V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Contenido de β-caroteno Extraído con Diferentes Tipos de Sistemas de Solventes
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- Juan Francisco Prado Giménez
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1 70 V. RESULTADOS Y DISCUSIÓN 5.1. Contenido de β-caroteno Extraído con Diferentes Tipos de Sistemas de Solventes Según el balance de materia expresado en porciento, e l sistema de solventes más eficiente para extraer el β-caroteno reflujando y sin reflujar, a partir de muestra liofilizada y fresca fue cloroformo/metanol (1:1, v:v), con porcentajes de eficiencia de 26.35, 25.72, 3.15, respectivamente (Tabla 15). La Tabla 16, muestra los resultados de la extracción del β-caroteno con los diferentes tipos de sistemas de solvente a partir de muestra liofilizada y fresca. La extracción del β- caroteno utilizando muestras de chile fresco dió niveles significativamente bajos comparados con los obtenidos con mues tras de chile liofilizado. El intervalo de niveles de β-caroteno extraído por gramo de muestra liofilizada, sin reflujar la mezcla de solventes cloroformo/metanol (1:1, v:v) fue de 6.88±0.08 a 14.43±1.75 μg/g. Se seleccionó este proceso, debido a que se om ite la etapa de reflujar el solvente hasta sequedad con nitrógeno, la cual puede durar hasta 8 h, arriesgando la estabilidad de los carotenoides. Sun et al. (2007) reportaron niveles de 5.8±1.7 μg de β-caroteno extraído con metanol por gramo de chile bell (ps). Ambati et al., (2006), reportaron tener las mas altas eficiencias de extracción de carotenoides a partir de una alga (Botryococcus braunii) con cloroformo:metanol 1:1 y cloroformo:metanol 2:1 (468 y 756 μg/g, respectivamente).
2 71 Tabla 15. Eficiencia de extracción carotenoides por los diferentes sistemas de solvente en porcentaje. Muestra Liofilizada Muestra Fresca Sistema de solventes Solvente Solvente sin Solvente Solvente sin Reflujado Reflujar Reflujado Reflujar Acetona Cloroformo: Metanol (1:2) Cloroformo: Metanol (1:1) Cloroformo: Metanol (2:1) Etanol 96% Etanol 80%
3 72 Tabla 16. Niveles de -caroteno (μg/g) extraídos a chile liofilizado y fresco por diferentes tipos de sistemas de solventes reflujados y sin reflujar. Solvente Muestra Liofilizada Muestra Fresca Solvente Solvente Solvente Solvente reflujado sin reflujar reflujado sin reflujar Acetona 9.03±0.41 e 8.86±1.72 c 0.08±0.01 d 0.65±0.31 b C: M 1:2 3.26±0.26 b 14.43±1.75 e 0.12±0.06 b 0.41±0.18 c C: M 1: ±2.72 f 12.39±0.68 e 0.63±0.03 a 1.20±0.99 a Etanol 96% 5.21±0.89 c 9.97±0.04 d 0.10±0.02 c 0.26±0.13 e Etanol 80% 3.02±0.09 a 7.35±0.51 b 0.08±0.00 e 0.40±1.18 d C: M 2:1 8.19±0.06 d 6.88±0.08 a - - Los datos son la media y la desviación estándar. Los superíndices por columna indican diferencia sign ificativa (p<0.05). -; No realizado.
4 Contenido de Carotenoides Los resultados de los niveles de carotenoides obtenidos en los diferentes cultivares de chile Bell se observan en la Tabla 17, en la cual se muestra que el contenido de clorofilas es mayor (p<0.05) que el de carotenoides cuando el cultivar de chile corresponde al color verde, comparado con los cultivares amarillos y naranjas. En base a los datos obtenidos donde se observan mayor cantidad de β-caroteno es en el chile Bell rojo c on un valor 71.99±7.30 μg de β-caroteno/100 g ps, seguido por el color verde (54.41±0.76 μg de β-caroteno/100 g ps). Estos resultados son similares a los reportados por Matsufuji et al. (2007), quienes concluyeron que los cultivares con mayor cantidad de β -caroteno son el rojo y el naranja con 360 y 290 μg de β -caroteno/100 g ps, y con un nivel medio es el color verde con 90 μg de β-caroteno/100 g ps y el amarillo con un bajo con tenido de con un 50 μg de β -caroteno/100 g ps. En el caso de la luteína, el mayor (p>0.05) contenido encontrado fue en el cultivar naranja (30.28±2.78 μg de luteína/100 g ps) seguido del cultivar verde (14.64±1.08 μg de luteina/100 g ps). Los valores de luteína obtenidos en el presente trabaj o fueron comparados los obtenidos por Deli et al. (2001), quienes encontraron el mayor contenido de luteína en el cultivar verde (31900 μg/100g ps), seguido por el amarillo con 1460 μg/100 g ps y posteriormente el naranja con un valor más pequeño (60 μg/10 0 g ps). En el cultivar rojo no detectaron luteína, resultados similares a los enco ntrados en el presente trabajo.
5 74 Tabla 17. Contenidos de carotenoides en los diferentes cultivares de chile Bell. Chile Bell (Capsicum annuum L). β-caroteno Luteina Clorofila A Clorofila B Verde 54.41±0.76 c 14.64±1.08 b 67.19±0.82 b ±8.32 b Naranja 34.72±4.65 b 30.28±2.78 c Nd 11.06±4.93 a Rojo 71.99±7.30 d Nd ±6.51 c 12.79±7.14 a Amarillo 6.94±0.25 a 9.28±0.92 a 9.31±0.92 a Nd Los datos son la media y la desviación estándar. Los superíndices por columna indican diferencia significativa. Nd: No detectable.
6 Contenido de Clorofilas En el caso de la clorofila-a, el contenido más alto fue para el cultivar rojo (191.08±6.51 μg/100 g ps), seguido del verde (67.19±0.82 μg/100 g ps). No se encontró clorofila-a en el cultivar naranja. Con respecto a los niveles de la clorofila -b encontrados en los cultivares de chile, el nivel mas grande fue para el cultivar verde ±8.32 μg/100 g ps). No se encontraron diferencias en los contenidos de clorofila-b en los cultivares de chile naranja y rojo. No fue detectada la clorofila-b en el cultivar amarillo. Estos valores fueron comparados con los obte nidos por Buratti et al. (2001), quien cuantificó clorofila a y b en chiles Bell amarillo, rojo y verde; encontrando los niveles mayores en el cultivar verde (340μg de clorofila-a y 2150 μg de clorofila-b/100 g pf). En los cultivares de chile Bell rojo y amarillo no fueron detectadas clorofilas (Tabla 17). Las diferencias en las concentraciones encontradas de todos los compuestos analizados en este estudio, en comparación con otros estudios similares, se deben a las variedades, condiciones de cultivo (humedad, temperatura ambiente, tipo desuelo y región de cultivo) y cosecha de los chiles (Pickersgill, 1971) Determinación de Actividad antioxidante por Ensayo ABTS La actividad antioxidante de los extractos de los d iferentes cultivares de chiles Bell (rojo, verde, amarillo, rojo), estimada por la neutralización del radical ABTS a los 7 minutos, se muestra en la Tabla 18. Las actividades antioxidantes mayores (p<0.05) fueron presentadas por los extractos de carotenoides de ch ile bell rojo y naranja con 26.5 mmoles ET/mg. El cultivar que presentó la menor actividad fue el del extracto de chile amarillo con 16.8 mmoles
7 76 Tabla 18.Capacidad antioxidante de los extractos de carotenoides Mediante la neutralización de los radicales ABTS + y DPPH. Chile Bell ABTS mmoles ET/mg DPPH (% inhibición) Verde 20.18±0.38 b 35.58±1.60 b Naranja 26.47±0.14 c 48.28±0.24 c Rojo 26.58±0.63 c 47.09±0.41 c Amarillo 16.81±1.27 a 29.88±1.49 a
8 77 ET/mg. Gorinstein et al. (2009), reportaron valores entre 26 y 28 mmoles ET/mg para extractos de chiles verdes y rojos. Las correlaciones realizadas entre los niveles de los carotenoides en los extractos de los diferentes cultivares de chile Bell (rojo, amarillo, verde y naranja) con la capacidad antioxidante medida por la estabilización del radical ABTS, mostraron que los extractos de los cultivares de chile naranja y amarillo presentaron la mas alta correlación (r=0.97), seguido por el extracto del cultivar verde (r=0.88). La correlación menor la presentó el cultivar rojo (r=0.83). Esto indica que los carotenoides presentes en los chiles son importantes como compuestos antioxidantes Determinación de Actividad Antioxidante por Ensayo DPPH Al determinar la actividad antioxidante de los extractos de carotenoides de los diferentes cultivares de chile bell (verde, naranja, rojo, amarillo), mediante la neutralización del radical DPPH, se encontró que la capacidad antioxidante presentó el mismo comportamiento cuando fue medida mediante la estabilización del radical ABTS + (Tabla 18). Los extractos de carotenoides de los cultivares de chile naranja y rojo fueron los que presentaron la mayor capacidad (48.28±0.24 y 47.09±0.41 % de inhibición, respectivamente), seguida del extracto de l cultivar verde (35.58±1.60 % de inhibición). Los porcentajes de inhibición están medidos en un intervalo de concentración de g/ml. Zhang y Hamauzu (2003) reportaron porcentajes de inhibición de 52.3% para extractos metanólicos de chile Bell rojo, 45.5% para amarillo y 33.2% para chile bell verde. Las correlaciones realizadas entre los extractos de los diferentes cultivares de chile Bell (rojo, amarillo, verde y naranja) con la capacidad antioxidante medida por la estabilización del radical
9 78 DPPH, dieron una r= 0.90 para el extracto de carotenoides del cultivar de chile verde. Estos análisis entre los niveles de carotenoides y la capacidad antioxidante indican que el contenido de carotenoides puede ser importante como compuestos bioactivos Contenido de Carotenoides Totales El contenido de carotenoides totales fue mayor en el chile rojo, con 106 mg/100 g ps, el chile naranja presentó alrededor del 50% menos que el chile rojo (55 mg/100g ps), finalmente los niveles de carotenoides en el chile amarillo (14 mg/100g ps) y en el verde (12 mg/100g ps) no presentaron diferencias significativas (p<0.05) (Tabla 19). Marin et al,(2008) reportan niveles de carotenoides totales en chile Bell de las variedades verdes (10.9 mg/100g ps) y rojas (93.3 mg/100g ps), similares a las del presente estudio Contenido de Ácido Ascórbico en el Chile C. annuum L. Los resultados más altos de contenido de acido ascórbico fue la variedad verde 120 μg de vitamina C/100 g de muestra fresca, entre las otras variedades amarillo, naranja y rojo no hubo diferencia significativa entre ellos (76.5, 67.1 y 66.6 mg de vitamina C/100 g de muestra fresca). La vitamina C se encuentra en niveles de μg/100 g de porción comestible (Tabla 19). A pesar de que se sabe que el ácido ascórbico es un potente antioxidante, en el presente estudio los extractos de chile que presentaron más actividad antioxidante fueron los de chile naranja y rojo. El principal componente del pimiento es el agua, seguido de hidratos de carbono, lo que hace que sea una hortaliza con bajo aporte calórico y una buena fuente de compuestos antioxidantes y vitaminas.
10 79 Tabla19. Carotenoides totales y ácido ascórbico de los diferentes cultivares Bell. Cultivar Carotenoides totales (mg/100g ps) Ácido Ascórbico (μg/100 g ps) Verde a ± 0.19 c Rojo d 6.67 ± 0.40 a Naranja c 6.72 ± 0.12 a Amarillo b 7.65 ± 0.47 b Letras diferentes por columna indican dife rencia significativa (p<0.05).
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