MINISTERIO DE EDUCACIÓN SUPERIOR UNIVERSIDAD DE GRANMA FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA CENTRO DE ESTUDIOS DE PRODUCCIÓN ANIMAL

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1 MINISTERIO DE EDUCACIÓN SUPERIOR UNIVERSIDAD DE GRANMA FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA CENTRO DE ESTUDIOS DE PRODUCCIÓN ANIMAL Efecto del polvo de hojas de Psidium guajava, Anacardium occidentale, Morinda citrifolia y Moringa oleífera como aditivo fitoquímico en gallinas ponedoras Autores: Román Rodríguez Bertot; Guillermo Ernesto Pupo Torres; Osmani Rosabal Nava. Yordan Martínez Aguilar; Carlos Olmo González; Roisbel Aroche Ginarte; Danis Verdecia; José A. Labrada Santo y Norbelio Aguilar. * rrodriguezb@udg.co.cu

2 Antibióticos como aditivos + 50 años Aumenta el número de cepas resistentes Transfieren resistencias cruzadas a otros microorganismos Alternativas actuales al uso de los antibióticos Productos naturales (Avicultura) alimentos funcionales o nutracéuticos como prebióticos, probióticos, enriquecidos y extractos de plantas con el objetivo de mejorar el estado de salud, disminuir los microorganismos patógenos y modular una mejor respuesta inmunitaria Los aditivos de plantas (1200 clases de compuestos secundarios) Seguridad de su inclusión y su nula residualidad Beneficios de los polvos de plantas medicinales Incremento de la digestibilidad de nutrientes en el tracto-gastrointestinal (TGI), Estabilidad inmunológica. Exclusión competitiva de microorganismos que favorece la salud intestinal en aves aparentemente normales y expuestas a diferentes estrés.

3 Las aves poseen baja inmunidad específica, alta presencia de bacterias patógenas latentes y altos requerimientos nutricionales. OBJETIVO Evaluar el efecto del polvo de hojas de Psidium guajava, Anacardium occidentale, Morinda citrifolia y Moringa oleífera como aditivo fitoquímico en el comportamiento productivo y calidad del huevo de gallinas ponedoras en pico máximo de puesta.

4 Centro de Estudio de Química Aplicada (CEQA) de la Facultad de Ciencias Técnicas perteneciente a la Universidad de Granma, Cuba Hojas de plantas de Psidium guajava, Anacardium occidentale, Morinda citrifolia y Moringa oleífera Suelo: Pardo carbonado. Para la recolección de las hojas se tuvo en cuenta la diversidad del tamaño y la estructura (Martínez et al. 2012). Muestras Secadas a temperatura ambiente(72 horas) Estufa: Temperatura- 65 C Tiempo-1h Molino de cuchillas paralelas (Tamaño de partícula 1mm) Las muestras fueron almacenadas a temperatura ambiente en bolsas de plástico herméticas (Yin et al. 1993).

5 Tamizaje fitoquímico Sandoval y Suárez (1990), Payo (2001) y Peña (2002). Balanza (SARTORIUS) Extracciones sucesivas y tamizaje fitoquímico Ensayo de Resinas. Ensayo de Liebermann- Burchard (triterpenos y/o esteroides). Ensayo de Espuma (saponinas). Ensayo de Ninhidrina (aminoácidos libres). Ensayo de Dragendorff y Mayer (alcaloides). Ensayo de Baljet (coumarinas). Ensayo de Fehling (carbohidratos reductores). Ensayo de Cloruro férrico (fenoles y/o taninos). Ensayo de Borntrager (quinonas). Ensayo de Shinoda (flavonoides). Ensayo de antocianidinas.

6 Ubicación experimental Antonio Maceo Total 160 aves (27 semanas) 1 Las dietas se formularon a base de maíz y torta de soya UECAN (2011). Tres niveles de adición (0.5%,1%y1.5%) de polvo de hojas de 2 Psidium guajava, Anacardium occidentale, Morinda citrifolia y Moringa oleífera, en la fase I de puesta (Martínez et al., 2011 y Martínez y Martínez, 2012).

7 Experimento II. Productividad y calidad del huevo de gallinas ponedoras alimentadas con adiciones de Psidium guajava, Anacardium occidentale, Morinda citrifolia y Moringa oleifera White Leghorn Jaulas indiv. 40x40 cm Diseño completamente aleatorizado 4 aves x hueco y 10 repeticiones (4 aves 1 unidad experimental) 10 semanas a partir de la 27 Peso huevo, Superficie de la cáscara, Altura de la yema, UH y Color de la yema, grosor de la cáscara. Dietas Dieta control (Maíz Soya) Adición de 0; 0.5; 1.0 y 1.5 % de polvo de hojas de P. guajava y A. occidentale, en la fase I de puesta Análisis Estadístico ANAVA Duncan (1955) SPSS vs 12.1 Variables Peso del huevo % de Puesta Conversión Masal (kg/kg) Consumo de Alimentos (Diario) Huevos Rotos Huevos en Fárfara Huevos Cascados, PVI, PVF Calidad (Villa 2001) Parámetros

8 Pesos inicial y final. Peso del huevo (semanalmente a 20 huevos/tratamiento) entre las 8:30 a 9:30 a.m. Consumo alimento y de aditivo (diariamente) por el método de oferta y rechazo.

9 Intensidad de puesta :se asumió como 100% un huevo/día/ave. Conversión masal, se calculó teniendo en cuenta el alimento consumido, peso del huevo por repetición y el número de huevos puestos. Viabilidad: Se computó finalizar el experimento.

10 Indicadores de calidad externa e interna Altura de la clara densa Altura de la yema Color de la yema Peso del Huevo Grosor de la cáscara W= peso del huevo (g) H= Altura de la clara Unidades Haugh Superficie de la cáscara Índice de forma IF=Ancho/Largo*100

11 1 Análisis de varianza (Anova) de clasificación simple. 2 El por ciento de huevos cascados y en fárfara se analizó por comparación de proporciones por COMPARPRO 1.0

12 Resultados y Discusión Tabla 1. Tamizaje fitoquímico de las hojas de P. guajava. Metabolitos Secundarios Extracto hidro-alcohólico Mayer y Wagner (alcaloides) - Baljet (coumarinas) - Espuma (saponinas) + Shinoda (flavonoides) ++ Fehling (azúcares reductores) + Bortrager (quinonas) + Libermamn-Burchard (triterpenos y/o + esteroides) Ninhidrina (aminoácidos libres) + Antocianidinas + Cloruro Férrico (Fenoles y/o taninos) + Resinas - Leyenda: (-) Ausencia (+) Presencia (++) Abundancia

13 Tabla 2. Tamizaje fitoquímico de las hojas de Anacardium occidentale Metabolitos secundarios Extracto etéreo Extracto etanólico Extracto acuoso Sudán III (ácidos grasos) + Mayer (alcaloides) Baljet (coumarinas) + ++ Espuma (saponinas) + + Shinoda (flavonoides) + + Wagner (alcaloides) + Mucílago - Felhing (azúcares reductores) + Bortrager (quinonas) - + Libermamn-Burchard (triterpenos y/o esteroides) Ninhidrina (aminoácidos libres) - Antocianidinas + + Cloruro Férrico (Fenoles y/o taninos) + (verde oscuro) -

14 Tabla 3. Tamizaje fitoquímico del polvo de hojas de M. citrifolia. Metabolitos secundarios Extracto hidro-alcohólico Resinas - Liberman:(Tripterpenos y esteroides) + Saponinas + Nihidrina:(aminoácidos Libres) + Mayer (Alcaloides) +++ Bljjet(Coumarinas ) - Fehling:(Carbohidratos Reductores) + Cloruro Férrico: (Fenoles y/o Taninos) - Bortranger:(Quinonas) + Shinoda: (Flavonoides) - Antocianidina + Leyenda: (-) Ausencia (+) Presencia (+++) Abundancia

15 Resultados y Discusión Tabla 4. Efecto del polvo de P. guajava en el comportamiento productivo de gallinas ponedoras (27 a 37 semanas) Adición de polvo de P. guajava (%) Indicadores EE± Valor de P Viabilidad (%) Intensidad de puesta (%) b a b b <0.001 Consumo de alimento (g /ave/día) Consumo de P. guajava (g/ave/día) Conversión masal (kg/kg) 2.61 a 2.43 b 2.62 a 2.59 a <0.001 Peso del huevo (g) b ab ab a Peso vivo inicial (g) Peso vivo final (g) Huevos cascados (%) Huevos rotos (%) Huevos en fárfara (%) a,b,c Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a P<0.05 (Duncan, 1955)

16 Resultados y Discusión Tabla 5. Efecto del polvo de P. guajava en la calidad externa e interna del huevo de gallinas ponedoras (35 semanas) Indicadores Adición de polvo de P. guajava (%) EE± Valor de P Peso del huevo (g) Índice de forma (%) Grosor de la cáscara (mm) 0.20 c 0.26 a 0.22 bc 0.23 b <0.001 Altura de la clara densa (mm) Altura de la yema (mm) 6.31 a 6.17 ab 6.03 ab 5.97 b Unidades Haugh Superficie de la cáscara (cm 2 ) Color de la yema 6 b 7 a 6 a 6 b a,b,c Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a P<0.05 (Duncan, 1955)

17 Peso de las pollitas (g) Control 0.50% 1.50% 2.50% Figura 1. Peso vivo semanal en las pollitas ponedoras de reemplazo alimentadas con diferentes adiciones de polvo AO.

18 Tabla 6: Indicadores productivos de las reemplazos ponedoras. Adición de Polvo AO (%) Indicadores EE± Sig. Viabilidad (%) Tarso (cm) CA (g /ave) d a c b 0.54*** CA de AO (g /ave) CA de taninos (g /ave) Conversión alimenticia (g/g) c b a 3.89*** 3.43 d 3.78 c 3.86 b 4.10 a 0.12*** 2.78 b 2.80 b 2.95 a 3.00 a 0.05* a,b,c,d Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a p 0.05 Duncan (1955) *p 0.05; ***p CA: consumo acumulado

19 Tabla 7: Peso relativo de los órganos inmunes y accesorios (TGI-lleno) en pollitas reemplazos ponedoras alimentadas con diferentes adiciones de polvo AO. Adición de Polvo AO (%) Indicadores (%) TGI (vacío) EE± Sig. Timo 0.37 b 0.40 b 0.62 a 0.48 ab 0.06** Bolsa de Fabricio 0.55 b 0.69 a 0.58 b 0.42 c 0.07* Bazo Intestino delgado Colon+recto 0.43 ab 0.53 a 0.24 b 0.28 b 0.07** Ciegos 0.65 b 0.76 ab 0.89 a 0.81 ab 0.03* Proventrículo Molleja TGI (lleno) Timo Bolsa de Fabricio 0.57 b 0.76 a 0.56 b 0.52 b 0.003* Bazo Intestino delgado Colon+recto Ciegos Proventrículo Molleja a,b,c. Medias con letras diferentes en la mismas fila 5.95 difieren a p Duncan (19559) *p 0.05.

20 Tabla 8: Peso relativo de las vísceras de pollitas reemplazos ponedoras alimentadas con diferentes adiciones de polvo AO. Adición de Polvo AO (%) Peso relativo (%) EE± TGI (Vacíos) Hígado Páncreas Riñón b Corazón TGI (Llenos) Hígado Páncreas Riñón Corazón a,b Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a p 0.05 Duncan (9) **p 0.01; ***p

21 Tabla 9: Hipersensibilidad y ph intestinal y glucosa sérica de pollitas reemplazos ponedoras alimentadas con diferentes adiciones de polvo AO. Adición de Polvo AO (%) Indicadores EE± Sig. Hipersensibilidad 60 a 20 b 10 b 20 b 0.05** intestinal (%) ph Intestino 6.18 b 6.13 b 6.35 b 6.69 a 0.10 ** delgado ph ciegos 6.55 b 6.47 b 6.49 b 7.00 a 0.07*** Glucosa sérica 9.60 a 8.50 b 7.77 c 6.60 d 0.9*** (mmol/l) a,b Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a p 0.05 Duncan (9) **p 0.01; ***p

22 Tabla 10. Efecto del polvo de A. occidentale en la calidad externa e interna del huevo de gallinas ponedoras (35 semanas) Adición del polvo de A. occidentale (%) Indicadores EE± Valor de P Peso del huevo (g) Índice de forma (%) Peso de la cáscara (g) Grosor de la cáscara (mm) Altura de la clara densa (mm) Altura de la yema (mm) Color de la yema 6 b 7 a 6 b 6 b a,b,c Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a P<0.05 (Duncan 1955)

23 Tabla 11. Efecto del polvo de M. citrifolia en el comportamiento productivo de gallinas ponedoras (27 a 37 semanas) Indicadores Polvo de M. citrifolia (%) EE± Valor de P Viabilidad (%) Intensidad de puesta (%) Consumo de alimento (g /ave/día) Consumo de M. citrifolia. (g/ave/día) Conversión masal (kg/kg) Peso del huevo (g) b ab a a Peso vivo Huevos cascados (%) Huevos rotos (%) Huevos en fárfara (%) a,b Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a P<0.05

24 Tabla 12. Efecto del polvo de M. citrifolia en la calidad externa e interna del huevo de gallinas ponedoras (35 semanas) Indicadores Polvo de M. citrifolia (%) EE± Valor de P Peso del huevo (g) Índice de forma (%) Grosor de la cáscara (mm) 0.17 c 0.27 a 0.26 a 0.24 b Altura de la clara densa (mm) Altura de la yema (mm) 6.93 b 7.21 ab 7.40 a 6.97 b Color de la yema 6 b 7 a 7 a 7 a a,b,c Medias con letras diferentes en la mismas fila difieren a P<0.05

25 Conclusiones. El tamizaje fitoquímico de las hojas de P. guajava mostró saponinas, azúcares reductores, quinonas, triterpenos, aminoácidos libres, antocianidinas y taninos. La adición de 0.5 % de polvo de hojas de P. guajava en las dietas de gallinas ponedoras incrementó la producción y peso del huevo y redujo la conversión masal. La adición de 0.5 % de polvo de hojas de P. guajava en las dietas de gallinas ponedoras incrementó el grosor de la cáscara y el color de la yema; la adición de 1.5 % de esta planta medicinal redujo la altura de la clara densa.

26 La adición al 0.5 % de polvo de hojas y retoños de Anacardium occidentale en las dietas de pollitas reemplazos ponedoras, incrementó el peso vivo semanal, consumo de alimento, peso de los órganos inmunes, con respecto a los demás tratamientos. La adición de tres niveles de polvo AO disminuyó la hipersensibilidad intestinal y la glucosa sérica en pollitas reemplazos ponedoras. El tamizaje fitoquímico de las hojas de AO mostró una alta cualificación de coumarinas. La suplementación de 0.5 % del polvo de hojas de AO en las dietas de gallinas ponedoras incrementó la producción y peso del huevo y disminuyó la conversión masal. La suplementación de hasta 1.5 % del polvo de hojas de AO en las dietas de gallinas ponedoras, no afectó la calidad externa e interna del huevo, excepto el color de la yema que incrementó con la suplementación de 0.5 %.

27 La adición de 1 % de Morinda citrifolia en las dietas de gallinas ponedoras incrementó el peso del huevo, grosor de la cáscara y la altura de la yema.

28 El polvo de Moringa oleífera suministrada a la reproductora codorniz a 1,5g/ave/día incrementa los resultados productivos y la conversión masal de los huevos y se mejoran el resto de los indicadores bioproductivos. El uso del polvo Moringa oleífera a 1.5g/ave/día incrementó la producción en 1033 huevos en relación al grupo control, para una efectividad económica de CUC.

29 MUCHAS GRACIAS