Quito Ecuador NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN-ISO 9308-3 Primera edición 2014-01 CALIDAD DEL AGUA. DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESCHERICHIA COLI Y BACTERIAS COLIFORMES EN AGUAS SUPERFICIALES Y AGUAS RESIDUALES. PARTE 3: MÉTODO MINIATURIZADO (NÚMERO MÁS PROBABLE) POR SIEMBRA EN MEDIO LÍQUIDO (ISO 9308-3:1998, IDT) WATER QUALITY. DETECTION AND ENUMERATION OF ESCHERICHIA COLI AND COLIFORM BACTERIA IN SURFACE AND WASTE WATER. PART 3: MINIATURIZED METHOD (MOST PROBABLE NUMBER) BY INOCULATION IN LIQUID MEDIUM (ISO 9308-3:1998, IDT) Correspondencia: Esta Norma Técnica Ecuatoriana es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 9308-3:1998. DESCRIPTORES: Agua, agua superficial, usos del agua, calidad, calidad bacteriológica, contaminación del agua. ICS: 07.100.20 26 Páginas ISO 1998 Todos los derechos reservados INEN 2014
NTE INEN-ISO 9308-3 2014-01 Prólogo nacional Esta Norma Técnica Ecuatoriana NTE INEN-ISO 9308-3 es una traducción idéntica de la Norma Internacional ISO 9308-3:1998, Water quality. Detection and enumeration of Escherichia Coli and coliform bacteria in surface and waste water. Part 3: Miniaturized method (Most Probable Number) by inoculation in liquid medium, la fuente de la traducción es la norma adoptada por AENOR. El comité nacional responsable de esta Norma Técnica Ecuatoriana y de su adopción es el Comité Interno del INEN. ISO 1998 Todos los derechos reservados INEN 2014 2014-3642 i
- 5 - ISO 9308-3:1998 1 OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN Esta parte de la Norma ISO 9308 especifica un método para la detección y recuento de Escherichia coli (E. coli) en aguas superficiales y aguas residuales por siembra en medio líquido. El método es aplicable a todos los tipos de aguas superficiales y residuales y particularmente a aquellas con abundante cantidad de materias en suspensión. Este método no es adecuado para las aguas potables y para cualquier otro tipo de agua en las cuales el valor guía sea inferior a 15 en 100 ml. El método no es apropiado para la detección y recuento de otras bacterias coliformes distintas a E. coli. 2 NORMAS PARA CONSULTA Las normas que a continuación se relacionan contienen disposiciones válidas para esta Norma Internacional. En el momento de la publicación las ediciones indicadas estaban en vigor. Toda norma está sujeta a revisión por lo que las partes que basen sus acuerdos en esta Norma Internacional deben estudiar la posibilidad de aplicar la edición mas reciente de las normas indicadas a continuación. Los miembros de CEI y de ISO poseen el registro de las Normas Internacionales en vigor en cada momento. ISO 3951 Reglas y tablas de muestreo para la inspección por variables de los porcentajes de unidades defectuosas. ISO 5667-1: 1980 Calidad del agua. Muestreo. Parte 1: Guía para el diseño de los programas de muestreo. ISO 5667-2: 1991 Calidad del agua. Muestreo. Parte 2: Guía para las técnicas de muestreo. ISO 5667-3: 1994 Calidad del agua. Muestreo. Parte 3: Guía para la conservación y la manipulación de muestras. ISO 8199 Calidad del agua. Guía general para el recuento de microorganismos sobre medio de cultivo. ISO/CEI Guía 2:1996 Normalización y actividades relacionadas. Vocabulario general. 3 TÉRMINOS Y DEFINICIONES En lo que concierne a esta parte de la Norma ISO 9308, se aplicarán los términos y definiciones dadas en la Guía 2 ISO/CEI así como la definición siguiente. 3.1 Escherichia coli (E. coli). Microorganismo positivo frente a la β-d-glucoronidasa, capaz de crecer en condiciones aerobias a 44 ºC en el medio líquido especificado que contiene 4-metilumbelliferil-β-D-glucoronido (MUG). 4 FUNDAMENTO La muestra diluida se siembra en una serie de pocillos de una microplaca que contienen el medio de cultivo deshidratado. Se examinan las microplacas bajo luz ultravioleta de 366 nm, en la oscuridad, después de un período de incubación comprendido entre 36 h y 72 h a 44 ºC ± 0,5 ºC. La presencia de E. coli viene indicada por la aparición de fluorescencia azul resultante de la hidrólisis del MUG. Los resultados se dan como Número más probable (NMP) en 100 ml. 5 APARATOS Con la excepción del material que se suministra estéril, el material de vidrio debe ser esterilizado conforme a las instrucciones dadas en la Norma ISO 8199. Material de uso habitual en los laboratorios microbiológicos y, en particular, el siguiente:
INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA Documento: NTE INEN-ISO 9308-3 TÍTULO: CALIDAD DEL AGUA. DETECCIÓN Y RECUENTO DE ESCHERICHIA COLI Y BACTERIAS COLIFORMES EN AGUAS SUPERFICIALES Y AGUAS RESIDUALES. PARTE 3: MÉTODO MINIATURIZADO (NÚMERO MÁS PROBABLE) POR SIEMBRA EN MEDIO LÍQUIDO (ISO 9308-3:1998, IDT) Código: ICS 07.100.20 ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: 2013-11-25 REVISIÓN: La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficialización con el Carácter de por Resolución No. publicado en el Registro Oficial No. Fechas de consulta pública: 2013-11-27 al 2013-12-12 Fecha de iniciación del estudio: Comité Interno del INEN: Fecha de iniciación: 2013-12-13 Fecha de aprobación: 2013-12-13 Integrantes del Comité Interno: NOMBRES: Eco. Agustín Ortiz (Presidente) Ing. José Luis Pérez Ing. Paola Castillo Ing. Tatiana Briones Ing. Laura González Ing. Bolívar Cano Ing. Gonzalo Arteaga (Secretaría Técnica) INSTITUCIÓN REPRESENTADA: DIRECCION EJECUTIVA COORDINACIÓN GENERAL TÉCNICO DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN DIRECCIÓN DE VALIDACIÓN Y CERTIFICACIÓN DIRECCIÓN DE METROLOGÍA DIRECCION DE REGLAMENTACIÓN DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN Otros trámites: Compromiso Presidencial N 20549 del 08 de junio del 2013, para el fortalecimiento de normas del Instituto Ecuatoriano de Normalización INEN La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como: Voluntaria Por Resolución No. 13527 de 2013-12-20 Registro Oficial Suplemento No. 156 de 2014-01-07
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