DiaSorin S.p.A. Via Crescentino snc Saluggia (Vercelli) - Italy Tel Fax

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1 DiaSorin S.p.A. Via Crescentino snc Saluggia (Vercelli) - Italy Tel Fax Modificaciones: - Supresiones: 15.4; LIAISON Toxo IgG Avidity II (310790) 1. FINALIDAD DEL ENSAYO El ensayo LIAISON Toxo IgG Avidity II emplea la tecnología de la quimioluminiscencia (CLIA) en un ensayo inmunológico para la determinación de la avidez del enlace de anticuerpos específicos de clase IgG dirigidos contra el Toxoplasma gondii en muestras de suero o plasma humano. El ensayo debe realizarse en el instrumento LIAISON. 2. SUMARIO Y EXPLICACIÓN DEL TEST La toxoplasmosis es una enfermedad infecciosa de gran difusión causada por el parásito protozoario endocelular Toxoplasma gondii. La infección, que afecta tanto a los hombres como a los animales homeotermos, se puede contraer a través de la ingestión de alimentos infectados o contaminados con oocistos, por contagio directo de animales domésticos o por transmisión transplacentaria. En la literatura se habla también de la transmisión del Toxoplasma como consecuencia de transfusiones o trasplante de órganos. En el individuo adulto normal, la toxoplasmosis casi siempre tiene un proceso benigno: puede ser asintomática. Sólo excepcionalmente se manifiestan molestias más serias, tales como miocarditis, hepatitis, pneumonía, meningoencefalitis y retinocoroiditis. La protección de esta infección parasitaria depende generalmente de la inmunidad mediada por células. Por consiguiente, es más frecuente observar un proceso sintomático en los pacientes sometidos a terapia inmunosupresiva. La encefalitis por Toxoplasma se ha demostrado una importante causa de muerte en los pacientes afectados por el síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). Si se adquiere durante la gestación, la toxoplasmosis puede causar graves consecuencias, tales como el aborto espontáneo, parto prematuro y mortalidad del feto, dado que el agente patógeno puede transmitirse al feto por vía transplacentaria. El feto cuya madre ha contraído la infección por Toxoplasma durante el primer trimestre de embarazo desarrolla graves lesiones en el sistema nervioso central que provocan casi siempre la muerte del feto. Si la infección se verifica durante el segundo trimestre de embarazo, el feto está expuesto a riesgos tales como la hidrocefalia, retardo mental o psicomotor, ceguera y calcificaciones cerebrales. Sin embargo la toxoplasmosis es común sobre todo en el tercer trimestre de embarazo, cuando causa retinocoroiditis y otras lesiones oculares, lesiones al sistema nervioso central e infección asintomática latente que puede dar origen a la enfermedad declarada. Los niveles de la IgG anti-toxoplasma aumentan gradualmente y alcanzan un máximo entre dos y cinco meses después de que aparezca la sintomatología clínica. Por lo tanto, el ensayo sérico de la IgG es útil para diferenciar a la población que ha contraído la enfermedad de la no inmune. Esto es particularmente importante para la adopción de medidas profilácticas adecuadas en las mujeres fértiles susceptibles. A causa de la variabilidad o de la ausencia de los síntomas, la detección de la toxoplasmosis durante el embarazo no debe basarse en los resultados clínicos, sino en la serología materna. En efecto es necesario conocer la duración de la toxoplasmosis materna con seguridad para establecer el riesgo de infección congénita sucesiva. Sin embargo, los ensayos convencionales en una sola muestra no permiten una distinción clara entre infección primaria e infección pasada. Además, la presencia de IgM en la circulación materna normalmente está asociada a infección reciente, pero la síntesis de estas inmunoglobulinas puede persistir durante un tiempo variable, a veces incluso largo. En particular, los resultados positivos para la IgM no son fáciles de interpretar, porque la IgM tiene la tendencia de persistir en circulación, también a niveles elevados, después de la infección primaria. Una solución para identificar las infecciones primarias de los cuadros clínicos debidos a reactivación o persistencia de la IgM puede ser la medición de la avidez del enlace entre IgG específica y antígeno. Efectivamente, la fuerza de la interacción entre el anticuerpo presente en una muestra y los diferentes epítopes de un antígeno multivalente (es decir, la avidez del enlace antígeno-anticuerpo) aumenta con la duración de la infección. El ensayo permite discriminar entre la IgG específica anti-toxoplasma gondii de elevada y baja avidez. La detección de anticuerpos IgG de avidez elevada en muestras positivas para IgM excluye la presencia de una infección primaria contraída menos de cuatro meses antes. 26 / 107 ES - 200/ , F - 03/2012

2 3. PRINCIPIO DEL ENSAYO El método para la determinación de la avidez del enlace de IgG específica anti-toxoplasma gondii es un ensayo indirecto basado en el principio de la quimioluminiscencia (CLIA). El antígeno del Toxoplasma gondii se emplea para recubrir las partículas magnéticas (fase sólida) y un anticuerpo monoclonal de ratón anti-igg humana está enlazado a un derivado del isoluminol (conjugado anticuerpo-isoluminol). La presencia de enlaces fuertes entre anticuerpos IgG y Toxoplasma gondii (es decir la avidez de la IgG) en una determinada muestra positiva para IgG se detecta comparando la señal de una muestra de referencia (es decir no tratada) con la señal de la misma muestra tratada con urea, que disocia los enlaces débiles entre IgG y Toxoplasma gondii. Durante la primera incubación, los anticuerpos anti-toxoplasma gondii presentes en los calibradores, en las muestras o en los controles enlazan la fase sólida (muestra de referencia y tratada). Durante la segunda incubación, el agente disociante modifica los enlaces entre antígeno y anticuerpo (sólo muestra tratada). Sólo los anticuerpos de alta avidez permanecen enlazados a la fase sólida, mientras que los anticuerpos de baja avidez son eliminados. Durante la última incubación, el anticuerpo conjugado reacciona con la IgG anti-toxoplasma gondii ya enlazada a la fase sólida (muestra de referencia y tratada). Después de cada incubación, el material no enlazado se elimina mediante un ciclo de lavado. A continuación, se añaden los reactivos starter que inducen una reacción de quimioluminiscencia. La señal luminosa, y por lo tanto la cantidad de conjugado anticuerpo-isoluminol, se mide con un fotomultiplicador en unidades relativas de luz (RLU, relative light units) e indica la concentración de IgG anti-toxoplasma gondii presente en los calibradores, en las muestras o en los controles. El índice de avidez del enlace de la IgG deriva de la relación entre muestra tratada con urea y muestra de referencia. 4. MATERIALES SUMINISTRADOS Integral de reactivos Partículas magnéticas (1,3 ml) Calibrador 1 (2,7 ml) Calibrador 2 (2,7 ml) Tampón B (3,5 ml) Diluyente de muestras (2 x 28 ml) Conjugado (28 ml) Partículas magnéticas recubiertas con Toxoplasma gondii inactivado (cepa RH), obtenido de trofozoítos sometidos a ultrasonidos y a extracción con detergentes, albúmina sérica bovina, tampón fosfato, < 0,1% azida sódica. Suero/plasma humano que contiene niveles bajos de IgG anti-toxoplasma gondii, albúmina sérica bovina, tampón fosfato, 0,2% ProClin 300 y un colorante amarillo inactivo. Suero/plasma humano que contiene niveles altos de IgG anti-toxoplasma gondii, albúmina sérica bovina, tampón fosfato, 0,2% ProClin 300 y un colorante azul inactivo. Tampón borato, urea, 0,2% ProClin 300, conservantes. Albúmina sérica bovina, tampón fosfato, 0,2% ProClin 300 y un colorante amarillo inactivo. Anticuerpos monoclonales de ratón anti-igg humana conjugados con un derivado del isoluminol, albúmina sérica bovina, tampón fosfato, 0,2% ProClin 300, conservantes. Número de ensayos 25 Todos los reactivos se suministran listos para su uso. El orden de los reactivos refleja el orden con el que se han ensamblado los contenedores en el integral de reactivos. Materiales requeridos, pero no suministrados Otros materiales requeridos LIAISON Module (código ). Controles LIAISON Toxo IgG Avidity II LIAISON Starter Kit (código ). (de baja y de alta avidez) (código ). LIAISON Light Check (código ). LIAISON Cleaning Kit (código ). LIAISON Wash/System Liquid (código ). LIAISON Waste Bags (código ). 5. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Sólo para uso diagnóstico in vitro. Todas las unidades de suero y plasma utilizadas para la fabricación de los componentes de este kit se han analizado y se han encontrado no reactivas para la presencia de HBsAg, anti-hcv, anti-hiv-1 y anti-hiv-2. Sin embargo, visto que ningún método de análisis puede asegurar que los agentes patógenos estén ausentes, todo el material de origen humano se deberá considerar potencialmente infeccioso y manipularlo como tal. 6. NORMAS DE SEGURIDAD No coma, beba, fume o se maquille durante la ejecución del ensayo. No pipetee las soluciones con la boca. Evite el contacto directo con el material potencialmente infeccioso usando batas de laboratorio, gafas de protección y guantes desechables. Lávese cuidadosamente las manos al terminar el ensayo. Evite salpicaduras o formación de aerosoles. En caso de que esto sucediera, cada gota de reactivo se debe eliminar con una solución de hipoclorito sódico al 5% y el medio utilizado se deberá tratar como material residuo potencialmente infeccioso. Todas las muestras, los reactivos biológicos del kit y los materiales usados para efectuar el ensayo se deben considerar capaces de transmitir agentes infecciosos; por lo tanto los residuos se deberán eliminar de acuerdo con las reglamentaciones de las agencias autorizadas que tengan jurisdicción sobre el laboratorio, y con las normativas de cada país. El material desechable deberá ser incinerado; los residuos líquidos deberán ser descontaminados con una solución de hipoclorito sódico a una concentración final del 5% durante media hora como mínimo. Cualquier material que pueda ser reutilizado deberá ser tratado en autoclave con un tratamiento de exceso (overkill) (USP 24, 2000, p. 2143). Generalmente se considera que una hora a 121 C es un tiempo de esterilización adecuado; sin embargo se recomienda a cada usuario que verifique la eficacia del ciclo de descontaminación mediante una validación inicial y el uso rutinario de indicadores biológicos. 27 / 107 ES - 200/ , F - 03/2012

3 Los reactivos que contienen ProClin 300 se clasifican como irritantes según las Directivas Europeas aplicables: R 43 - Posibilidad de sensibilización en contacto con la piel. S 24 - Evítese el contacto con la piel. S 37 - Úsense guantes adecuados. S 60 - Elimínense el producto y su recipiente como residuos peligrosos. 7. PREPARACIÓN DEL INTEGRAL DE REACTIVOS Antes de quitar la protección de los contenedores, es esencial agitar horizontalmente el integral de reactivos con delicadeza y sumo cuidado. Evite la formación de espuma. Elimine la protección de los contenedores y gire hacia adelante y hacia atrás la ruedecilla dentada situada por debajo del contenedor de las partículas magnéticas hasta que la suspensión adopte una coloración morena. Este procedimiento da inicio a la resuspensión de las partículas magnéticas. Seque con sumo cuidado la superficie de cada pared para eliminar el líquido residual. Coloque el integral de reactivos en el área de los reactivos del instrumento con la etiqueta de los códigos de barras situada a la izquierda y déjelo agitar durante 30 minutos antes del uso. Durante este tiempo las partículas magnéticas serán mantenidas en agitación automáticamente para garantizar una resuspensión completa. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para cargar las muestras e iniciar el ensayo. 8. CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD DEL INTEGRAL DE REACTIVOS En el momento de su llegada, el integral de reactivos se debe mantener en posición vertical para facilitar la resuspensión de las partículas magnéticas. Si el integral se conserva sellado y se mantiene en posición vertical, los reactivos son estables a 2-8 C hasta la fecha de caducidad. No congele. El integral de reactivos no se debe usar pasada la fecha de caducidad indicada en las etiquetas del kit y del integral. Después de la eliminación de la protección, el integral de reactivos es estable durante cuatro semanas si se conserva refrigerado a 2-8 C o bien en el área de los reactivos del instrumento. 9. RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS El ensayo se puede efectuar en muestras de suero o plasma humano. Se pueden utilizar anticoagulantes como el citrato, el EDTA y la heparina. Recoja la sangre mediante punción venosa, déjela coagular y separe el suero del coágulo lo antes posible. Clarifique por filtración o centrifugación antes del ensayo las muestras que presenten material en suspensión, opalescencia, lipemia o residuos eritrocitarios. No use muestras fuertemente hemolizadas o lipémicas, ni muestras que presenten material suspendido o evidente contaminación microbiana. Elimine las eventuales burbujas de aire que pueda haber antes del ensayo. Si el ensayo se lleva a cabo dentro de los siete días sucesivos a la recogida, las muestras se pueden conservar a 2-8 C. En caso contrario, se deben subdividir en alícuotas congeladas a 20 C o a temperaturas inferiores. Si las muestras han sido descongeladas, agítelas con cuidado antes de realizar el ensayo. Cuatro muestras de diferente reactividad se han conservado durante siete días a 2-8 C y se han sometido a cuatro ciclos de congelación y descongelación. Los resultados no han presentado diferencias significativas. El volumen mínimo de muestra necesario es 180 μl (30 μl de muestra μl de volumen muerto). Sólo las muestras positivas para IgG anti-toxoplasma gondii con LIAISON pueden ser analizadas para la avidez del enlace de la IgG. 10. CALIBRACIÓN El ensayo de los calibradores contenidos en el integral de reactivos permite ajustar la curva predefinida memorizada por el fabricante (curva patrón) en el instrumento como se indica en los códigos de barras que aparecen en la etiqueta del integral de reactivos. El instrumento se debe calibrar en triplicado cada vez que se verifique una de las siguientes condiciones: Se usa un nuevo lote de integral de reactivos o un nuevo lote de reactivos starter. La calibración anterior fue realizada más de dos semanas antes. El instrumento ha sufrido una intervención de asistencia técnica. Los valores de los controles están fuera de los rangos esperados. 11. PROCEDIMIENTO OPERATIVO Para obtener unas prestaciones analíticas ideales hay que respetar estrictamente las instrucciones del manual operativo del instrumento. Cada parámetro del test es identificado mediante el código de barras en la etiqueta del integral de reactivos. En caso de que el lector del código de barras no funcione correctamente, se deberán introducir manualmente los datos convenientes. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para una información más detallada. Las muestras se analizan con ambos protocolos para obtener el resultado final (índice de avidez). El instrumento realiza las operaciones siguientes: Protocolo A 1. Distribuye calibradores, controles o muestras en el módulo de reacción. 2. Distribuye las partículas magnéticas recubiertas. 3. Distribuye el diluyente de muestras. 4. Incuba. 5. Lava con el líquido de lavado. 6. Distribuye el conjugado en el módulo de reacción. 7. Incuba. 8. Lava con el líquido de lavado. 9. Añade los reactivos starter 1 y 2 y mide la luz emitida. 28 / 107 ES - 200/ , F - 03/2012

4 Protocolo B 1. Distribuye controles o muestras en el módulo de reacción (la calibración no está realizada). 2. Distribuye las partículas magnéticas recubiertas. 3. Distribuye el diluyente de muestras. 4. Incuba. 5. Lava con el líquido de lavado. 6. Distribuye el tampón B. 7. Incuba. 8. Lava con el líquido de lavado. 9. Distribuye el conjugado en el módulo de reacción. 10. Incuba. 11. Lava con el líquido de lavado. 12. Añade los reactivos starter 1 y 2 y mide la luz emitida. 12. CONTROL DE CALIDAD El control de calidad se debe realizar (a) por lo menos una vez por cada día de trabajo, (b) cuando se usa un nuevo integral de reactivos, (c) cuando se calibra el kit, o según las disposiciones legislativas y las reglamentaciones vigentes en cada país. Los controles LIAISON se deben analizar individualmente para evaluar las prestaciones del test. Los valores de los controles tienen que estar comprendidos entre los rangos esperados: cada vez que los valores estén fuera de los rangos esperados habrá que volver a efectuar la calibración y probar de nuevo los controles. Si los valores experimentales de los controles estén de nuevo fuera de los rangos predefinidos después de la calibración, habrá que repetir el test usando un frasco de control no abierto. Si los valores de los controles estén fuera de los rangos esperados, los resultados no deben ser notificados. Las prestaciones de otros controles se deben evaluar para asegurar su compatibilidad con este test antes del uso. Por lo tanto es indispensable establecer los intervalos de los valores de los materiales usados para el control de calidad. 13. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS El instrumento calcula automáticamente el índice de avidez de enlace de la IgG específica anti-toxoplasma gondii (relación de la muestra tratada con urea respecto a la muestra de referencia) y clasifica los resultados. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para una información más detallada. Hay que interpretar con atención los resultados de las muestras con concentraciones de IgG anti-toxoplasma gondii por debajo de 15 UI/mL con LIAISON. Se aconseja analizar las muestras tomadas en sucesión al menos dos o tres semanas más tarde para establecer si los niveles de anticuerpos y el índice de avidez aumentan o disminuyen. Intervalo de medición. 0-1,00 de índice de avidez Liaison (Av) de la IgG anti-toxoplasma gondii. Las muestras que contengan concentraciones de IgG anti-toxoplasma gondii superiores al intervalo de medición con LIAISON deben ser pre-diluidas mediante la función Dilute del instrumento antes de realizar el test Toxo IgG Avidity. El factor de dilución aconsejado es 1:10. Si las muestras diluidas 1:10 están todavía por encima del intervalo de medición del test para la avidez, se visualizará el mensaje Invalid Combi Partner (es decir, cálculo imposible); habrá que pre-diluir las muestras 1:20 y repetir el test Toxo IgG Avidity. Las muestras que contengan concentraciones de IgG anti-toxoplasma gondii comprendidas en el intervalo de medición se pueden analizar directamente. Si las muestras presentan niveles por encima del intervalo de medición del test Toxo IgG Avidity, se visualizará el mensaje Invalid Combi Partner (es decir cálculo imposible); las muestras deberán ser pre-diluidas 1:10 y analizadas de nuevo. Los resultados se multiplicarán automáticamente por el factor de dilución para obtener los niveles de anticuerpos de las muestras no diluidas y calcular el índice de avidez. El diluyente de muestras disponible en exceso en el integral de reactivos permite realizar la pre-dilución de 25 muestras. Los resultados de las muestras deben ser interpretados como sigue: Un valor de índice de avidez Liaison de la IgG anti-toxoplasma gondii por debajo de 0,30 se debe clasificar avidez baja. Un valor de índice de avidez Liaison de la IgG anti-toxoplasma gondii comprendido entre 0,30 y 0,40 se debe clasificar avidez moderada. Un valor de índice de avidez Liaison de la IgG anti-toxoplasma gondii igual o por encima de 0,40 se debe clasificar avidez elevada. Las muestras con índice de avidez por encima de 0,950 deben analizarse de nuevo. Si el valor de índice de avidez se confirma, se debe clasificar avidez elevada. Un valor de índice de avidez bajo sugiere la posibilidad de una infección primaria contraída menos de cuatro meses antes. Atención - Sin embargo, un valor de índice de avidez bajo no excluye una infección pasada, ya que una parte de las personas infectadas pueden presentar la persistencia de anticuerpos de clase IgG de baja avidez. Un valor de índice de avidez moderado no excluye la posibilidad de una infección reciente, pero puede indicar una infección pasada con maduración no completa de la avidez de la IgG. Un valor de índice de avidez Liaison por debajo de 0,40 no aporta una indicación clara de infección reciente. Un valor de índice de avidez elevado puede excluir que la infección primaria se haya contraído menos de cuatro meses antes. Los datos serológicos provenientes de la detección de otros marcadores de Toxoplasma gondii pueden aportar informaciones útiles para la interpretación de los resultados. Sin embargo, el diagnóstico de una enfermedad infecciosa no se debe formular en base al resultado de un solo ensayo, sino que éste se debe validar con otras pruebas clínicas, procedimientos diagnósticos y con la opinión del médico. 14. LIMITACIONES DEL ENSAYO Cuando se repite el test de muestras con valores de índice de avidez cerca del umbral de discriminación (0,30 e 0,40 IA), pueden observarse fluctuaciones en la clasificación de las muestras, que dependen de la precisión del sistema. Éste es un comportamiento previsto que no afecta las prestaciones metodológicas del kit. Para obtener resultados fiables es necesario atenerse estrictamente a las instrucciones de utilización y poseer una adecuada técnica manual. La contaminación bacteriana de las muestras o la inactivación mediante calentamiento pueden modificar los resultados del análisis. 29 / 107 ES - 200/ , F - 03/2012

5 15. PRESTACIONES METODOLÓGICAS DEL KIT Especificidad analítica Interferencias. Estudios controlados sobre los factores potencialmente interferentes han demostrado que las prestaciones del test no están influenciadas por anticoagulantes (citrato sódico, EDTA, heparina), hemolisis (hasta 500 mg/dl de hemoglobina), lipemia (hasta 3000 mg/dl de triglicéridos), bilirrubinemia (hasta 20 mg/dl de bilirrubina) o por los ciclos de congelación y descongelación de las muestras Precisión La repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo (es decir las variaciones intra-ensayo e inter-ensayo) han sido determinadas utilizando las muestras de referencia en diferentes concentraciones de analito. La variabilidad observada no ha dado lugar a una clasificación errónea de las muestras. Los resultados se refieren a los grupos de pacientes tomados en consideración; no se trata de prestaciones garantizadas porque pueden existir diferencias entre los diferentes laboratorios. Repetibilidad. Para evaluar la repetibilidad se han analizado veinte replicados en la misma sesión analítica. Repetibilidad A B C D E Número de determinaciones Índice de avidez medio 0,091 0,101 0,181 0,361 0,432 Valor mínimo 0,079 0,086 0,145 0,320 0,353 Valor máximo 0,111 0,126 0,240 0,418 0,521 Coeficiente de variación (%) 8,5 10,5 14,5 6,9 8,80 Reproducibilidad. Para evaluar la reproducibilidad se han analizado veinte replicados en días diferentes (una o dos sesiones analíticas al día). Los ensayos se realizaron en dos sitios, en el laboratorio donde se desarrolló el kit (sitio 1) y en un laboratorio independiente (sitio 2). Reproducibilidad SITIO 1 SITIO 2 F G H I J F H I Número de determinaciones Índice de avidez medio 0,132 0,385 0,477 0,555 0,199 0,133 0,493 0,569 Valor mínimo 0,101 0,340 0,354 0,483 0,140 0,086 0,414 0,449 Valor máximo 0,182 0,455 0,554 0,640 0,264 0,179 0,628 0,710 Coeficiente de variación (%) 19,8 6,8 9,5 7,8 16,1 18,7 11,6 12, Veracidad La veracidad del ensayo ha sido controlada mediante el test de dilución. Test de dilución. Se han analizado diluciones en serie de cuatro sueros de concentración elevada de IgG anti-toxoplasma gondii tanto de alta como de baja avidez realizadas con el diluyente de muestras. Los valores de índice de avidez de la IgG anti-toxoplasma gondii medidos antes y después de la dilución de las muestras no han puesto de relieve discrepancias en la clasificación de las muestras. Avidez Dilución Índice de avidez medido % Coeficiente de variación Avidez Dilución Índice de avidez medido % Coeficiente de variación 1:2 0,495 1:2 0,525 Elevada 1:4 0,538 11,3 Elevada 1:4 0,515 5,1 1:8 0,576 1:8 0,519 1:16 0,583 1:16 0,585 1:4 0,146 1:2 0,139 1:8 0,226 1:4 0,109 1:16 0,176 1:8 0,116 Baja 1:32 0,148 19,0 Baja 1:16 0,081 17,9 1:64 0,158 1:32 0,108 1:128 0,170 1:64 0,106 1:256 0,176 1:128 0,110 1:256 0, / 107 ES - 200/ , F - 03/2012

6 15.4. Datos clínicos Se han analizado 135 muestras provenientes de diversas poblaciones positivas para IgG anti-toxoplasma gondii (pacientes afectados por infección primaria por Toxoplasma gondii, sujetos con infección pasada por Toxoplasma gondii, sujetos afectados por infección pasada por Toxoplasma gondii y con persistencia de la IgM anti-toxoplasma gondii). Los resultados del ensayo se han definido tomando en consideración los resultados obtenidos con el método de referencia y la concordancia con la clasificación clínica del paciente por parte del encargado de la validación. La clasificación clínica y el seguimiento del paciente, cuando estuvo disponible, así como también el ensayo de otros marcadores de Toxoplasma gondii, se han utilizado para validar el resultado clínico. En la población estudiada, que ha probablemente contraído la infección menos de cuatro meses antes, ninguna muestra ha resultado de avidez elevada, una muestra ha resultado de avidez moderada y 59 muestras han resultado de avidez baja. La concordancia diagnóstica, evaluada respecto a la condición clínica, ha sido de 100% (intervalo de confianza al 95%: 94,04-100%). En la población estudiada, que ha contraído la infección más de cuatro meses antes, 2 muestras han resultado de avidez baja, 2 muestras han resultado de avidez moderada y 71 muestras han resultado de avidez elevada. La concordancia diagnóstica, evaluada respecto a la condición clínica, ha sido de 94,67% (intervalo de confianza al 95%: 86,90-98,53%). Los resultados obtenidos son los siguientes: Condición clínica Avidez Liaison Toxo IgG avidity Método de referencia Elevada 0 0 Infección primaria por Toxoplasma y seguimiento Moderada 1 0 Baja Infección pasada por Toxoplasma Elevada con persistencia de la IgM Moderada 1 2 Baja 2 0 Elevada Infección pasada por Toxoplasma Moderada 1 2 Baja / 107 ES - 200/ , F - 03/2012

7 LIAISON Control Toxo IgG Avidity II (310791) 1. Finalidad del ensayo. Los controles LIAISON Control Toxo IgG Avidity II (310791) deben ser usados en el ensayo de quimioluminiscencia (CLIA) LIAISON para verificar la fiabilidad de los ensayos. Las prestaciones metodológicas de los controles LIAISON no son definidas con otros ensayos o instrumentos automáticos. 2. Materiales suministrados Control de baja avidez (2 x 0,6 ml) Control de alta avidez (2 x 0,6 ml) Suero/plasma humano que contiene IgG anti-toxoplasma gondii con baja avidez, estabilizado en tampón PBS, albúmina sérica bovina y 0,2% ProClin 300. Suero/plasma humano que contiene IgG anti-toxoplasma gondii con alta avidez, estabilizado en tampón PBS, albúmina sérica bovina, 0,2% ProClin 300 y un colorante amarillo inactivo. Todos los reactivos se suministran listos para su uso. El intervalo de índice de avidez para cada control está impreso en el certificado de análisis e indica los límites definidos por DiaSorin para los valores de los controles obtenidos con test fiables. Cada laboratorio es responsable de adoptar límites diferentes para cumplir exigencias específicas. Los controles no son específicos para lote de kit. Se pueden intercambiar entre sí aunque pertenezcan a lotes diferentes. 3. Conservación y estabilidad. En el momento de su llegada, los controles se deben mantener a 2-8 C en posición vertical para evitar el contacto de la solución con la tapa del frasco. No congele. Si los controles se conservan sellados y en posición vertical, ellos son estables a 2-8 C hasta la fecha de caducidad. Después de la apertura, los controles son estables durante cuatro semanas si se conservan refrigerados a 2-8 C entre dos usos sucesivos. Evite la contaminación bacteriana de los controles. Los controles no se deben usar pasada la fecha de caducidad indicada en las etiquetas de los frascos. En el momento del uso, acondicione los controles a temperatura ambiente (20-25 C) antes de la apertura de los frascos y déjelos en el área de las muestras del instrumento sólo durante el tiempo requerido para realizar el test de control de calidad. Después del uso, tape los frascos lo antes posible y manténgalos a 2-8 C en posición vertical. El volumen muerto es 400 μl. Toxo-Av2-es.fm LIAISON Control Toxo IgG Avidity II (310791) 32 / 107 ES - 200/ , F - 03/2012