Manual Toma de Muestras Exámenes Genéticos por PCR Infecciones Respiratorias Bioingentech Ltd. Teléfono (56)-(41)-2790435 www.labgenetico.com info@labgenetico.com
Muestras Respiratorias 1. Introducción Las infecciones respiratorias agudas comprenden numerosos cuadros clínicos, los que pueden dividirse de acuerdo a su localización en dos grupos, infecciones del tracto respiratorio agudo superior e infecciones del tracto respiratorio agudo inferior. Pueden ser causadas por distintos patógenos, los cuales varían de un cuadro a otro. Las principales bacterias involucradas son Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae y Haemophilus influenzae, en las cuales se ha visto el desarrollo de resistencia a los antibióticos de uso habitual. 2. Infecciones del tracto respiratorio superior a. Secreción de la zona nasal Evitar las gotas y los baños nasales antes de tomar la muestra. El frotis y cultivo nasal no es el cultivo para diagnóstico de sinusitis, otitis media o infecciones del tracto respiratorio inferior. Sólo se recomienda tomar cultivo de fosas nasales anteriores para la detección de portadores de Staphylococcus aureus o en lesiones nasales. Para búsqueda de hongos se recomienda la misma técnica. Colocar al paciente bajo una buena fuente de luz. Levantar la cabeza del paciente y con la otra mano introducir la tórula 1 cm en el interior de las fosas nasales, rotarla y luego retirarla e identificar de qué fosa nasal se tomó la muestra. Guantes no estériles. Tórulas estériles. Lámina de vidrio y tubo con medio de transporte. 2
b. Esputo inducido Instruir al paciente para realizar cepillado de dientes y lavado de lengua solo con agua. Realizar nebulización con solución salina normal. Para pacientes pediátricos incapaces de producir un esputo, la terapeuta respiratoria debe obtener la muestra a través de succión. Instruir al paciente para que tosa con fuerza y profundamente, con el fin de obtener una muestra que provenga del tracto respiratorio inferior, libre de saliva contenida en la cavidad oral, la cual debe expectorar directamente en un recipiente estéril de boca ancha de tapa rosca. Frasco estéril de boca ancha de tapa rosca de 5 cm de diámetro, con una capacidad de 30 a 50 ml y material fácil de rotular. Nebulizador. Solución salina normal. c. Secreción traqueal Realice el procedimiento con técnica aséptica. De acuerdo con las características de las secreciones, irrigar con solución salina normal previo a realizar el procedimiento. 3
c. Secreción traqueal Introducir la sonda sin hacer succión a través del tubo endotraqueal o cánula de traquestomía, hasta ubicarla en el espacio traqueal. Ocluya el orificio distal de la sonda y comience a succionar, retire la sonda lentamente mientras la va limpiando externamente con una gasa estéril. Tenga precaución de suspender la succión, retirando la oclusión de la sonda para que se conserve la muestra obtenida en el trayecto de la misma. Coloque la muestra obtenida en frasco estéril cortando el segmento distal de la sonda, si no es posible el depósito de la muestra sola, para lo cual retira la presión en el orificio de la sonda lo que permitirá la expulsión de la muestra en el recipiente. Guantes estériles. Mascarilla con protección ocular. Sonda de nelaton. Hoja de bisturí. d. Lavado o cepillado broncoalveolar El paciente debe estar en ayunas para realizar el procedimiento, ya que se requiere de sedación. Solución salina normal. Gasas estériles. Frasco de boca ancha estéril o trampa recolectora. A través de técnica de fibrobroncoscopia. Conecte una trampa de Lukens al fibrobroncoscopio. Irrigar con 10 ml de solución salina a través del canal abierto. Succione para obtener la muestra en dos frascos estériles de boca ancha. 4
d. Lavado o cepillado broncoalveolar Equipos de fibrobroncoscopia. Sistema de succión. Recipiente de boca ancha estéril de tapa rosca. e. Muestras obtenidas por abordaje percutáneo Son todos procedimientos médicos. Dentro de las técnicas invasivas son las que permiten la obtención de muestras más representativas del parénquima pulmonar, no obstante, sólo deben emplearse cuando fracasen otros métodos menos invasivos o cuando la situación del enfermo haga imprescindible conocer el diagnóstico etiológico. Técnica a realizar por personal entrenado. Pueden emplearse las siguientes: i. Punción pulmonar aspirativa transtorácica: Obtención del exudado de las lesiones pulmonares a través de una punción transtorácica con aguja ultrafina con control radioscópico o ecográfico. Debe aplicarse ante infiltraciones densas (no intersticiales) y sobre todo si son periféricas. Contraindicado en pacientes con bullas, trastornos de coagulación y sospecha de hidatidosis. Posibles complicaciones, como neumotórax y hemoptisis. Es una muestra ideal para estudio en infección anaerobia grave en niños, especialmente en edades tempranas. ii. Punción biópsica pulmonar: Biopsia transtorácica con trocar. Sólo en casos excepcionales y en caso de lesiones muy periféricas debido al alto riesgo de neumotórax. 5
e. Muestras obtenidas por abordaje percutáneo iii. Biopsia pulmonar por toracotomía: Permite la selección visual del área neumónica a cielo abierto. 4. Bibliografía Carlberg, D. Cleanroom microbiology for the non microbiologist. Interpharm Press. INC. Buffalo Grove, Illinois. 1995. CercenadoE, Cantón R. Procedimientos en microbiología clínica. SEIMC. España, 2007. Collins CH, Lyne PM, Grange JM. Microbiological methods. 7ma edition. Oxford 1995. Forman MS, Valsamakis A, Specimen collection, transport, and processing: Virology. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; 2003. Guerrero Gómez C; Sánchez Carrillo C. Procedimientos en microbiología clínica. Recogida, transporte y procesamientos general de las muestras en el laboratorio de microbiología, 2003. Miller JM, Holmes HT. General principles in specimen collection, transport and storage. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; 2003. Organización Mundial de la Salud. Guía para transporte seguro de sustancias infecciosas y especímenes. Ginebra (Suiza): WHO/EM- C/97.3; 1997. Thomson BR (JR.), and Miller M. Specimen collection, transport, and processing: Bacteriology. En Murray PR, Baron EJ, Jorgensen JH, Pfaller MA, Yolken RH, editors. Manual of clinical microbiology. 8th ed. Washington: ASM Press; 2003. 6