observamos que el tiempo de coagulación fue de 1 minuto con el Cobayo con CCl 4, sabiendo que el tiempo de coagulación normal de la sangre es de 6-10 minutos; lo que se esperaba era que el tiempo de coagulación fuera mayor de minutos demostrándose así el nivel de hemorragia observado, quizás se deba a que el cobayo no se haya expuesto por más tiempo al CCl 4 ; en comparación al Cobayo administrado con Aceite vegetal, la sangre no coagulo esto debido a muchos factores, como por ejemplo, el defecto de agregación plaquetaria, trombocitopenia (bajo conteo de plaquetas), etc. Tetracloruro de Carbono Página 10
11 V.- CONCLUSIONES: Al administrar CCl 4 en cobayos se determina que existe hepatopatías y en menor grado nefrotoxicidad; todavía es polémico que el CCl 4 tenga relación directa con el cáncer en humanos tal como lo reporta la Agencia Internacional para la Investigación sobre el Cáncer donde señalan que las personas que fueron expuestas al CCl 4 y que resultaron con cáncer tuvieron otras patologías hepáticas como por ejemplo la enfermedad de Hodgkin (05). Al administrar CCl 4 en cobayos se llegó a la conclusión que este favorece a cuadros hemorrágicos y a la prolongación del tiempo de coagulación. Tetracloruro de Carbono Página 11
12 VI.- REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1.- Scielo.sld.cu, Actividad Hepatoprotectora de las tinturas de 2 especies vegetales del género hypericum [sede web]. Cuba: instituto superior de medicina militar "dr. luis díaz soto"; 2001 [acceso 29 de setiembre de 2013]. Disponible en: wikipedia.org, tetracloruro de carbono [sede web]. [Acceso 29 de setiembre de 2013]. Disponible en: ction_id=72f ea4937&writer=rl&return_to=cloruro+de+carbono+%28iv% bvsde.paho.org, Carbon tetrachloride [sede web]. Organización panamericana de la Salud; 1999 [acceso 29 de setiembre de 2013]. Disponible en: on=lnk&backpage=/sde/opssde/bvsde/e/textoscompletos.php&label=todo_bvsde&exprsearch=tc/%28916%2 9*%28TETRACLORURO%20AND%20DE%20AND%20CARBONO% cybertesis.uach.cl, "Estudio del efecto protector y/o regenerador del aceite de Emú (Dromiceius oil) sobre el daño celular agudo inducido por tetracloruro de carbono en células hepáticas de ratas". [Sede web]. Chile: Universidad Austral de Chile; [acceso 29 de setiembre de 2013]. Disponible en: ntp.niehs.nih.gov, Carbon Tetrachloride. [Sede web]. EE.UU: National Toxicology Program; [acceso 29 de setiembre de 2013]. Disponible en: Tetracloruro de Carbono Página 12
13 VII.- ANEXOS: Anexo 01: Anestésico utilizado. Colocando al animal en la cámara Tetracloruro de Carbono Página 13
14 Anexo 02: Extracción de los órganos Anexo 03: Extracción de sangre de cobayo Tetracloruro de Carbono Página 14
15 Anexo 04: Muestras observadas Hígado congestivo y Hemorrágico Hígado sano Tetracloruro de Carbono Página 15
16 Tetracloruro de Carbono Página 16
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