Proceso de estandarización de una metodología analítica. De Argentina a ISO «Proteínas Solubles en harinas de soja».
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- Mariano Valverde Prado
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2 World Congress on oils & fats and 31st ISF Lectureship series Rosario, 2 de noviembre de 2015 Proceso de estandarización de una metodología analítica. De Argentina a ISO «Proteínas Solubles en harinas de soja». Lic. María del Carmen Fernández Gerencia Alimentos y Salud, IRAM
3 Contenido: Estandarización/Normalización de métodos analíticos: Normas IRAM / Normas ISO Norma IRAM 5614:2009 ISO :2014 Oleaginous by-products Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution IRAM 5614/ISO 14244: 2015 Determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio (ISO 14244:2014, IDT)
4 Contenido: Estandarización/Normalización de métodos analíticos: Normas IRAM / Normas ISO Norma IRAM 5614:2012 ISO :2014 Oleaginous by-products Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution IRAM 5614/ISO 14244: 2015 Determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio (ISO 14244:2014, IDT)
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6 QUÉ ES LA NORMALIZACIÓN? Es una actividad mediante la que fabricantes, usuarios, consumidores, laboratorios de ensayo y los entes del estado, establecen un acuerdo voluntario, plasmado en un documento técnico, 6
7 QUÉ ES LA NORMALIZACIÓN? la norma, en la cual se definen las características técnicas que debe reunir un material, producto, servicio o sistema para garantizar su seguridad, su aptitud para la función, o su compatibilidad con otros productos, servicios o sistemas. 7
8 La importancia de las normas IRAM en el ámbito de los alimentos Son un complemento de la legislación y de las diferentes reglamentaciones y una marca registrada para la apertura y transparencia de los mercados; Ejemplos: dispositivos para el filtrado de agua potable, contenedores cortopunzantes, entre otros. Crean un lenguaje común entre las partes interesadas; Ejemplos: vocabulario y materiales de referencia (definiciones en microbiología, términos comunes para los productos médicos) Ofrecen compatibilidad, intercambiabilidad y funcionalidad de partes y componentes; Ejemplos: componentes eléctricos utilizados en medicina (normas sobre electromedicina).
9 Beneficios para los Productores /Usuarios/Consumidores Posibilidades de Los productores Necesidades de los usuarios NORMA
10 Niveles de normalización
11 Qué es una norma? Documento técnico basado en la experiencia y elaborado a partir de las necesidades de la actividad Disponible al público, Establecida por consenso de las partes interesadas: Productores, Consumidores e Intereses generales Aprobada por un organismo Nacional o Internacional reconocido.
12 Dónde se estudian las normas IRAM? ORGANISMOS DE ESTUDIO DE NORMAS COMITÉS SUBCOMITÉS GRUPOS DE TRABAJO
13 Qué es una norma? Documento técnico basado en la experiencia y elaborado a partir de las necesidades de la actividad Disponible al público, Establecida por consenso de las partes interesadas: Productores, Consumidores e Intereses generales Aprobada por un organismo Nacional o Internacional reconocido.
14 Normas nacionales obligatorias y voluntarias Campo voluntario IRAM Desde su fundación, en el año 1935, IRAM fue reconocido como el instituto argentino de normalización por diferentes regulaciones nacionales. En 1994 nuestro gobierno nacional crea el Sistema Nacional de Normas, Calidad y Certificación Decreto 1474/94 Membresías regionales e internacionales
15 Sistema Nacional de Normas, Calidad y Certificación Su creación por el Decreto Nº 1474/94 tiene por objetivo ofrecer las herramientas y crear los organismos que conformen la infraestructura de la calidad. CONSEJO NACIONAL DE NORMAS, CALIDAD Y CERTIFICACIÓN CONSEJO ASESOR N I V E L 1 ORGANISMO DE NORMALIZACIÓN ORGANISMO DE ACREDITACIÓN N I V E L 2
16 Normas IRAM Normas ISO
17 Proceso de normalización Búsqueda de antecedentes Esquema A de norma IRAM (ISO CD committee draft) Consenso de los expertos Esquema 1 de norma IRAM (ISO DIS for discussion) Discusión pública Proyecto de norma IRAM (ISO FDIS final text) CGN Norma IRAM (ISO International Standard)
18 Contenido: Estandarización/Normalización de métodos analíticos: Normas IRAM / Normas ISO Norma IRAM 5614:2009 ISO :2014 Oleaginous by-products Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution IRAM 5614/ISO 14244: 2015 Determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio (ISO 14244:2014, IDT)
19 . Comité de Productos Alimentarios (CPA) Subcomité Aceites, grasas y subproductos oleaginosos
20 Subcomités CPA ACEITES Y GRASAS Creado en 1940 ANÁLISIS SENSORIAL Grupo de trabajo Aceite de oliva AZÚCAR VINOS CEREALES FILTROS DE AGUA INOCUIDAD ALIMENTARIA IRRADIACIÓN DE ALIMENTOS
21 Reunión del Subcomité IRAM Aceites, grasas y subproductos oleaginosos Año 1994
22 Normalización de alimentos Subcomité de Aceites, grasas y subproductos oleaginosos Comprende el estudio de normas sobre productos y procesos. Entre ellas se pueden citar: Muestreo Requisitos de genuinidad y de calidad de productos: IRAM 5529 Aceite de girasol, IRAM 5537 Aceite de soja, entre otras. Métodos de ensayo. IRAM 5614 Requisitos de inocuidad alimentaria: Buenas prácticas, Análisis de peligros y Sistemas de gestión de la inocuidad alimentaria (IRAM ISO 22000)
23 Sectores involucrados en el proceso de normalización NACIONAL - IRAM Subcomité de Aceites, grasas y subproductos oleaginosos Integrantes de los organismos de estudio Sector público: - Organismos oficiales - Universidades y Facultades - Institutos de investigación, entre otros Sector privado: - Empresas productoras - Laboratorios de análisis - Cámaras, Centros y Asociaciones empresariales, entre otros
24 Contenido: Estandarización/Normalización de métodos analíticos: Normas IRAM / Normas ISO Norma IRAM 5614:2009 ISO :2014 Oleaginous by-products Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution IRAM 5614/ISO 14244: 2015 Determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio (ISO 14244:2014, IDT)
25 ISO/TC 34, Food products Subcomités SC 2, Oleaginous seeds, fruits and oilseed meals SC 3, Dried vegetables and fruits SC 4, Cereals and pulses SC 5, Milk and milk products SC 6, Meat, poultry and egg products SC 7, Spices and condiments SC 8,Tea SC 9, Microbiology
26 ISO/TC 34, Food products SC 10, Animal feeding products Subcomités SC 11, Animal and vegetable fats and oils SC 12, Sensory analysis IRAM (Argentina) SC 14, Fresh fruits and vegetables SC 16, Moleculaar biomakers SC 17, Food safety management systems SC 15, Coffee
27 Reuniones ISO en Buenos Aires (IRAM) INTERNACIONAL International Organization for Standardization ISO/TC 34 SC 2 y SC 11
28 Contenido: Estandarización/Normalización de métodos analíticos: Normas IRAM / Normas ISO Norma IRAM 5614:2009 ISO :2014 Oleaginous by-products Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution IRAM 5614/ISO 14244: 2015 Determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio (ISO 14244:2014, IDT)
29 Norma ISO a partir de una propuesta argentina
30 ISO/TC 34/SC 2 Oleaginous seeds, fruits and oilseed meals ISO New Work Item Proposal (NWIP) Argentinean Proposal (IRAM subcommitte) (ISO TC 34 SC 2 N 707) Determination of soluble proteins in soya meals ISO/TC 34 SC 2 Meeting May 16th, 2008 Seattle, USA
31 ISO/CD Oilseed meals -- Soya meals -- Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution Votación entre Marzo y Mayo de Países a favor: Egypt, Poland, Romania Russian Federation,Serbia (ISS), Spain, Sri Lanka,United Kingdom, United States En contra: Canada, Germany Principales comentarios: No se incluía el método de Dumas para calcular nitrógeno (Canadá) y falta de interlaboratorios (Germany)
32 ISO/DIS Oilseed meals - Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution Votación entre Febrero y Mayo de Resultado: 100% a favor Se incluyeron los resultados de un ensayo interlaboratorios efectuado en 5 matrices: 3 de harina de soja,1 de pellets de girasol y 1 de harina de colza PRECISIÓN: REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD
33 ISO/DIS Oilseed meals - Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution Votación entre Febrero y Mayo de Resultado: 100% a favor Se incluyeron los resultados de un ensayo interlaboratorios efectuado en 5 matrices: 3 de harina de soja,1 de pellets de girasol y 1 de harina de colza PRECISIÓN: REPETIBILIDAD Y REPRODUCIBILIDAD
34 ISO/FDIS Oilseed meals - Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution Votación entre Noviembre de 2013 y Enero de Resultado: 100% a favor Comentarios sólo de forma Se acordó expresar los resultados mediante el método de Kjeldahl (ISO y2) ISO publicada en Febrero de 2014
35 Contenido: Estandarización/Normalización de métodos analíticos: Normas IRAM / Normas ISO Norma IRAM 5614:2009 ISO :2014 Oleaginous by-products Determination of soluble proteins in potassium hydroxide solution IRAM 5614/ISO 14244: 2015 Determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio (ISO 14244:2014, IDT)
36 Aprobación en el ISO/TC 34 SC 2 Oleaginous seeds, fruits and oilseed meals IRAM 5614:2008 ISO 14244: 2014 IRAM 5614 / ISO 14244:2015
37 IRAM 5614 / ISO 14244:2015 Determinación de proteínas solubles, en solución de hidróxido de potasio, en harina de soja, harina de colza y pellets de girasol Objeto y campo de aplicación: Establecer el método para la determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio (aprox. ph 12,5) en harina de soja, harina de colza y pellets de girasol.
38 ISO Determination of soluble proteins 1. Objeto y campo de aplicación 2. Documentos normativos para consulta 3. Principio 4. Reactivos 5. Instrumental 6. Muestreo 7. Preparación de la muestra de ensayo 8. Procedimiento 9. Expresión de resultados 10. Precisión 11. Informe ANEXO A: Resultados del ensayo interlaboratorios Bibliografía
39 ISO Determination of soluble proteins 1. Objeto y campo de aplicación Esta norma establece un método para la determinación de proteínas solubles en solución de hidróxido de potasio en harina de soja, harina de colza y pellets de girasol, que luego se ensayan usando el método de Kjeldahl como se especifica en la norma ISO e ISO NOTA IRAM. Se encuentra en estudio la norma IRAM 5625 Partes 1 y 2, que describen la determinación del contenido de nitrógeno total y cálculo del contenido de proteína por el método de Kjeldahl modificado.
40 ISO Determination of soluble proteins 3. Principio La muestra se dispersa en una solución de hidróxido de potasio (ph 12,5 aprox), se agita y se centrifuga. Luego se determina el contenido de nitrógeno en el líquido clarificado por el método de proteína cruda (método Kjeldahl) y se lo relaciona al valor de proteína cruda de la muestra original
41 ISO Determination of soluble proteins 6. Muestreo El muestreo no es parte del método especificado en esta IRAM-ISO. Se recomienda utilizar el método de muestreo que se describe en la ISO 542. Es importante que el laboratorio reciba una muestra que sea representativa y que no haya sido dañada o cambiada durante el transporte y almacenamiento.
42 ISO Determination of soluble proteins 7. Preparación de la muestra Harina de soja. Se procede con la muestra tal cual siempre que su contenido de materia grasa no supere el 5 %. Otros subproductos. Si la muestra tiene un contenido superior al 5 % se la debe desgrasar mediante una extraxión en frío con n-hexano.
43 ISO Determination of soluble proteins 8. Procedimiento 8.1 Se muele la muestra con molino o con otro instrumental que no produzca caleantamiento, hasta que pase en su totalidad por tamiz IRAM 250 µm (para harina de soja y de colza) y de 500 µm para pellets de girasol. 8.2 Se coloca 1,5 g de muestra preparada en un vaso de precipitación de 150 ml. 8.3 Se agregan, con bureta, 75,0 ml de solución de hidróxido de potasio y se agita a la velocidad mínima suficiente para mantener todo el sólido en suspensión durante 20 min.
44 8. Procedimiento ISO Determination of soluble proteins 8.4 Una vez cumplido el período de agitación se transfiere a un tubo o ampolla de centrifugación, y se centrifuga durante 10 min con una aceleración relativa de 800 g.. Se determina el contenido de nitrógeno, (Ns),según el método Kjeldahl descripto en la ISO (IRAM ) o ISO Paralelamente se efectúa la determinación del contenido de nitrógeno, según Kjeldahl, en dos porciones de la muestra de la molienda original (Nt). 10. Cálculos y Expresión de resultados El contenido de proteína soluble se calcula mediante la fórmula siguiente: N s Ps = x 100 N t
45 ISO Determination of soluble proteins Bibliografía de la ISO 14244:2014 [1] ISO , Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results - Part 1: General principles and definitions. [2] ISO , Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results - Part 2: Basic method for the determination of repeatability and reproducibility of a standard measurement method. [3] Evaluation of Protein Solubility as an Indicator of Over processing Soybean Meal. [4] Araba M., & Dale N.M. Poultry Science. Poultry Science Division, University of Georgia, Athens, Georgia, 30602, 69, 1990, pp [5] Solubilidad de la proteína: Indicador del procesado de harina (pasta) de soya, Dr. Nick Dale, Asociación Mexicana de Soya/México A.N. Nº 89, Primera reimpresión, Mayo [6] ASTM D , Standard Guide for Disposal of Laboratory Chemicals and Samples.
46 ISO Determination of soluble proteins Resultados del Ensayo Interlaboratorios IRAM Parámetro Harina de soja 1 Harina de soja 2 Harina de soja 3 Pellets de girasol Harina de colza Laboratorios participantes luego de eliminar los valores fuera de límite Media, w, g/100 g Límite de repetibilidad, r (= 2,8 s r ) Límite de reproducibilid ad, R (= 2,8 s R ) ,24 75,29 51,54 66,27 38,50 3,38 1,73 3,75 5,68 3,82 8,51 7,75 11,73 12,87 12,52
47 Dirección de Normalización
48 DIRECCIÓN DE NORMALIZACIÓN COMITÉ GENERAL DE NORMAS ENERGÍA Y ASUNTOS AMBIENTALES MECÁNICA Y METALURGIA SEGURIDAD Y SALUD OCUPACIONAL TECNOLOGÍA QUÍMICA ELÉCTRICA - ELECTRÓNICA ALIMENTOS Y SALUD CONSTRUCCIONES SISTEMAS DE GESTIÓN DE LA CALIDAD
49 Dirección de Normalización Gerencia Alimentos y Salud
50 Subcomités ACEITES Y GRASAS Creado en 1940 CPA ANÁLISIS SENSORIAL Grupo de trabajo Aceite de oliva AZÚCAR VINOS CEREALES FILTROS DE AGUA INOCUIDAD ALIMENTARIA IRRADIACIÓN DE ALIMENTOS
51 Subcomités CPA LECHE Y PROUUCTOS LÁCTEOS MIEL MICROBIOLOGÍA MARCADORES MOLECULARES AROMATIZANTES Y ESPECIAS TÉ TOXINAS NATURALES YERBA MATE
52 Grupos de trabajo SUBCOMITÉ INOCUIDAD ALIMENTARIA BUENAS PRÁCTICAS DE MANUFACTURA (BPM) Envases y embalajes alimentarios ISO TS SERVICIOS DE ALIMENTOS BPM EN ALIMENTACIÓN ANIMAL BPM EN ESTABLECIMIENTOS ASISTENCIALES HACCP e ISO BPM EN SERVICIOS ALIMENTACIÓN ENTERAL TRAZABILIDAD BUENAS PRÁCTICAS AGRÍCOLAS
53 GERENCIA ALIMENTOS Y SALUD ING. NOELIA LAURA ANTONUCCIO (nantonuccio@iram.org.ar ) LIC. MARÍA CECILIA CALIMÁ (ccalima@iram.org.ar ) LIC. MARÍA DEL CARMEN FERNÁNDEZ (mfernandez@iram.org.ar ) FARM. MARIANA SOLEDAD FUNES (mfunes@iram.org.ar ) BIOQ. ANALÍA SILVANA PURITA (apurita@iram.org.ar ) LIC. MARÍA XIMENA RAMONEDA (xramoneda@iram.org.ar ) ING. VERÓNICA VIVIANA VISCOVICH (vviscovich@iram.org.ar )
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55 Lic. María del Carmen Fernández Gerente Alimentos y Salud Dirección de Normalización mfernandez@iram.org.ar
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