RELEVANCIA DE LA MEDICIÓN DEL NIVEL EN SUERO DE LA ONCOPROTEÍNA HER2/NEU. ESTUDIO DE CASOS CLÍNICOS.

Transcripción

1 RELEVANCIA DE LA MEDICIÓN DEL NIVEL EN SUERO DE LA ONCOPROTEÍNA HER2/NEU. ESTUDIO DE CASOS CLÍNICOS. Foro de Excelencia Clínica y Flujo de Trabajo AAM 2015 Bioq.Esp.Natalia Lebensohn Centro de Tecnología en Salud Pública Fac. Cs. Bioquímicas y Farmacéuticas. UNR natalialebensohn@hotmail.com

2 Her2/neu

3 The HER-2/neu tyrosine kinase receptor Ross, J. S. (2004) Mol. Cell. Proteomics 3: Copyright 2004 American Society for Biochemistry and Molecular Biology

4 Clifford A. Hudis, M.D. Trastuzumab Mechanism of Action and Use in Clinical Practice NEJM 2007

5 Qué miden las pruebas de HER-2/neu? HER-2/neu Oncogénico HER-2/neu mrna HER-2/neu ECD IHC/FISH images courtesy of RY Osamura, MD, Tokai University School of Medicine

6 ECD Her2/neu EN SUERO Es un inmunoensayo tipo sandwich de dos puntos: El reactivo lumínico está compuesto por el anticuerpo monoclonal de ratón TA-1 marcado con éster de Acridinio. El reactivo conjugado está compuesto por el anticuerpo monoclonal de ratón NB-3 marcado con fluoresceína. Estos dos anticuerpos monoclonales son específicos de epítopes únicos del ECD Her2/neu.

7 ECD Her2/neu EN SUERO La fase sólida está compuesta de anticuerpo de captura monoclonal de ratón purificado antifluoresceína unido en forma covalente a partículas paramagnéticas.. Partículas paramagnéticas (PMP) Ac Es cuantitativo dado que existe una Relación directa entre la cantidad de ECD Her2/neu presente en la muestra del paciente y la cantidad de unidades de luz detectadas por el sistema.

8 ECD Her2/neu EN SUERO éster de Acridinio NB-3 TA-1

9 Ensayo tipo Sandwich Señal directamente proporcional Curva de calibración ascendente Light signal (RLUs) Concentration of the Sample Es cuantitativo dado que existe una relación directa entre la cantidad de Her2/neu presente en la muestra del paciente y la cantidad de unidades de luz detectadas por el sistema. Sensibilidad y rango del ensayo 0,5 350 ng/ml

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11 SIGNIFICACIÓN PRONÓSTICO Y POTENCIAL UTILIZACIÓN EN EL MONITOREO TERAPEÚTICO DEL DOMINIO EXTRACELULAR DE LA PROTEÍNA HER2 EN SUERO DE MUJERES DIAGNOSTICADAS CON CÁNCER DE MAMA EN EL SERVICIO DE ONCOLOGÍA DEL HOSPITAL PROVINCIAL DEL CENTENARIO DE LA CIUDAD DE ROSARIO. Servicio de Oncología del Hospital Provincial del Centenario, Sección de Patología Mamaria, Centro de Tecnología en Salud Pública de la Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas UNR. SIEMENS Healthcare Diagnostic SA.

12 ETAPA 1 RECLUTAMIENTO VOLUNTARIO MUJERES SANAS años Servicio de Oncología y Ginecología Fac. de Cs. Médicas Fac. de Cs. Bioq y Farm CTSP 200 MUJERES INFORMACIÓN GENERAL CONSENTIMIENTO INFORMADO CRITERIOS DE INCLUSIÓN / EXCLUSIÓN CTSP MS SEGUIMIENTO EN EL TIEMPO *EXAMEN MAMARIO *SENOGRAFÌA *ECOGRAFÌA MAMARIA MS: muestra de sangre

13 ETAPA 2 FASE DIAGNÒSTICO FASE PRE QUIRÙRGICA FASE QUIRÙRGICA FASE POST QUIRÙRGICA SEGUIMIENTO EN EL TIEMPO CONSENTIMIENTO INFOMADO TEJIDO MS PATOLOGÍA MS TACO CTSP MS: muestra de sangre

14 Monitoreo de ECD Her-2/neu en Suero Enero Feb Mar Abril Mayo Junio Julio Agosto Sep Oct Nov Dic

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25 Reclutamiento de mujeres período: 02/05/ /06/ ETAPA 1 ETAPA 2 ETAPA 1 16 HPC ETAPA 1 ETAPA LALCEC 2 CEMAR

26 Distribución de los valores del ensayo HER-2/neu de ADVIA Centaur para mujeres sanas N=210 mujeres Percentil 95 Percentil 97,5 17,6 ng/ml 18,0 ng/ml

27 Seguimiento de pacientes Her2/neu+++ con cáncer de mama con el ensayo HER-2/neu

28 Gráfico de resultados esperados Nivel Her-2 sérico ng/ml FASE pre Quirurg. Fase Quirurg. Fase post Quirurg Tratamiento TRASTUZUMAB VP Mal Pronostico VP Cambio de terapia VN Respuesta al tratamiento 1er.consulta Tiempo días

29 Pacientes Her2/neu+++ E2FJOOV Edad: 32 años Diagnóstico: CA ductal infiltrante RECEPTORES: RE NEG RP NEG Her2/neu +++ FENOTIPO: Her2 Tratamiento quirúrgico: mastectomía MI Tratamiento sistémico: 4 ciclos AC (neoadyuvancia) Taxanos Trastuzumab Chequeo a distancia: NEG

30 Her2/neu (ng/ml) E2FJOOV TRASTUZUMAB /09/ /12/ /02/ /03/ /04/ /05/ /06/ /07/ /08/ /09/ /10/ /10/ /11/ /04/ /05/ /06/ /08/ /10/ /06/2015 Tiempo (dîas)

31 Pacientes Her2/neu+++ E2FANGO Edad: 40 años Diagnóstico: CA ductal infiltrante RECEPTORES: RE NEG RP NEG Her2/neu +++ ki67 55% FENOTIPO: Her2 Tratamiento sistémico: AC x 4 Paclitaxel - Pamidronato - Trastuzumab Chequeo a distancia: POS

32 Her2/neu (ng/ml) E2FANGO LAPATINIB CUÑA TRUCUT AC PACLITAXEL 44.1 PAMIDRONATO TRASTUZUMAB /02/ /05/ /06/ /06/ /07/ /08/ /09/2012 Tiempo (días) 05/10/ /10/ /11/ /01/2013

33 Pacientes Her2/neu+++ E2FMALU Edad: 52 años Diagnóstico: CA ductal infiltrante Enf. de Paget RECEPTORES: RE POS RP POS Her2/neu +++ Ki67 8% FENOTIPO: LB Tratamiento quirúrgico: mastectomía MD Tratamiento sistémico: 2 ciclo de AC Chequeo a distancia: no realizó

34 Her2/neu (ng/ml) E2FMALU SUSPENDE TRATAMIENTO TRUCUT CUÑA MADDEN AC /10/ /11/ /01/2012 Tiempo (días) 06/02/ /03/ /08/ /04/2013

35 Pacientes Her2/neu+++ E2VISO Edad: 41 años Diagnóstico: Carcinoma ductal infiltrante RECEPTORES: RE POS RP POS Her2/neu +++ Ki67 8% FENOTIPO: LB Tratamiento quirúrgico: Cuadrantectomía MD Tratamiento sistémico: no Chequeo a distancia: NEG

36 Her2/neu (ng/ml) E2VISO PUNCION MD CUDAS MD TAMOXIFENO RADIOTERAPIA /10/ /10/ /11/ /12/ /12/ /04/ /05/ /06/ /08/ /10/ /01/ /07/ /11/ /02/2015 Tiempo (dìas)

37 Pacientes Her2/neu+++ E2FMOLA Edad: 47 años Diagnóstico: Carcinoma lobulillar RECEPTORES: RE POS RP POS Her2/neu +++ FENOTIPO: LB Tratamiento quirúrgico: mastectomía bilateral con reconstrucción. Tratamiento sistémico: AC x 4 + Paclitaxel x 4 Trastuzumab Chequeo a distancia: NEG

38 E2FMOLA /08/ /08/ /09/ /10/ /10/ /11/ /12/ /01/ /02/ /03/ /04/ /05/ /08/ /10/ /01/ /04/ /05/2015 Tiempo (días) Her2/neu (ng/ml) AC PACLITAXEL TRASTUZUMAB MADDEN TAMOXIFENO

39 Pacientes Her2/neu+++ E2FINCA Edad: 37 años Diagnóstico: Carcinoma ductal infiltrante RECEPTORES: RE NEG RP NEG Her2/neu +++ FENOTIPO: Her2 Tratamiento quirúrgico: mastectomía bilateral con reconstrucción Tratamiento sistémico: AC x 4 + Paclitaxel x 4 Trastuzumab Chequeo a distancia: NEG

40 Her2/neu (ng/ml) E2FINCA ,00 325,00 300,00 275,00 250,00 225,00 200,00 175,00 150,00 125,00 PUNCIÓN TRASTUZUMAB 100,00 75,00 50,00 25,00 0,00 MADDEN 21,00 9,7 9,2 PACLITAXEL 10,8 11,6 10,2 10,7 12, , /09/ /10/ /11/ /12/ /04/ /06/ /12/2013 Tiempo (días) 23/04/ /10/ /04/ /05/2015

41 Pacientes Her2/neu+++ E2FJADI Edad: 44 años Diagnóstico: Carcinoma ductal infiltrante RECEPTORES: RE POS RP POS Her2/neu NEG Tratamiento quirúrgico: CUDAS de MI Tratamiento sistémico: AC x 4 + Paclitaxel x 6 Pamidronato Chequeo a distancia: POS

42 Her2/neu (ng/ml) E2FJADI ,0 650,0 600,0 550,0 500,0 450,0 400,0 350,0 300,0 250,0 200,0 150,0 100,0 19,6 21,5 20,5 20,2 19,2 21,4 25,4 50,0 0,0 07/01/2013 TRUCUT MI CUDAS MI 28/01/2013 AC 18/02/2013 PAMIDRONATO 18/03/ /04/2013 PACLITAXEL 03/05/ /06/ /06/2013 Tiempo (días) 40,8 46,0 18/09/ /10/ ,0 20/12/ ,6 17/03/ ,0 604,0 28/04/2014

43 Se deben tener en cuenta los falsos negativos de la inmunohistoquímica; la literatura reporta amplificación del Her2/neu en, aproximadamente, 7% de los casos leídos como 0 o 1+, por esta razón, el FISH se debe considerar en casos negativos por inmunohistoquímica, con alto grado histológico y resultado de receptores hormonales negativo.

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45 Pacientes Her2/neu+++ E2FGRAN Edad: 43 años Cáncer de mama y embarazo Diagnóstico: Carcinoma ductal infiltrante RECEPTORES: RE NEG RP NEG Her2/neu POS Ki67 20% Tratamiento quirúrgico: mastectomía MD Tratamiento sistémico: AC x 4 + Paclitaxel x 4 Trastuzumab Chequeo a distancia: NEG

46 Her2/neu (ng/ml) E2FGRAN PACLITAXEL TRASTUZUMAB AC TRUCUT MD MADDEN /05/14 11/08/14 Tiempo (días) 19/01/15 20/04/15

47 ECD Her2/neu Un marcador tumoral va a ser realmente útil si las decisiones terapéuticas basadas en sus variaciones mejoran: la sobrevida global la sobrevida libre de enfermedad la calidad de vida los costos del tratamiento.

48 HAY MUCHAS MANERAS DE AYUDAR A LOS DEMÁS ESTA PUEDE SER UNA DE ELLAS Director: Prof. Dr. Oscar Di Paolo Luís Parejo Prof: Dr. Roberto Tozzini Dr. Carlos Capitaine Funes Dra. Victoria Moretto Bioq. Natalia Lebensohn Prof. Dra. Claudia Biondi Dra. Nora Quaglia Dr. Richard Quiroga Dr. German Cipulli Dra. M. A. Bartoli Dra. Ana Lía Nocito Dra. Mariela Stur Dr. Gonzalo Tabares Dra. Rosa Calisse AYÚDENOS A TRABAJAR PARA MEJORAR EL PRONÓSTICO Y EL TRATAMIENTO DEL CÁNCER DE MAMA

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50 Distribución de los valores del ensayo HER-2/neu de ADVIA Centaur para mujeres sanas N=200 mujeres Percentil 95=15.2ng/ml Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). How to Define and Determine Reference Intervals in the Clinical Laboratory; Approved Guideline NCCLS Document C28 A2

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