IDENTIFICACIÓN Y MEDICIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE

Transcripción

1 IDENTIFICACIÓN Y MEDICIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE

2 DESCRIPCIÓN DE UNA ENFERMEDAD INFECCIOSA 1. Nombre y sinonimia 2. Definición 3. Epidemiología 4. Etiología 5. Patogenia 6. Signos y síntomas 7. Lesiones 8. Diagnóstico 9. Tratamiento 10. Profilaxis

3 Modelo de descripción de una enfermedad 1. Nombre: RABIA Sinonimia: lisa, hidrofobia 2. Definición: enfermedad infecciosa, contagiosa y mortal que afecta el sistema nervioso de los animales de sangre caliente incluido el hombre (zoonosis)

4 3. Epidemiología: se presenta en todos los continentes excepto parte de Oceanía existen países libres: Uruguay en América, España en Europa y los de carácter insular en los países infectados no hay distribución uniforme

5 Se distinguen 2 ciclos: URBANA: mayoría de casos humanos por mordedura de perros y gatos SELVÁTICA: en animales silvestres los reservorios y vectores dependen de la región. En América son los murciélagos

6 4. Etiología Familia: Rhabdoviridae Género: Lyssavirus. Genoma ARN Tiene forma de bala VIRUS RÁBICO * VIRUS CALLE * VIRUS FIJO Virus aislado de animales y que no sufrió modificaciones en laboratorio Cepas adaptadas a animales de laboratorio por pasajes

7 4. Patogenia MORDEDURA CON VIRUS RÁBICO Axoplasma de nervios periféricos VÍA CENTRÍPETA Glándulas salivales Ovarios Testículos Riñones Adrenales Otros órganos y tejidos SNC VÍA CENTRÍFUGA

8 6. Signos y síntomas Período de incubación: 10 días a 2 meses Período de evolución: 7 a 10 días Períodos PRODROMO EXCITATORIO PARALÍTICO

9 7. Lesiones El animal presenta lesiones en todo el cuerpo debido principalmente a daños inflingidos por él mismo durante la etapa de furia 8. Tratamiento No hay. Ante la presunción de rabia debe sacrificarse al animal y enviar la cabeza al centro antirrábico para realizar el diagnóstico lo antes posible.

10 9. Profilaxis v Vacunar a todos los perros y gatos a partir de los 3 meses de vida una vez al año vrealizar observación veterinaria a animales mordedores por el término de 10 días vvacunar el ganado en áreas expuestas y reducir la población de vampiros v Advertir e instruir a la población sobre el contagio producido a partir de animales silvestres y murciélagos

11 RESPUESTA INMUNE HUMORAL SEROLOGÍA suero estudio Ciencia de la detección de anticuerpos Medición de las interacciones Ag - Ac, con fines diagnósticos, a partir del suero de un animal.

12 Sensibilidad Capacidad de una prueba para detectar animales enfermos (VERDADEROS POSITIVOS) en una población enferma. Ejs. BPA-ELISA-WESTERN BLOTTING-INMUNOFLUORESCENCIA Especificidad Capacidad de una prueba para detectar animales sanos (VERDADEROS NEGATIVOS) en una población sana. Ejs. IDGA- WESTERN BLOTTING

13 Animal ENFERMO SANO Prueba + - Positivo verdadero Falso negativo Falso positivo Negativo verdadero

14 CLASIFICACIÓN DE PRUEBAS PARA MEDIR LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL 1. PRIMARIAS Miden la cantidad de complejo Ag-Ac formado 2. SECUNDARIAS Miden las consecuencias de la unión Ag-Ac in vitro 3. TERCIARIAS Miden las consecuencias o el efecto protector de anticuerpos en el animal (in vivo)

15 PRUEBAS PRIMARIAS v Pruebas INMUNOENZIMÁTICAS: - ELISA - Western blotting v Pruebas de INMUNOFLUORESCENCIA: - Directa - Indirecta - Citometría de flujo v RADIOINMUNOENSAYO

16 PRUEBAS INMUNOENZIMÁTICAS ELISA Fundamento: visualización de la cantidad de Ag-Ac formado a través de marcadores ligados a enzimas, que en presencia del sustrato específico, producen una reacción colorimétrica. ENZIMAS UTILIZADAS PEROXIDASA Fosfatasa alcalina SUSTRATO ortofenildiamina paranitrofenilfosfato

17 ELISA Tipos de pruebas INDIRECTA SANDWICH COMPETICIÓN detección de ANTICUERPO detección de ANTÍGENO detección de ANTICUERPO

18 ELISA INDIRECTO Lavado Lavado Lavado ANTÍGENO adsorbido (reactivo) Suero PROBLEMA ANTIGLOBULINA marcada con ENZIMA (reactivo) SUSTRATO de la enzima (reactivo) Detección de ANTICUERPOS CAMBIO DE COLOR

19 ELISA COMPETICIÓN COLOR N E G A T I V O P O S I T I V O Antígeno Lavado Lavado Lavado Lavado Suero Problema Y Ac monoclonal Y Conj. con enzima peroxidasa Y Lavado Lavado Lavado Lavado Sustrato cromógeno Y AUSENCIA DE COLOR

20 VENTAJAS DESVENTAJAS ELISA Alta sensibilidad y especificidad Rápido Reactivos estables Resultado visual Costo microplacas Costo equipo automatización APLICACIONES EN VETERINARIA Brucelosis IBR Bia Leucemia felina Babesia Trichinella Cuantificación de inmunoglobulinas BVD Salmonella Toxoplasma Peste porcina Aftosa Toxocara Aujesky Estreptococos Hormonas Newcastle TBC Micotoxinas

21 INMUNOFLUORESCENCIA Fundamento: visualización de la cantidad de Ag-Ac formado a través de colorantes fluorescentes utilizados como marcadores COLORANTE UTILIZADO: ISOTIOCIANATO DE FLUORESCEÍNA (FITC)

22 INMUNOFLUORESCENCIA Tipos de pruebas DIRECTA INDIRECTA CITOMETRÍA DE FLUJO detección de ANTÍGENO detección de ANTICUERPO detección de ANTÍGENO

23 INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA 1. Corte o impronta (Ag desconocido) 3. Anticuerpo conjugado con FITC (reactivo) Incubación 5. OBSERVACIÓN Microscopio fondo oscuro-luz UV 2. Fijado con acetona 4. Lavado

24 INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA 2. Suero problema 4. Antiglobulina conjugada con FITC (reactivo) 6. OBSERVACIÓN Microscopio fondo oscuro-luz UV 1. Extendido de cultivo celular 3. Lavado 5. Lavado

25 INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA e INDIRECTA VENTAJAS alta sensibilidad rápida, sencilla evidencia de Ag intracelulares reactivos estables DESVENTAJAS costo equipo lectura subjetiva APLICACIONES EN VETERINARIA DIRECTA RABIA CAMPYLOBACTER LISTERIA CLOSTRIDIUM MICOBACTERIUM INDIRECTA ViLeF DISTEMPER IBR LEUCOSIS RABIA