REACCIONES ANTÍGENO ANTICUERPO

Transcripción

1 REACCIONES ANTÍGENO ANTICUERPO

2 CONCEPTO DE ANTÍGENO Características de los determinantes antigénicos Concepto Inmunopotencia Inmunodominancia Determinantes inmunogénicos y hapténicos Inmunogenicidad: Carácter extraño al organismo: XenoAg (distinta especie), AloAg(misma especie) Antigenicidad Especificidad

3 CONCEPTO DE ANTICUERPO Origen de los anticuerpos Estructura de las inmunoglobulinas: cadenas ligeras (L) y pesadas (H). Regiones C y V Tipos de Inmunoglobulinas: IgG, IgA, IgM, IgD, IgE. Propiedades biológicas

4 REACCIONES DE INMUNOPRECIPITACION CARACTERISTICAS: * Ag solubles * Ac de clase IgG * Reacción poco sensible * Reacción muy específica * Intervienen Ac policlonales frente a Ag polivalentes

5 REACCIONES DE INMUNOPRECIPITACION MODALIDADES: * INMUNOPRECIPITACION SIMPLE EN TUBO * INMUNODIFUSION O INMUNOPRECIPITACION EN MEDIO SOLIDO - Inmunodifusion simple: En tubo (Oudin) En placa o radial (Mancini) - Inmunodifusión doble en placa (Ouchterlony) - Inmunoelectroforesis (Grabar y Williams) - Contrainmunoelectroforesis - Inmunoelectroforesis en "cohete" (Rocket y Laurel) - Inmunoelectroforesis bidimensional

6 Ag Suero pac. Ag Suero pac. Diagnóstico serológico de las infecciones fúngicas. Contrainmunoelectroforesis frente Ag somático Candida albicans. Ag hidatídico Suero paciente Diagnóstico serológico hidatidosis. Inmunoelectroforesis frente a Ag hidatídico.

7 REACCIONES DE AGLUTINACION CARACTERISTICAS: * Ag particulados generalmente poliantigénicos * Ac de clase IgM e IgG * Reacción con Ag superficiales * Reacción bastante sensible * Reacción relativamente específica (depende de comunidad Ag) - Reacciones cruzadas * Intervienen Ac policlonales frente a Ag polivalentes

8 REACCIONES DE AGLUTINACION MODALIDADES: * AGLUTINACION DIRECTA - Cualitativa / Cuantitativa - En tubo / En porta * AGLUTINACION CRUZADA * AGLUTINACION PASIVA - Prueba de Coombs directa e indirecta. Ac no aglutinantes - Hemaglutinación pasiva o indirecta - Pruebas de látex, bentonita, carbón, etc - Pruebas de coaglutinación

9 Pacientes Dilución 1/20 1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280 Testigo 20/05/07 04/06/07 06/06/07 Diagnóstico serológico de tularemia. Microaglutinación de Francisella tularensis. Evolución serológica de dos pacientes 12/06/07 17/01/07 23/01/07 25/01/07 13/04/07 Dilución Testigo 1/20 1/40 1/80 Pacientes A B C D E F G H I J K L Diagnóstico serológico de hidatidosis. Aglutinación pasiva de hematíes de cordero revestidos con Ag hidatídico. 1/160 1/320 1/640 1/1280 1/2560

10 REACCION DE FIJACION DEL COMPLEMENTO REACCION POSITIVA Ag y Ac se corresponden se consume el complemento Hemolisina + hematies No lisis por no haber C REACCION NEGATIVA Ag y Ac NO se corresponden NO se consume el C Hemolisina + hematies LISIS al unir el C no consumido

11 REACCIONES Ag-Ac Inmunofluorescencia, enzimoinmunoensayo, radioinmunoensayo IF EIA RIA CONJUGADO Fluorocromo Enzima + sustrato Radioisotopo (I 125 ) DETECTOR Microscopio Fluorescencia Espectrofot. Colorímetro Fluorímetro Contador gamma SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD (depende Ag) MODALIDADES Directa (Ag) Indirecta (Ac) Directo (Ag muestras) Indirecto (Ac) Sandwich (Ag) Captura (Ac) (depende Ag) Directo (Ag muestras) Indirecto (Ac) Sandwich (Ag) Captura (Ac

12 IF-EIA-RIA DIRECTO EIA-RIA CAPTURA IF-EIA-RIA INDIRECTO 1ª INCUBACION EIA RIA SANDWICH 2ª INCUBACION REVELADO (EIA)

13 ANTÍGENOS RECOMBINANTES: Concepto Características Utilidad en el diagnóstico ANTICUERPOS MONOCLONALES Concepto Características Utilidad en el diagnóstico

14 UTILIDAD: TECNICAS SEROLÓGICAS * Investigación de anticuerpos (Medicina y veterinaria) - Contacto previo con un Ag (IgG, A, M, E) - Inmunidad protectora (IgG) - Diagnóstico de enfermedad actual o reciente (IgM) * Investigación de antígenos - Serotipado microbiano - Detección de Ag microbianos en productos - Detección de productos microbianos en cultivos (Vgr cultivos víricos) (Diagnóstico directo) - Investigación básica y en Biología Molecular - Medicina Forense - Alimentación etc.