Biotecnología de cultivo de Artemia con diferentes tipos de alimento en el Acuario de Mazatlán, Sinaloa.
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- Xavier Gallego Díaz
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1 Biotecnología de cultivo de Artemia con diferentes tipos de alimento en el Acuario de Mazatlán, Sinaloa.
2 2 Librada Sánchez-Osuna, 1 Dayna Ruiz Velazco Ramírez, 1 Ruth L. Rocha Velarde, 2 Zamora-Sarabia Francia, 1 Gildardo Izaguirr-Fierro. 1 Laboratorio de Alimento Vivo, Acuario de Mazatlán. 2 Laboratorio de Estudios Ambientales UAS-CIBNOR, Facultad de Ciencias del Mar, UAS. Correo-e: sanchezlalis@hotmail.com RESUMEN. La Artemia es un excelente alimento vivo en la acuacultura por sus características de desarrollo y alto contenido proteínico. Uno de los objetivos de esta investigación fue analizar el crecimiento de la Artemia cultivada en el Acuario Mazatlán con diferentes tipos de alimento. El cultivo de los nauplios de Artemia, se inició con 20g de quistes descapsulados en un eclosionador con agua de mar (O 2 ) por 24 horas; los nauplios se cosechan y antes de sembrar se aclimatan. La microalga Chaetoceros sp., se preparó en el medio F/2, con la cual se alimentó a los nauplios de artemia en la primera semana de cultivo y posteriormente se procedió a la combinación de diversos alimentos como: harina de arroz y levadura. En un lapso de días, se obtienen hembras y machos adultos. Esta biotecnología de cultivo de apoyo de Artemia sp., es recomendable para producir alimento vivo que permita alimentar y mantener la supervivencia y crecimiento de peces y/o de otros crustáceos, dado su alto contenido de nitrógeno proteico.
3 INTRODUCCIÓN. La Artemia, es un excelente alimento vivo en la Acuacultura por sus características de desarrollo, su pequeño tamaño en los estadios de nauplio y metanauplio, que lo hacen muy adecuado para alimentar larvas y juveniles de crustáceos y peces. El objetivo del trabajo es analizar el crecimiento de la Artemia cultivada en el Acuario Mazatlán con diferentes tipos de alimento. Una de las ventajas es la facilidad de conseguir los quistes secos inactivos (de forma bicóncavos -como balones desinflados-) en estado de criptobiosis ( durmientes miden de 200 a 300 micras de diámetro) manteniéndose así tanto tiempo como permanezcan secos. (Castro 1993). Para un cultivo, se requiere de quistes de Artemia, garrafones, microalgas, de preferencia Chaetoceros sp., mismos que se biocultivan mediante el uso del medio F/2 enriquecido en vitaminas, nitrógeno, silicio y fósforo inorgánico- y minerales. Para el cultivo inicial se utilizan nauplios de Artemia, se colocan 20 g de quistes del crustáceo, mismos que son descapsulados en un eclosionador con agua de mar con aireación por 24 horas, se cosechan y antes de sembrar se aclimatan los nauplios. La alimentación de la artemia es principalmente a base de fitoplancton para la primera semana y posteriormente, con la combinación de diversos alimentos como, harina de arroz, cebada y levadura.
4 MATERIAL Y MÉTODOS. Se recomienda la descapsulación de los quistes para evitar contaminar el agua del cultivo (Sorgeloos, et al. 1986). Para el descapsulado, se procede primero a preparar el líquido descapsulador, mismo que se elabora con la mezcla 1:1, de 150 ml de agua salada y 150 ml de Cloralex, con 3 g de hidróxido de sodio, se deja reposar por una hora para ser utilizado de inmediato, -aunque es más recomendable su uso un día después de ser preparada la solución mezcla-, con el fin de que se disuelva el hidróxido de sodio. Posteriormente, se pesan 20 g de quistes viables (Fig. 2), se procede al descapsulado en el liquido previamente preparado, se agregan los quistes (20 gr), agitando constantemente durante dos o tres minutos a partir de que se agrega la solución, hasta que se torna a un color naranja (puede variar el tiempo dependiendo de la hora del día y la temperatura). El máximo tiempo que se deja en contacto para la oxidación química de la capsula protectora de los quistes puede ser hasta 3 minutos; ya que si se excede este periodo de tiempo se pueden quemar los quistes del crustáceo inhibiendo el desarrollo embrionario y limita la eclosión del organismo. A continuación se tamiza en un tamiz de 100 micras y se enjuaga con suficiente agua dulce hasta eliminar el cloro (Fig. 4). En el laboratorio de alimento vivo del Acuario Mazatlán, primero se prepara el material (se parte un garrafón por la parte superior y se coloca invertido sobre un tramo de tubo de PVC, se tapa con un tapón de corcho, con orificio para la manguera de aireación (Fig. 1), tinas para el cultivo de la Artemia y para microalgas; las condiciones óptimas para una buena eclosión de los quistes son los siguientes: La temperatura deberá mantenerse (28 C) en el intervalo de 25 a 29 C. A temperatura por debajo de 23 C la eclosión es
5 más lenta y por encima de 32 C el metabolismo de los quistes se detiene irreversiblemente. Se recomienda mantener una temperatura constante para la eclosión. La Salinidad (33% o ) es recomendable utilizar una salinidad de entre g/l % o. El ph debe de mantenerse de entre 7 a 8. En cuanto al oxígeno disuelto, -a fin de lograr una eclosión máxima, tanto en tasa de crecimiento como en eficiencia de eclosión-, se recomienda mantener unos niveles por encima de 2 mg/l; estas variables ambientales son determinantes para mejorar el promedio de nacimientos y el tiempo de incubación. La densidad de quistes de artemia, es de 20 g de quistes por 18 L de agua de mar. Fig.1 Garrafón Fig.2. Balanza Fig. 3 Decapsulado Fig.4. Lavado de quistes. Después de unas 24 horas la membrana externa de los quistes se rompe, emergiendo el nauplio, como se observa en las fotos de la 1 a la 3, lapso que va de un día a cinco días.
6 Foto. 1 Foto.2. Foto. 3. Después de 8 días de cultivo se desarrolla la fase metanauplio (foto 4) y a los 18 días ya se tiene la fase adulta, como se muestra en la foto 5, estadio en el cual aparece el dimorfismo sexual, es decir las hembras con su ovisaco y un macho adulto con antenas desarrolladas.. Foto.4 Foto 5. Tabla 1. Preparación del agua clorada, fertilizada y la microalga. Agua filtrada agua clorada Fertilizar Microalga 1,500 litros Por tina 300ml. cloro Air. 24 h. elim. el cloro: 30gr. tiosulfato, 2h aireación. Agregar al agua 30ml de Bayfolan en 1,500 lt. Chaetocera 3mill/ml. 80 lt. Air. 2 días, Sembrar Nauplio
7 Procedimiento para la eclosión de nauplio: para el cultivo de los nauplios de Artemia, se colocan 20 g de quistes descapsulados en un eclosionador (Fig 1), provisto de agua de mar clorada, con aireación constante por 24 horas, se cosechan los nauplios colocando luz,-por sus características de fototropismo positivo-, separando los coriones de los nauplios. Antes de sembrar los nauplios, son aclimatados. La alimentación, es a base de fitoplancton para la primera semana y posteriormente, con la combinación de diversos alimentos como harina de arroz, cebada y levadura sifoneando los desechos y bajando los niveles de agua de cultivo, para hacer un recambio de entre el 30 al 50%-, que a continuación se describen por etapas, la primera refrente a sembrado de nauplio y la segunda la preparación de alimentos. Recomendaciones sugeridas para el sembrado y cultivo de nauplio: en las tinas previamente preparadas (tabla 1) se procede a agregar los nauplios (de un día de nacidos), se mide la temperatura del agua del biocultivo y del agua de la cubeta con los nauplios a sembrar y se procede a aclimatar los nauplios; el método que se usó fue el siguiente. Sse introduce la cubeta en la tina, se le va agregando poco a poco agua de la misma tina, hasta que tienen la misma temperatura midiéndola con un termómetro. Se vacía la cubeta en la tina cuidadosamente para una amplia distribución de los organismos. El primer estadio larvario es nauplio I, mide entre 400 y 500 micras de longitud, tiene un color pardo anaranjado (foto 1) y posee tres pares de apéndices: el primer par de antenas (también llamadas anténulas y que tienen una función sensorial), el segundo par de antenas (con función locomotora y filtradora) y las mandíbulas (con una función de toma de alimento). Un único ocelo de color rojo también llamado ojo
8 nauplial, se encuentra situado en la cabeza entre el primer par de antenas (foto 2). La larva continúa su crecimiento apareciendo diferenciaciones (foto 3, cinco días) a lo largo de las 15 mudas. Metanauplio: periodo más largo de la fase larval, en el que desarrolla los toracópodos, lo que permite diferenciarlos de la fase anterior, además del tamaño que alcanzan -2 a 3 mm-, (foto 4). Preadulto: estadio en el que se manifiesta el dimorfismo sexual, especialmente por la forma que adoptan las antenas. En los machos, como ya se describió, adoptan la forma de tenazas y en la hembra la forma de hoja bastante pequeña. Adulto: su cuerpo está dividido en tres partes diferenciadas: cabeza tórax abdomen. En este estadio, se observa un claro dimorfismo sexual, donde los animales alcanzan su madurez sexual; lo cual, es fácilmente advertido con el comportamiento pre-copulativo, en el que el macho se adhiere (abraza) a la hembra fuertemente, nadando juntos (pegados). El macho (foto 5 a) posee un par de piezas prensiles musculadas muy características (segundo par de antenas) en la región cefálica mientras que en la parte posterior del tórax se puede observar un par de penes. La hembra de Artemia, no tiene apéndices distintivos en la región cefálica, pero puede ser fácilmente reconocida por el saco de puesta o útero que está situado inmediatamente detrás del undécimo par de toracópodos. La hembra presenta en la región abdominal al lado del tubo digestivo, unas bolsitas donde desarrollan los huevos. Los adultos de Artemia miden hasta 10 mm de longitud en las poblaciones bisexuales y hasta 20 mm en las poblaciones partenogenéticas. Los adultos se caracterizan por un cuerpo alargado con dos ojos complejos pedunculados, un aparato digestivo líneal, unas
9 anténulas sensoriales y 11 pares de toracópodos funcionales (Fotos 5). La precópula de los adultos, se inicia cuando el macho sujeta a la hembra entre el útero y el último par de toracópodos, con sus antenas curvadas. Las parejas pueden nadar de esta forma durante largo tiempo en lo que se conoce como posición de monta, para lo cual mueven sus toracópodos de forma sincrónica.(castro et al 1989). Preparación del alimento. Preparación de la harina de arroz: 500 g de harina de arroz, se licua en un litro de agua y se afora a 10 litros de agua de mar, se tamiza y de esta, se alimenta agregando 2 litros por tina (1,500 litros) solo agregar a larvas de 8 días metanauplio, por la tarde y por la mañana fitoplancton). Recomendación para preparar levadura: 50 g de levadura licuada en agua, aforada a cinco litros de agua y se agregan 500 ml de esta solución a cada tina (sólo se agrega a los juveniles adulto por la tarde). Tizol (1994), recomienda que el uso de la levadura sea a partir del séptimo día de preparación con una concentración en el medio a 3 g/l/día, hasta la cosecha. RESULTADOS.
10 Con base en la técnica propuesta se puede llegar a cultivar 20 millones de nauplios con excelentes resultados, en un lapso de biocultivo de 14 a 22 días el organismo alcanza su madurez como adultos, dependiendo de la temperatura del cultivo. CONCLUSIONES. Se realizó el cultivo de Artemia con diferentes alimentos, este biocultivo descrito, es recomendable. La base de manejo del mismo radica en la calidad del agua, calidad de microalgas, quistes viables, y condiciones ambientales en los intervalos óptimos. Se logran producir las Artemias, ya sea para producción en estadio de nauplio y adultos, sin problemas para alimentar otros organismos, es importante cuidar las rutinas, alimentación en cantidades adecuadas y recambios de agua; para que no se produzcan hongos o bacterias, mismos que pueden ser controlados con formalina. Se concluye que el biocultivo de Artemia, en el laboratorio de alimento vivo en Acuario de Mazatlán como cultivo de apoyo en acuacultura, provee un alimento con alto valor proteico para peceras, cultivo de larvas de camarón y cultivo de caballito de mar, mismo que se ha utilizado por varios ciclos con óptimos resultados, bajo costo y eficiencia de producción del 80%.
11 Bibliografía. Tizol C. R. (1994) Uso de la levadura torula (torulopsis utilis) en la obtención de biomasa de Artemia, Centro de Investigaciones Pesqueras, Subdirección de Maricultivo, Barlovento, Santa Fé. La Habana, CUBA. bol. invemar vol.23 no.1 Santa Marta Jan./Dec. Castro, M.G., M.J. Castro, A.R. De Lara, R.C. Gallardo, O.I. Salazar & B. Sánchez Características biométricas generales, modo de reproducción y aislamiento reproductivo de la población silvestre de Artemia sp. de las Salinas de Hidalgo, San Luis Potosí. Rev. Latin. Acui. 39: Castro, B.T Biología y cultivo de Artemia franciscana en el Ex - lago de Texcoco, de Ecatepec, Estado de México. Tesis doctoral, Universidad Nacional Autónoma de México, México. 72 p. Sorgeloos, P.; P. Lavene; P. Leger; W. Tackaert y D. Versichele. (1986). Manual para el cultivo y uso de la Artemia en la acuicultura. FAO Documento de Campo, 10:
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