HONGOS ANEMÓFILOS Y SU IMPLICANCIA EN LA ALERGIA

Transcripción

1 Bioquímica HONGOS ANEMÓFILOS Y SU IMPLICANCIA EN LA ALERGIA Dra. Silvana Ramadán CEREMIC Fac. Cs. Bioq. Y Farmacéuticas UNR

2 ALERGIA Definción: enfermedad multisistémica Sistema Inmunológico Reacción de hipersensibilidad Inmunidad innata Inmunidad adaptativa ANTÍGENOS Alergenos fúngicos

3 Espora Conidio Vías respiratorias Proteínas Citoquinas LTh CPA Citoquinas Citoquinas IgE LB

4 Defensas del Hospedero Factores de Virulencia del hongo Sustancias presentes en capa mucosa: proteínas producidas por células epiteliales con actividad antimicrobiana proteínas surfactantes, IgA secretora, componentes del sistema del complemento y proteínas ligadoras de manosa, facilitan la fagocitosis de las conidias mediante su efecto opsonizante en la superficie fúngica Actividad enzimática : enzimas hidrolíticas (proteasas, amilasas, ribonucleasas) o enzimas no hidrolíticas (enolasas, alcohol deshidrogenasas, aldolasas y fosfogliceratocinasas), proteínas reguladoras Alteraciones de la función mucociliar pueden contribuir a la infección o colonización por hongos

5 MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO INMUNOALERGOLÓGICO 1- Pruebas cutáneas: 2- Prueba de provocación en mucosas: Prueba de puntura (prick test) Prueba intradérmica Prueba de provocación conjuntival Prueba de provocación nasal

6 MÉTODOS DE DIAGNÓSTICO INMUNOALERGOLÓGICO Hemograma IgE sérica 3- Laboratorio clínico: Determinación de Ac. circulantes IgG 4- Laboratorio micológico: Búsqueda de resevorios de Candida en FV, MF, 4º espacio ID y orina

7 Prueba de puntura (prick test) Sencilla, reproducible, rápida Estudia una batería amplia de alergenos Permite conocer la respuesta cutánea inmediata Refleja con fidelidad el estado de sensibilización del individuo a uno o más alergenos Los alergenos fúngicos más comunes son: Alternaria, Cladosporium Aspergillus Penicillium

8 Prueba de puntura (prick test) Lancetas para prick Pápula en p. de prick Medición por planimetría: prick Resultado + : producción de pápula a los 20 min con un diámetro 3 mm

9 Prueba intradérmica Permite determinar a las 48 h la respuesta celular tardía y la «semirretardada» que se presenta a las 4-6 h de la punción y que es mediada por IgG. Es conveniente iniciar el estudio con el prick, y según el resultado emplear la prueba intradérmica. Puede diagnosticar una alveolitis alérgica fúngica en que no se produce una respuesta mediada IgE. Sirve para el estudio de aspergilosis broncopulmonar alérgica en la que coexisten las reacciones inmediatas, semirretardada y retardadas.

10 PRUEBA INTRADÉRMICA b- reacción retardada a las 48 hs. a- reacción semiretardada a las 6 hs.

11 Prueba de provocación conjuntival Consiste en depositar una gota de una dilución inicialmente baja o muy baja del alergeno en un ojo y la de una solución salina estéril de control en el otro. Si a los min no se produce ningún tipo de reacción, se pasa a una concentración superior, por lo general doble, hasta que aparezcan los síntomas de conjuntivitis aguda.

12 Prueba de provocación nasal Consiste en aplicar en forma de aerosol de gotas más una solución acuosa del alergeno en una narina, mientras en la otra se ha aplicado previamente un aerosol de solución salina, para valorar la reactividad inespecífica. La reacción alérgica implicará el desarrollo de rinitis de mayor o menor intensidad, en función de la concentración del alergeno y la reactividad del paciente. Se considera que un porcentaje elevado de pacientes (30% o superior) es demasiado sensible para este procedimiento y presenta reacciones inespecíficas No siempre se encuentra una relación directa entre el grado de la reactividad cutánea y de la prueba nasal.

13 Laboratorio clínico a- Hemograma:suele registrarse eosinofilia, la ausencia de ésta, no descarta el diagnóstico, y lo mismo sucede con los eosinófilos presentes en el moco nasal o en el esputo. b- IgE sérica: se encuentra elevada en la mayoría de los casos, llegando a alcanzar valores sumamente altos en la aspergilosis broncopulmonar alérgica y otros procesos por asma a hongos. c-determinación de Ac. circulantes: Se puede detectar y cuantificar con gran sensibilidad los anticuerpos IgE específicos. d- IgG: son fácilmente detectables porque su concentración sérica es mucho más alta. El interés por cuantificar IgG es para el diagnóstico de las alveolitis alérgicas y en la aspergilosis broncopulmonar alérgica.

14 ALERGIA Definción: enfermedad multisistémica Sistema Inmunológico Reacción de hipersensibilidad Inmunidad innata Inmunidad adaptativa ANTÍGENOS Alergenos fúngicos

15 Los hongos Patógenos primarios Patógenos oportunistas Alergógenos: * conidios, esporas * partículas fúngicas * materiales solubles *asma *aspergilosis broncopulmonar alérgica [ABPA] *neumonitis por hipersensibilidad *sinusitis

16 Alergenos fúngicos ESPORAS CONIDIOS TAMAÑO Partículas de 5 mm: árbol bronquial respuesta de hipersensibilidad inmediata Partículas de 1 mm : vías respiratorias más pequeñas COMPOSICIÓN QUÍMICA respuesta de hipersensibilidad retardada

17 Alergenos fúngicos ESPORAS CONIDIOS TAMAÑO COMPOSICIÓN QUÍMICA CANTIDAD EN EL MEDIO AMBIENTE Localización geográfica Condiciones climáticas Estación del año Grado de urbanización Especies fúngicas. CALIDAD DEL AIRE

18 ALTERNARIA AIRE CLADOSPORIUM ASPERGILLUS PENICILLIUM RHIZOPUS MUCOR

19 VARIABLES QUE AFECTAN EL RECUENTO DE ESPORAS/CONIDIOS Ciudades / zonas rurales. Zonas costeras o zonas continentales. Dentro (indoor) o fuera (outdoor) de los edificios. Concentración de las esporas/conidias fúngicas exterior interior temperatura lluvia humedad dirección y velocidad de los vientos. circulación del aire falta de iluminación materiales orgánicos expuestos al agua y humedad

20 Cómo estudiamos los hongos alergénicos presentes en el aire? Método aerobiológico (Método Hirst) Métodos microbiológicos: Gravimétrico de cultivo Por contacto directo Volumétrico (aspirador de esporas) * Cultivo por impactación sobre placas Micología y Alergia Belmonte i Soler; Gómez y Torres Rodriguez

21 METODO AEROBIOLÓGICO DE HIRST (BURKARD) Ventajas: -Muestreo continuo de conidias/esporas -Recuentos por intervalos horarios. -Resultados en espora o conidias/m3 Inconveniente: -Dificultad en el reconocimiento de esporas.

22 Cómo estudiamos los hongos alergénicos presentes en el aire? Método aerobiológico (Método Hirst) Métodos microbiológicos: - Gravimétrico de cultivo - Por contacto directo - Volumétrico (aspirador de esporas) * Cultivo por impactación sobre placas

23 MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS MÉTODO GRAVIMÉTRICO Placa de Rodac y placa de Petry MÉTODO CONTACTO DIRECTO

24 MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS MÉTODO VOLUMÉTRICO Panel de programación Con placa incorporada En funcionamiento

25 ALTERNARIA ALTERNATA Distribución universal Hongo de espacios abiertos Habita en sustratos orgánicos en descomposición, pulpa de madera Más de 20 fracciones alergénicas diferentes

26 CLADOSPORIUM HERBARUM Distribución universal Asma y Fiebre del heno Se conocen más de 60 extractos antigénicos

27 ASPERGILLUS Saprobio cosmopolita Habita en suelo, materia org. en descomposición Patologías con componente alérgico: Alveolitis alérgica; Asma Rinitis alérgica; Aspergilosis broncopulmonar alérgica Aspergiloma

28 PENICILLIUM Distribución ubicua. Edificios húmedos deteriorando materiales de construcción. Coloniza vías respiratorias, Alergias respiratorias

29 MUCOR MUCEDO Habita en vegetales en descomposición Enfermedad profesional en peleteros

30 Epicoccum Saprófito cosmopolita de amplia distribución mundial

31 Qué uso le damos a los resultados obtenidos en el laboratorio? Elaboración numérica de los recuentos: mejor interpretación de los resultado comparación de los valores hallados Gráficos de variaciones estacionales de las esporas/conidias; con respecto a la temperatura ambiente con respecto a la humedad relativa ambiente Construcción de calendarios de producción esporas/conidias anuales, mensuales.

32 Concentración medias diarias de esporas de Alternaria y Cladosporium

33 Flora micótica domiciliaria en la ciudad de Rosario Alternaria 17% Sobre 1155 colonias aisladas en 25 domicilios Penicillium 14% Fusarium 1% Cladosporium 45% Aspergillus 23% Ledit R. F. Ardusso, Carlos D. Crisci, Marcelo Strass, Laura Ramos, Clara López y Silvana Ramadán (1996)

34 Variación estacional de la flora fúngica Nro o. de colonias Cladosporium Alternaria Aspergillus Penicilium Fusarium INVIER PRIMAV VERANO OTOÑO

35 Variación de la flora fúngica según la Tº ambiente 80 Number Nro. colonias of colonies Cladosporium Aspergillus Penicillium Alternaria Fusarium TºC Variación de la flora fúngica según la HRA Number Nro. colonias of colonies % 60-80% % Cladosporium Alternaria Aspergillus Penicillium Humedad Humidity RA

36 Aporte de los estudios aerobiológicos 1 Conocer la distribución y la prevalencia de las especies fúngicas con características alergológicas. Determinar 2 la etiología de las alergias respiratorias 3 El aislamiento y la identificación de las cepas autóctonas permitiría la elaboración de antígenos con finalidad diagnóstica. 4 Tomar medidas preventivas por el médico que significaría mejorar la calidad de vida del paciente.