Hevylite: nuevo biomarcador en el Mieloma Múltiple. Fundamentos y aportación clínica. Luisa Campos, PhD Binding Site Spain

Hevylite: nuevo biomarcador en el Mieloma Múltiple. Fundamentos y aportación clínica Luisa Campos, PhD Binding Site Spain

Hevylite: nuevo biomarcador en el Mieloma Múltiple. Fundamentos y aportación clínica Manejo de pacientes GM: Respuesta Recaída Screening PM Monitorización Diagnóstico Pronóstico

Nuevos biomarcadores de Monoclonalidad FREELITE sflc κ/λ: monoclonalidad = sensibilidad

Nuevos biomarcadores de Monoclonalidad FREELITE

FREELITE Principales beneficios 1- Elevada sensibilidad diagnostica: Ratio K/L 2- Marcador tumoral independiente con alto valor pronóstico 3- Permite evitar la interferencia del metabolismo renal de las CLL 4- Diagnostico de mieloma múltiple (asintomático) 1- Elevada sensibilidad diagnostica: Ratio Ig K/Ig L 2- Marcador tumoral independiente con alto valor pronóstico 3- Determinación de CM en co-migración o de baja concentración 4- Cuantificación de un nuevo tipo de inmunosupresión 5- Identificación precoz de recaídas 5- Identificación precoz de recaídas

Guías internacionales IMWG: seguimiento del Mieloma Múltiple For patients with measurable monoclonal protein in serum, both electrophoretic studies and quantitative immunoglobulins are recommended to assess response, although electrophoretic measurements to follow monoclonal protein are preferred. For several patients, especially with IgA or IgD myeloma, nephelometric quantitation of serum immunoglobulin is necessary. Dimopoulos et al. Consensus recommendations for standard investigative workup: report of the International Myeloma Workshop Consensus Panel 3 2011. Blood 117(18), 4701-4705.

o Proteínas monoclonales pueden co-migrar con otras proteínas séricas Hevylite elimina la subjectividad o SPE no es lineal Limitaciones de la EPS en la cuantificación de la proteina monoclonal o SPE es inexacto a niveles por debajo de 20 g/l Hevylite permite la identificación y seguimiento fiable incluso a bajas concentraciones

o Proteínas monoclonales pueden co-migrar con otras proteínas séricas Hevylite elimina la subjectividad o SPE no es lineal Limitaciones de la EPS en la cuantificación de la proteina monoclonal o SPE es inexacto a niveles por debajo de 20 g/l Hevylite permite la identificación y seguimiento fiable incluso a bajas concentraciones Katzmann et al. Clin Chem. 2011;57(12):1687-92

Limitaciones de las Igs totales Ig totales: - Cuantifica tanto la proteina monoclonal como el background policlonal. Ig total = Ig + Ig Hevylite (HLC): + ihlc: valor mucho mas cercano a la cantidad exacta de proteina monoclonal. + uhlc: una mayor supresion del par no involucrado (componente policlonal) lleva a un aumento del coeficiente HLC. Hevylite = ihlc uhlc

Limitaciones de las Igs totales IgA kappa range, 0.48 g/l-2.82 g/l; IgA lambda range, 0.36 g/l-1.98 g/l; and IgA kappa/iga lambda ratio, 0.80-2.04

Hevylite en el diagnostico de las GM MM IgG MM IgA MM IgM Cuadrados sólidos coloridos indican muestras de MM (530) Cuadrados naranja indican 4 muestras con coeficiente HLC normal y positivos para la IFE Las líneas paralelas indican el intervalo de normalidad obtenido de 130 donantes de sangre. Cuadrados sólidos indican muestras con bandas cuantificables por SPE (121/210 IgA; 42/60 IgM)) Cuadrados abiertos indican muestras que no se pudieron cuantificar por SPE porque co-migraban con otras proteínas (83/210 IgA; 16/60 IgM) Cuadrados verdes indican muestras sin proteína monoclonal reconocible en SPE (6/210 IgA; 2/60 IgM) Clinical utility and experimental sensitivity of Ig κ /g λ measurements. Harding S et al, Euromed Lab 2011

Hevylite: valor pronóstico en MM Monoclonal immunoglobulin concentrations p=0.1 Hevylite ratios - 0.01>HLCr>200 p=0.0005 338 IFM patients 338 IFM patients Un-involved immunoglobulins M-spike measurements, total IgG or IgA by nephelometry and nontumour isotype immunoparesis were not prognostic. Bradwell A, et al. Leukemia 2013; 27:202-207 338 IFM patients p=0.002

Inmunoglobulinas en Mieloma Múltiple Células plasmáticas tumorales Células plasmáticas policlonales Proteína Monoclonal IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA IgA Inmunoglobulinas Policlonales IgA = 2.75 g/l IgA = 0.25 g/l Intervalo normalidad (0.57-2.08) (0.44-2.04) HLC pair suppression

Hevylite en la monitorización

Hevylite en Monitorización Cyclophosphamide CVAMP IgG NR upper limit IFE / SPE Negative Hevylite NR no selective tumour kill IgG M-protein Total IgG IgG / IgG Hevylite Ratio Bradwell et al; Clin Chem 2009; 55 (9)

Indicación temprana de la recaída 7 meses 5 ½ meses - Después del tratamiento paciente logra CR, HLCr y FLCR normales - IFE se convierte en positivo 5,5 meses después HLCr Ludwig et al. Leukemia 2013;27(1):213-9

Hevylite en la evaluación de la respuesta

Hevylite en la Respuesta Máxima Ludwig et al; Leukemia 2012

Ludwig et al. Leukemia 2012. Epub Correlación con la supervivencia pos-tratamiento en el MM sintomático All patients Patients in PR Patients in VGPR Ratio HLC anormal en 8/31 (26%) pacientes que lograron CR y, en estudios secuenciales indicó recaída en tres pacientes antes de IFE.

Predicción del resultado clínico en la respuesta máxima (>VGPR) VGPR: M-proteína detectable por IFE suero y orina pero no SPE, o > 90% de disminución en la proteína M en suero y <100mg/24h M-proteína en orina Assessment n* Hazard Ratio p value IFE positive 32/61 1.23 0.573 >5% BMPC infiltration Abnormal FLC ratio Abnormal HLC ratio HLC chain pair suppression 32/61 0.69 0.304 36/61 1.15 0.701 28/61 1.61 0.195 16/61 2.54 0.022 No risk factors 4/61 3.73 0.205 Drayson et al. Presented at ASH 2012 Ludwig et al. at ASH 2012

Hevylite tiene una elevada sensibilidad en el MM; permite un seguimiento mas preciso de la proteína monoclonal; tiene valor pronóstico en la respuesta máxima; ayuda a identificar recaídas con precocidad Why monitor IIMM with both Freelite and Hevylite?

Clonal Tiding 1. Hevylite + Freelite permiten detectar todas las proteínas monoclonales en la recaída 2. Detección del escape de cadenas ligeras incremento de CLL monoclonales en el momento de recaída sin aumento significativo de la inmunoglobulina intacta monoclonal Zamarin et al. Bone Marrow Trans. 2013;48:419-24 Brioli et al. Blood. 2014 May 29;123(22):3414-9. 520 MM Ig Intacta 54 presentaron Escape de Cadena Ligeras

Clonal Tiding 1. Hevylite + Freelite permiten detectar todas las proteínas monoclonales en la recaída 2. Detección del escape de cadenas ligeras incremento de CLL monoclonales en el momento de recaída sin aumento significativo de la inmunoglobulina intacta monoclonal

Freelite & Hevylite En la medula ósea de un paciente con Mieloma Múltiple habrán clones produciendo: Únicamente Inmunoglobulinas intactas Únicamente cadenas ligeras libres Inmunoglobulinas Intactas y cadenas ligeras libres Freelite y Hevylite son dos biomarcadores independientes en el Mieloma Múltiple Freelite mide cadenas ligeras libres en suero (mg/l) Hevylite mide inmunoglobulinas intactas (g/l)

FLC y HLC: Marcadores de Monoclonalidad

FLC y HLC: Marcadores de Monoclonalidad SCREENING INICIAL PM: EPS, sflc y IFE * DIAGNÓSTICO: EPS y sflc, EIF, EPO y IFo HLC MONITORIZACIÓN DEL MM SUERO ORINA 24h PM diferenciable y cuantificable > 10 g/l PM difícil de medir o PM <10g/L EPO EPS; sflc periódicamente HLC; sflc IFo cuando EPO negativa EIF cuando PM negativa; sflc cuando EIF negativa (scr) * Para el cribado de AL primaria, la IFE en suero y orina de 24h sigue estando recomendada

GRACIAS!! Follow us on twitter: @BindingSiteHaem