DIAGNOSTICO DE LA RABIA POR LABORATORIO MVZ DANTE SILVA AGUILAR

Transcripción

1 DIAGNOSTICO DE LA RABIA POR LABORATORIO MVZ DANTE SILVA AGUILAR AGOSTO DEL 2010

2 HISTORIA DE LA RABIA En la cultura de Mesopotanea, Babilonia y Egipto se describe perros locos

3 HISTORIA DE LA RABIA Pasteur publicó su primer informe sobre rabia en 1881 En 1884, un año de mucha rabia en Francia, y da a conocer sus avances. En 1885, la vacuna de la rabia fue probada

4 HISTORIA DE LA RABIA 6 de Julio de 1885 Niño Joseph Meister de 9 años, mordido 14 veces perro rabioso Se hicieron 13 inoculaciones sucesivas con medulas de virulencia progresiva El niño nunca desarrolló rabia

5 QUE ES LA RABIA? UNA ZOONOSIS La RABIA es un enfermedad causada por un virus. Este virus se encuentra en la saliva de los animales como el perro y el gato cuando están enfermos. Está presente también en otros animales que puede enfermarse como los murciélagos, zorros, zorrillo, lobos mapaches y coyotes.

6 CICLO DE TRANSMISION DE LA RABIA URBANA

7 CICLO DE TRANSMISION DE LA RABIA EN FAUNA SILVESTRE POBLACION SUCEPTIBLE A LA RABIA

8 CICLO DE TRANSMISION DE LA RABIA AEREA

9 RABIA EN ROEDORES

10 NOM-011-SSA Perros o gatos agresor sometido a observación durante 10 días a partir de la fecha de agresión, y observar Cambios de conducta retraimiento Excitación y agresividad Fotofobia y anisocoria Parálisis faríngea progresiva Dificultad en la deglución Incoordinación de movimientos Postración Muerte LITOGRAFIA DE PERRO CON RABIA

11 SIGNOS DE LA ENFERMEDAD EN CANINOS Se presenta en 4 fases: Fase prodrómica 2-3 días Fase excitativa 3-5 días Fase paralítica 2-3 días Muerte.

12 NOM-011-SSA ENERO 1995 En las especies domésticas generalmente se presenta datos clínicos de rabia paralítica Pelo erizado Somnolencia Secreción nasal Temblores musculares Inquietud Hipersensibilidad en el sitio de lesión Dificultad en la deglución Falta de rumia Parálisis de las extremidades posteriores Muerte

13 NOM-011-SSA En el humano con la presentación de: Cefalea Fiebre Dolor radial en la agresión Angustia Hidrofobia Parálisis Salivación excesiva Delirio Convulsiones Muerte

14 PATOGENIA DE LA RABIA EL VIRUS SE TRANSPORTA CENTRIPETAMENTE A TRAVES DE LOS CORDONES NERVIOSOS, SE HA COMPROBADO EXPERIMENTALMENTE QUE AVANZA 3 mm POR HORA

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16 BIOLOGIA MOLECULAR VIRUS RABICO Posee 5 proteínas: Proteína L 190 kda Proteína G kda Nucleoproteína N kda Fosfoproteína Ns kda Proteína Matrix M kda Rhabdoviridae

17 METODOS DE DIAGNOSTICO INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA PRUEBA BIOLOGICA IFD HISTOLOGIA REACCION EN CADENA POLIMERASA PCR ANTICUERPOS NEUTRALIZACION ELISA

18 TOMA Y ENVIO DE MUESTRAS CADAVER CABEZA DEL ANIMAL SOSPECHOSO MUESTRAS FRESCAS, REFRIGERADAS O CONGELADAS SOL. GLICERINA 50% + SOL. FOSFATASA TODAS MUESTRAS ACOMPAÑADAS DEL HISTORIA CLINICO

19 HOJA CLINICA FECHA TELEFONOS NOMBRE DE AGREDIDO O PROPIETARIO DIRECCION MUNICIPIO ESPECIE RAZA EDAD SEXO VACUNACION PREVIA COMO MURIO? ARMA DE FUEGO FECHA Nº DE AGREDIDOS ZONA DEL CUERPO AFECTADA DATOS CLINICOS DEL ANIMAL AGRESIVIDAD DEGLUTACION DIFICIL TIMIDEZ MANDIBULAS TRABADAS CONVULSIONES LAGAÑA ANOREXIA MUERTE SUBITA RESPONSABLE

20 REQUISITOS DE UN BUEN RESULTADO POR INMUNOFLUORESCENCIA BUENA CALIDAD DE LA MUESTRA CONDICIONES ACEPTABLES DE TRANSPORTE DE LA MUESTRA OBTENCION DEL RESULTADO EN EL TIEMPO ESTABLECIDO DIFUSION DEL RESULTADO

21 METODO DE INMUNOFLUORESCENCIA

22 DIAGNOSTICO EN EL LABORATORIO EL DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE LA RABIA EN UN ANIMAL, PERMITE EL INICIO O LA INTERRUPCION DEL TRATAMIENTO ANTIRRABICO EN UNA PERSONA. O EN SU CASO EL DETERMINAR LAS MEDIDAS NECESARIAS PARA LA PREVENCION Y CONTROL EN LA ESPECIE AFECTADA

23 QUE ES LA INMUNOFLUORESCENCIA? LA INMUNOFLUORESCENCIA (IF) ES LA PARTE DE LA MICROSCOPIA DE FLORESCENCIA QUE ABARCA EL CAMPO DE LA COMPROBACION ESPECIFICA DE AGENTES PATOGENOS (Ag) MEDIANTE INMUNORREACCIONES (Ab)

24 MICROSCOPIO DE EPIFLUORESCENCIA MICROSCOPICO COMPUESTO FUENTE DE LUZ FLUORESCENTE

25 CONJUGADO: + = FLUOROCROMO (ITCF) Ac Ac Ag rábico IFD (+) = + = Ac Ac Ag rábico LUZ UV Ac Ag rábico IFD (-) = + = No IF FUNDAMENTO DE LA PRUEBA INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA

26 EQUIPO DE PROTECCION

27 EXTRACCION DE ENCEFALO

28 EXTRACCION DE ENCEFALO

29 ESTRUCTURA DEL ENCEFALO CANINO CEREBELO CORTEZA MEDULA OBLONGA HIPOCAMPO

30 HIPOCAMPO o ASTA DE AMON CONTROL POSITIVO CVS CRN MUESTRA SOSPECHOSA PREPARACION DE MUESTRAS

31 SITIOS DE PREPARACION DE IMPROTAS POR CADA ESPECIE ASTA DE AMMON, CEREBELO, CORTEZA, MEDULA OBLONGA CORTEZA, CEREBELO MEDULA OBLONGA CEREBELO, ASTA DE AMMON, BULBO OLFATORIO IMPRONTA TRASVERSAL DEL ENCEFALO CEREBELO, CORTEZA, CORNEAS, CUERO CABELLUDO O SALIVA

32 MATERIAL PARA EL DIAGNOSTICO IFD Porta y cubreobjetos Caja de copplin Abatelenguas de madera Jeringas de insulina Pinzas y tijeras Estufa bacteriológica a 37ºC Cámara húmeda Microscopio de luz ultravioleta 490 nm Equipo de protección obligatorio, guantes, gafas cubre bocas

33 REACTIVOS ESPECIFICOS FLUOROCROMO CONJUGADO CRN Cerebro de ratón normal CVS Virus estandar de confrontación subtipo 1 ACETONA AGUA DESTILADA SOLUCION FOSFATADA BUFERADA ACEITE DE INMERSION AMORTIGUADA

34 PREPARACION DE LAS MUESTRAS Marcar las laminillas NOM-056-ZOO-1995 Hacer cortes del cerebelo, asta de Ammon, corteza cerebral o bulbo respiratorio Realizar dos improntas en los cortes del cerebro Con papel absorbente secar las improntas En el vaso de copplin con acetona 30 minutos en congelación Agregar el conjugado CVS y CRN

35 PREPARACION DE IMPRONTAS

36 PREPARACION DE IMPRONTAS

37 PREPARACION DE IMPRONTAS

38 UNION ANTIGENO - ANTICUERPO

39 CRITERIOS DE LECTURA CORPUSCULOS DE COLOR VERDE MANZANA. INTENSIDAD DE FLUORESCENCIA. EL CONTRASTE DE LA TINCION. POLVO ANTIGENICO. POSITIVO O NEGATIVO

40 CONSERVACION DE LAS MUESTRAS LAS MUESTRAS SE CONSERVAN EN CONGELACION A -20ºC. TIEMPO DE RETENCION DE 3 MESES. DISPOSICION EN EL MANEJO DE R.P.B.I

41 DIRECCION LABORATORIO DE PATOLOGIA ANIMAL DE MORELIA AV. ACUEDUCTO 1093 Col. MATAMOROS C.P TEL/FAX

42 GRACIAS!!!!