TEMA 8. COCOBACILOS Y BACILOS AEROBIOS

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1 TEMA 8. COCOBACILOS Y BACILOS AEROBIOS SE INCLUYEN DIVERSOS GÉNEROS DE INTERÉS CLÍNICO: BRUCELLA, HEAMOPHILLUS, LEGIONELLA, BORDETELLA (B. Pertussis, Parapertussis y Bronchiséptica causantes de Tosferina), BACILLUS (B. Anthracis bacilo aerobio esporulado y toxigénico que causa el Anthrax ó Carbunco, cutáneo, pulmonar e intestinal) De ellos destacamos: I. BRUCELLA II. HAEMOPHILLUS III. LEGIONELLA I. BRUCELLA CARACTERÍSTICAS El género Brucella incluye 6 especies, 4 son patógenas para el hombre: B. melitensis, B. abortus, B. suis y B. canis. La brucelosis humana no obstante es producida preferentemente por las tres primeras especies, de las cuales la mas importante esbrucella melitensis. Reservorio Acción patogena Brucella melitensis Cabra, oveja Fiebre de Malta Brucella abortus Vacuno Fiebre +leve Norte y centro de Europa Brucella suis Cerdos F.ondulante de origen porcino Son pequeños bacilos o cocobacilos Gram negativos, aerobios, Pueden disponerse de diversas formas: aislados, en acúmulos, principalmente formas aisladas y con apariencia de granos de arena. Cultivo: hay medios especiales como Agar soja tripticasa (AST), el Agar Triptosa (Medio de Ruiz Castañeda), Agar Brucella, Sistema automatizado BACTEC (hemocultivo) Brucella spp. are poorly staining, small gram-negative coccobacilli ( x um) 1

2 ACCIÓN PATÓGENA: BRUCELOSIS, FIEBRE DE MALTA ÓFIEBRE ONDULANTE Es una antropozoonosis, el ser humano se contagia a partir del animal: Vía cutánea: la bacteria penetra por una solución de continuidad en la piel. La DI (dosis infectiva) por estavía es muy baja. Vía digestiva por la ingesta de alimentos contaminados fundamentalmente leche y sus derivados. La carne menos frecuente. Excepcionalmente otras: Vía aérea por inhalación de aerosoles, vía conjuntival. Brucella consigue invadir y persistir en el interior de las células. La capacidad de multiplicación intracelular de Brucella es preferentemente en fagocitos PMN y en macrofagos del SMF. Esto se relaciona con: Posible acantonamiento y producción de Brucelosis crónica y de lesiones granulomatosas de la enfermedad. Complicaciones: osteoarticulares como artritis, orquitis, neurobrucelosis, lesiones viscerales, la principal causa de mortalidad esta en relación con la afectación de endocarditis. DIAGNÓSTICO HEMOGRAMA: frecuente moderada leucopenia. HEMOCULTIVO: En la fase aguda o presencia de fiebre casi siempre es positivo. En fase aguda y crónica el %global de positivo es de 75% aprox.. DIAGNOSTICO SEROLÓGICO Los métodos serológicos consisten en la demostración de Ac anti Brucella usando distintas técnicas. ESTRATEGIA PARA LA REALIZACIÓN DE LAS PRUEBAS SEROLÓGICAS: PRUEBA DEL ROSA DE BENGALA COMO SCREENING. SEROAGLUTINACIÓN EN CASO DE POSITIVIDAD. (DE WRIGHT) Prueba de Coombs anti-brucella en caso de títulos bajos o negativos de ésta última como en la Brucelosis crónica, detecta Ac IgG no aglutinantes. ELISA para el estudio de Ig específicas. PRUEBA ROSA BENGALA Prueba de aglutinación muy útil como prueba rápida de Screening Utiliza como antígeno una suspensión bacteriana a la que se ha añadido el colorante rosa de bengala, enfrentándola al suero sin diluir del enfermo. Muy usada en sus diferentes modalidades por permitir una aproximación diagnóstica inmediata. Elevado grado de correlación con la seroaglutinación SEROAGLUTINACIÓN Se realiza en tubos o en placa de microtitulación Se enfrentan diluciones sucesivas del suero problema con un medio que contiene Ag purificados específicos. A partir de 1/320 son patológicos, pero títulos de 1:160 junto con clínica compatible puede considerarse diagnóstica. 2

3 II. HAEMOPHILLUS El genero Haemophillus en el Bergey s incluye alrededor de unas 20 especies que se clasifican según sus necesidades, ó no, de determinados factores nutritivos en el cultivo como factores sanguíneos: El factor V, que se puede sustituir por NAD El factor X, que puede sustituirse por hematina o grupo hemo. HAEMOPHILLUS V X HEMOLISIS LOCALIZACIO N HABITUAL H. Influenzae + H. Parainfluenzae + H. Haemolyticus + H. Parahaemolyticus + H. Aegyptus + H. Ducreyi Vías respiratorias - - Vías respiratorias + + Vías respiratorias - + Vías respiratorias + - Vías respiratorias + zona ocular + + Genital Destacamos Haemophillus influenzae y Haemophillus ducreyi CARACTERÍSTICAS Son cocobacilos ó pequeños bacilos Gram negativos. Pueden tener cápsula. Las formas capsuladas desarrollan mayor patogenicidad. Para el Cultivo son muy lábiles, pierden viabilidad por calentamiento, desecación y muy exigentes. Crecen bien en medios enriquecidos con sangre (A sangre, A.Chocolate ) que contengan los factores de crecimiento que necesitan. También antibióticos para inhibir otros gérmenes. Hay medios con los requerimientos nutritivos excepto los Factores X y V que se incorporan en forma de discos para la identificación de las especies, H. Influenzae sólo crecería ría alrededor del disco que contenga ambos fact. X V (pg 5). ACCIÓN PATÓGENA DE H. INFLUENZAE ó bacilo de Pfeiffer El nombre de la especie, influenzae, se debe a que Pfeiffer lo aisló en un enfermo de gripe (Influenza).Se encuentra en nasofaringe de casi el 80% de personas sanas, pero de ellos sólo un bajo porcentaje son capsulados y de ellos, menor porcentaje son del serotipo b. 3

4 Haemophillus influenzae presenta dos formas: Forma no capsulada: Produce infecciones leves en niños y adultos como otitis media ( 2ª en los niños), sinusitis, bronquitis. Forma capsulada: En base a los polisacáridos capsulares se clasifican en 6 serotipos que se denominan con letras de a a f. El más importante es el serotipo b que produce la patología humana grave y que se nombra como Haemophillus influenzae tipo b ó Hib. Produce bacteriemia y diversos tipos de infección como: Meningitis: Puede ser la causa más frecuente en niños pequeños de 3 meses a 3-4 años Celulitis facial: área de inflamación aguda en la piel y tejido subcutáneo generalmente en la mejilla y menos frecuente en la zona peri-orbitaria Epiglotitis: Es la causa mas importante de esta infección aguda en niños hasta los 5-6 años. Cursa con fiebre, dolor faríngeo y distress respiratorio agudo Neumonía lobar, que con frecuencia afecta a pleura y pericardio con empiema ó pericarditis Agudizaciones de EPOC por ejemplo en bronquíticos crónicos Artritis séptica ACCIÓN PATÓGENA DE HAEMOPHILLUS DUCREYI Produce una enfermedad denominada Chancro Blando ó Chancroide, Enfermedad de Transmisión sexual (ETS). Se caracteriza por una úlcera genital blanda y dolorosa. Se presta a diagnóstico diferencial con la Sífilis cuyo agente etiológico es Treponema pallidum (espiroqueta) que produce también una úlcera genital perode base indurada conocida como Chancro duro ó sifilítico. El otro agente etiológico de úlceras genitales, el de mayor incidencia, es elvirus Herpes simple tipo 2 ó VHS-2 (HSV-2) y menos frecuente a nivel genital, VHS tipo 1ó VHS-1. 4

5 aetiological agents of genital ulcer disease Chancro sifilítico Chancro blando DIAGNÓSTICOHAEMOPHILLUS INFLUENZAE Tinción de Gram en la muestra o líquido afectado. En muestras clínicas, el inconveniente es que muestra un gran pleomorfismo Cultivo según la clínica. El hemocultivo es positivo en meningitis, epiglotis, la pioartritis y celulitis. También se pueden usar cultivos de muestras respiratorias y de líquidos (LCR, liquido pleural ) 5

6 DG serológico: Detección del Ag capsular b en LCR, suero o en orina concentrada Meningitis Combo Test Kit paradetección de polisacáridos capsulares (antígenos) en LCR, suero y orina. Haemophilus influezae b Streptococcus pneumoniae Streptococcus grupo B Neisseria meningitidis (A, B, C,Y, W135) Escherichia coli K1 III. LEGIONELLA El género Legionella es uno de los géneros de mas reciente identificación. La especie mas importante para el ser humano es Legionella pneumophila con diferentes serogrupos (el 1 es muy común) La enfermedad del legionario fue descrita por primera vez en 1976 después de un brote mortal de neumonía durante una convención de Legionarios ( American Legion convention) en Philadelphia, Pennsylvania. En 1977, dos científicos del Centro de Control de Enfermedades (CDC) de Atlanta (EE.UU.), Charles Sherland (un experto en lepra) y Joseph McDade (especialista en rickettsias) descubrieron y lograron aislar una bacteria que hasta entonces no había sido identificada, a la que denominaron Legionella pneumophila CARACTERÍSTICAS Es un bacilo pleomórfico. Puede presentar forma de bacilo o de cocobacilo de 2-3 micras de longitud, a veces en forma filamentosa de micras o más. Móvil, posee un flagelo. Bacilo Gram negativo débil. Se emplean técnicas de tinción más electivas como: Impregnación argéntica de Dieterle Inmunofluorescencia directa ACCIÓN PATÓGENA DE Legionella pneumophila: LEGIONELOSIS Epidemiológicamentela a legionelosis tiene RESERVORIO AMBIENTAL, INANIMADO El Reservorio y la fuente de infección principal son instalaciones como las torres de refrigeración y los condensadores de evaporación que existen en edificaciones grandes, hospitales, hoteles, en SPA s, fuentes de agua termal.. La bacteria crece e en el agua de estos circuitos. La proliferación se ve favorecida en zonas donde existen estancamientos de agua y con elevada 6

7 concentración de materia orgánica y se contamina el ambiente por el aerosol que inyectan estos sistemas.instalaciones catalogadas como de probabilidad de riesgo: Torres de refrigeración, humectadores,condensadores. Depósitos de agua consumo, acumuladores de agua caliente, duchas y grifos. Piscinas cubiertas, jacuzzis y SPA s. La legionelosis SE TRANSMITE POR LA INHALACIÓN DE AEROSOLES CON ALTAS AS CONCENTRACIONES DE LEGIONELLAy NO se transmite al beber agua. NO se transmite al ingerir alimentos. NO se transmite de persona a persona (el enfermo no es contagioso) NO se transmite de animales a personas. La legionelosis puede producir 2 cuadros clínicos: 1. Cuadro Pseudogripal ó epidemia de Pontiac Síndrome febril con escalofríos, cefalea, mialgias y sin neumonía de evolución favorable 2. Cuadro de Neumonía Atípica ó epidemia de Filadelfia ó Enfermedad de los legionarios Cursa consíndrome febril e Infección respiratoria aguda por Neumonía atípica (tos mucosa no purulenta, 20% hemoptisis, disnea, dolor torácico-pleural) Síntomas gastrointestinales: 45% y 1/3 alteración consciencia La evolución de los casos es favorable, en un 20%-30% hay insuficiencia respiratoria aguda severa y en el 15% hay hipotensión y shock séptico DIAGNÓSTICO DE Legionella pneumophila Observación directa en muestrasrespiratorias por IFD: Prueba de inmunofluorescencia directaifd ó Anticuerpos fluorescentes directos en esputo AFD. Legionella Direct Fluorescent Monoclonal Antibody Test Kits PRUEBAS DE ANTIGENURIA Detección deantígenos de Legionella en orina mediante Inmunoanálisis. Prueba más específica y sensible que IFD en esputo ó secreción respiratoria. Hay Test Inmunocromatográficos para la detección directa de Antígenos de Legionella pneumophila serogrupos 1 y 6 en muestras de orina. 7

8 CULTIVO medios selectivos comobacto Legionella agar y el BCYE-agar (Bacto-Charcoal- Yeste Extract agar) + Antibióticos Charcoal Yeast Extract agar para aislamiento de Legionella pneumophila Identificación por AGLUTINACIÓN CON ANTISUERO ESPECÍFICO CON TEST DE LÁTEX: Son Test de Látex para la identificación de microorganismos aislados en cultivo confirmando con anticuerpos específicos la presencia de Ag de Legionella pneumophila Legionella pneumophila Serogroup 1 Latex Kit Utiliza Anticuerpos monoclonales específicos contra Antígenos de superficie de Legionella pneumophila serogrupo 1. Hay Test de Látex para a diferentes serogrupos 1 a 15. MICROGEN TM Legionella 50-test kit uses latex agglutination technology Titulación en suero de Anticuerpos anti L. Pneumophila por IFI Inmunofluorescencia indirecta (Indirect Fluorescent Antibody test for Legionella pneumophilia) Bueno, pues cuidadito 8