COLEGIO DE POSTGRADUADOS CAMPUS MONTECILLO

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Marcos Soler Bustamante
hace 6 años
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1 COLEGIO DE POSTGRADUADOS CAMPUS MONTECILLO Presenta: M.C. Paul García Escamilla Colaboradores: Dr. Gabriel Otero Colina M.C. Yuridia Duran Trujillo

2 1860 Primer reporte FLORIDA 1900 scaly bark bark scaling nail head rust, Florida-EUA 1920 lepra explosiva Paraguay 1926 leprosis Florida-EUA 1931 leprose dos citros São Paulo Brasil

3 1932 Argentina 1945 B. obovatus Argentina 1960 Desapareció de Florida 1963 B. phoenicis Brasil

4 1968 B. californicus EUA Knorr 1972; 1974 Observación de partículas microscopía electrónica de transmisión 1995 Transmisión mecánica hospedantes no cítricos

5 2000 América Central Panamá y Costa Rica 2003 Diagnóstico por RT-PCR 2004 Primer registro de leprosis en México

6 2013 Detección de la leprosis de los cítricos citoplasmático tipo Genoma de la leprosis de los cítricos nuclear

7 Chiapas (30 municipios) Tabasco (dos municipios Huimanguillo y Cunduacán) Veracruz 2010 (un municipio Las Choapas) Querétaro (un municipio -Tolimán) Jalisco 2012 (un municipio Guadalajara)

8 CiLV-C CiLV-N CiLV-C2

Reportes Brasil (1972), Panamá (2001) y México (2004), Nicaragua,

Tamaño de la partícula Localización subcelular Síntomas hospedantes

9 Reportes Brasil (1972), Panamá (2001) y México (2004), Nicaragua, Honduras, El Salvador Morfología Partículas baciliformes cortas Tamaño de la partícula Localización subcelular Síntomas hospedantes Vector asociado Clasificación de virus x nm Lumen del retículo endoplásmico. Manchas redondeadas u ovaladas, verde claro a marrón, con un halo clorótico Cítricos dulces Brevipalpus yothersi Género: Cilevirus

10 Miembro tipo del género Cilevirus. Genoma bipartito (formado por dos partes) ssrna (+) y nucleótidos Locali-Fabris et al., 2006)

11 LESIONES REDONDAS U OVALADAS, CON UNA MANCHA CENTRAL CAFÉ OSCURA, RODEADA POR UN HALO CLORÓTICO LESIONES PROTUBERANTES EN LA CORTEZA, GRISES O CAFÉS LESIONES PROTUBERANTES EN LA CORTEZA, GRISES O CAFÉS

Reportes Brasil (1972), Panamá (2001) y México (2011)

forma de rueda de carreta Citrus leprosis virus N (CiLV-N)

subcelular Núcleo Síntomas Locales (cloróticos/necróticos )

12 Reportes Brasil (1972), Panamá (2001) y México (2011) Morfología Partículas baciliformes y desnudas Estructura en forma de rueda de carreta Citrus leprosis virus N (CiLV-N) Tamaño de la partícula x nm Localización subcelular Núcleo Síntomas Locales (cloróticos/necróticos ) Hospedantes Vector asociado Clasificación del virus Naranja valencia, n. navel, n. agria, toronja, lima, mandarina, limón real, limón mexicano Brevipalpus californicus Género: Dichorhavirus Foto: E. W. Kitajima

13 Familia Rhabdoviridae Género: Dichorhavirus Genoma bipartito ssrna (-) y 5.847nucleótidos

15 Reportes Colombia Morfología CiLV-C Tipo 2 Partículas baciliformes cortas Tamaño de la partícula nm x nm Localización subcelular Dentro del retículo endoplasmático Síntomas hospedantes Vector asociado Clasificación de virus En hoja son redondeados con halo clorótico verde claro, en fruto son manchas redondas color cafés Cítricos dulces, naranja valencia, B. yothersi Género: Cilevirus

16 CiLV-C tipo 2, reportado en Colombia Especie diferente (Roy et al., 2013b) Genoma bipartito ssrna (+) 8,717 y 4,989 nucleótidos Identidad con CiLV-C: RNA1 58% y RNA2 49%. Los viriones son semejantes.

03 millones de toneladas $16 mil millones de pesos

Disminuye el valor del mercado (daño cosmético y baja

18 548 mil ha de cítricos. 70% son de naranja dulce millones de toneladas $16 mil millones de pesos (SIAP, 2014). Disminuye el valor del mercado (daño cosmético y baja producción). Dificultades de comercialización derivadas de la cuarentena de cítricos. Costos elevados para su control. En casos extremos las plantas mueren.

19 Hojas Tallos Fruto

del gen de proteína de movimiento que ayudarán a identificar la

20 Se extrae ARN del tejido y con iniciadores (primers) específicos para cada virus durante la RT-PCR se amplifican regiones dentro del gen de proteína de movimiento que ayudarán a identificar la al virus de interés. Primers CiLV-C2 Primers CiLV-C Primers CiLV-N

21 Tejidos deben ser incluidos en resina Spurr Localización subcelular Morfología Tamaño

22 Antisuero anti-p29 (proteína de la cubierta del CiLV-C). Tejidos sanos son utilizados como testigos negativos. Lector de ELISA Metertec modelo 960. Considerar positivos cuando las lecturas son al menos tres veces más altos que los de las muestras de testigo sanos.

23 Detecta la proteína p29 utilizando anticuerpos, supuesta proteína de la cápside del CiLV-C y se tornan fluorescentes.

24 Aparato comercial experimental Incluye computadora con el software apropiado, centrífuga, reactivos y luminómetro Detección específica de proteínas virales Se obtiene el diagnóstico en 5 min

25 TAXONOMÍA Filo: Arthropoda Subphylum: Chelicerata Clase: Arachnida Subclase: Acari Superorden: Acariformes Suborden: Prostigmata Familia: Tenuipalpidae Género: Brevipalpus Espécies : B. yothersi, B. californicus, B. obovatus

26 B. phoenicis

27 B. yothersi 4 fases activas: Larva: tres pares de patas. Protoninfa: cuatro pares de patas Deutoninfa: cuatro pares de patas. Adulto: cuatro pares de patas. 4 fases inactivas Huevos de color naranja brillante, protegido en grietas, en pleno muda o cerca de gránulos de polvo. Protocrisálida: tres pares de patas, fisiológicamente activa. Deutocrisálida: cuatro pares de patas, fisiológicamente activa. Teliocrisálida : cuatro pares de patas, fisiológicamente activa.

Tiempo de desarrollo depende de factores abióticos y bióticos. Cada hembra puede poner de 4 a 80 huevos en toda su vida dependiendo de hospedero y condiciones climáticas.

28 Tiempo de desarrollo depende de factores abióticos y bióticos. Cada hembra puede poner de 4 a 80 huevos en toda su vida dependiendo de hospedero y condiciones climáticas. Periodo de desarrollo de huevo adulto de 20 a 30 días. Longevidad del adulto de 40 a 50 días. Presentan reproducción haploide (un juego de cromosomas) Partenogénesis telitoca (por bacteria Candidatus Cardinium)

29 Definición de la OMS: Son organismos vivos que pueden transmitir enfermedades infecciosas a otros organismos vivos. Principalmente insectos hematófagos que ingieren los microorganismos patógenos junto con la sangre de un portador infectado (persona o animal), y posteriormente los inoculan a un nuevo portador sano al ingerir su sangre. Brevipalpus spp. como vectores: Pueden transmitir los diferentes virus de CiLV entre diferentes hospedantes de cítricos al adquirir el virus de una planta enferma e inoculando a una planta sana.

30 B. obovatus B. californicus B. yothersi En México B. yothersi (A) y B. californicus (B)

31 Adquisición del virus Lo adquiere con mínimo 4 horas de alimentación en planta infectada. A. Inyección de saliva en el tejido vegetal. B. Ingestión de contenido celular y virus. Inoculación del virus Inocula en 1 hora en una planta sana. A. Inyección de saliva y virus en tejido vegetal. B. Ingestión del contenido celular

32 Adquisición del virus en la planta infectada en 4 horas Síntomas aparecen en ± 15 días Virus en ácaro Circulativo Replicación del virus en la planta Transmisión a planta sana en 1 hora

33 CiLV-C CiLV-N Naranjas dulces Mandarinas e híbridos Naranjas ácidas o agrias Pomelos Limones y limas ácidas NARANJA AGRIA LIMA CHICHONA TORONJA NARANJA DULCE LIMON MEXICANO LIMON REAL NARANJA DULCE LIMON PERSA MANDARINA

34 Inoculación mecánica Inoculación con ácaros Colariccio et al Garita, 2013 Lovisolo et al Nunes et al., 2012

35 CiLV-C Cítricos B. Yothersi B. californicus Naranja Valencia (Citrus sinensis) Naranja Campbell (Citrus sinensis) Naranja marsh (Citrus sinensis) X X X Naranja agria (C. aurantium) Mandarina Satsuma (C. reticulata) Mandarina Dancy (C. reticulata) X X Mandarina Fairchild (C. reticulata) Toronja Rio Red (C. paradisi) Limón persa (C. latifolia) * X = síntomas encontrados

36 CiLV-N Cítricos B. yothersi B. californicus Naranja Valencia (Citrus sinensis) Naranja Navel (híbrido de Citrus sinensis y Citrus aurantium) Naranja agria (C. aurantium) Mandarina Reina (C. reticulata) Mandarina Dancy (C. reticulata) Mandarina Mónica (C. reticulata) Toronja Rio Red (C. paradisi) Limón persa (C. latifolia) Limón mexicano (C. aurantifolia) Lima criolla (chichona) (C. limetta) X X X X X X X X * X = síntomas encontrados

37 Gracias. M.C. Paul García Escamilla Correo: Celular: Dr. Gabriel Otero Colina Correo: M.C. Yuridia Duran Trujillo Correo:

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