Farmacología y Farmacoterapia I Grado en Farmacia - UAH. Tema 7 (curso ) [ L] OCUPACIÓN
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- Sebastián Vargas Acosta
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1 Farmacología y Farmacoterapia I Grado en Farmacia - UAH Tema 7 (curso ) Análisis cuantitativo de las relaciones concentración-efecto y dosis-respuesta. Medida de la afinidad, eficacia y grado de antagonismo. RESPUESTAS GRADUALES Efecto (escala arbitraria) % efecto máximo log M [agonista] Gradación del EFECTO en función de la concentración de agonista añadida [agonista] Prof. Federico Gago Badenas Universidad de Alcalá (federico.gago@uah.es) Resultados de un típico experimento farmacológico en el que se mide la dependencia de un efecto biológico (por ejemplo, contracción, secreción, cambios de conductancia a iones, o producción de un segundo mensajero) con la concentración de agonista añadida. Entre adiciones sucesivas de agonista existe un período de de varios minutos. La curva sigmoidea de la gráfica representa cada respuesta individual como porcentaje del efecto máximo en función del logaritmo de cada concentración de agonista utilizada. Teoría OCUPACIONAL simple: el efecto es proporcional a la fracción de receptores ocupados The general aim... has been to determine the extent to which the effects produced by drugs on cells can be interpreted as processes following known laws of physical chemistry k on Ligando + Receptor Ligando-Receptor EFECTO k off k off k on K d = = [Ligando] [Receptor] [Ligando-Receptor] Alfred J. Clark (1937) General Pharmacology: Heffter s Handbuch d. exp. Pharmacologie (Ergband 4), Springer. ligando + receptor k on off k ligando receptor [ ligando] [ receptor] k = [ ligando receptor] k on off [ ligando] [ receptor] koff = = Kd [ ligando receptor] kon ocupación fraccional = [ receptor] En el equilibrio (estado estacionario): [ ligando receptor] [ receptores totales] = [ ligando receptor] [ receptor] + [ ligando receptor] K [ ligando receptor] [ ligando receptor] [ ligando] [ receptorestotales] = d log [concentración] Isoterma de adsorción de Langmuir, que representa la fijación del ligando a los receptores en función de la concentración de ligando añadida. La hipérbola resultante se transforma en una curva sigmoidea en la representación semilogarítmica. En ocasiones se normaliza el eje de abscisas dividiendo las concentraciones por K d, de modo que éstas se expresan como múltiplos de la constante de disociación. = K d ocupación 100% 50% [ ligando] + [ ligando] OCUPACIÓN [ LR] = Detalles y cálculos adicionales en: K d saturación [ L] [ R ] K [ L] + T d
2 La constante de disociación (K d ): tiene unidades de concentración (generalmente nanomolar, nm): aquella que da lugar a una ocupación del 50% de los receptores totales es inversamente proporcional a la afinidad, i.e. la afinidad es mayor cuanto menor es la K d sirve para comparar las afinidades de distintos ligandos por un mismo receptor y la afinidad de un ligando por distintos receptores define la potencia de los antagonistas. Comparación de dos antagonistas: el más potente es aquel que demuestra mayor afinidad por el R % receptores ocupados X Y K d de X: 10-8 M = 10 nm K d de Y: 10-6 M = 1000 nm 0 [antagonista] µm Comparación de dos antagonistas: el más potente es aquel que demuestra mayor afinidad por el R Representación semilogarítmica de las curvas concentración-efecto para una serie de fármacos Fracción de receptores ocupados X Y K d de X: 10-8 M = 10 nm K d de Y: 10-6 M = 1000 nm % de efecto máximo log [concentración M] Fármaco A Fármaco B Fármaco C Fármaco D Fármaco E Cada punto viene representado por la media de varios experimentos ± la desviación estándar. La línea horizontal punteada representa un efecto igual al 50% del efecto máximo y sirve para calcular la concentración eficaz 50 (CE 50 ). [antagonista] µm Las potencias relativas serían en este caso: A > C > B D >> E.
3 50% efecto máximo CE50: cuanto menor es este valor, mayor es la potencia [concentración de fármaco] (M) N.B.: para los agonistas, la potencia no depende solo de la afinidad sino también de la eficacia. Multiplicidad de receptores colinérgicos muscarínicos Desplazamiento a la derecha de la curva concentraciónefecto de un agonista A por parte de un antagonista competitivo reversible B EFECTO (% del efecto máximo) Contracción miometrio (% de pre.) Efecto relajante de una serie de fármacos sobre una tira de musculatura uterina A solo A en presencia de una determinada concentración de 60 razón de dosis = % efecto máximo para conseguir el mismo efecto (la mitad del efecto máximo) es necesario multiplicar por 100 la concentración del agonista 0 5 tipos de receptores median las acciones muscarínicas de la acetilcolina. ganglios simpáticos glándula sublingual glándula parótida pared estomacal Pirenzepina antagonista colinérgico muscarínico selectivo de receptores M1 N-metilescopolamina antagonista colinérgico muscarínico no selectivo [A] µm diferente afinidad = heterogeneidad B Distintos antagonistas pueden presentar afinidades (pkd = log Kd) diferentes sobre estos tipos de receptores
4 Características estructurales semejantes de los receptores M 2 y M 3 OCUPACIÓN M3 M2 T. Kobayashi et al. Nature 482, (2012) B. Kobilka et al. Nature 482, (2012) doi: /nature10867 doi: /nature10867 INHIBICION DE LA CONTRACCION INTESTINAL POR ESTIMULO ELECTRICO (CI 50 ) EFECTO Balas mágicas o perdigones mágicos? Representación gráfica de los valores relativos de afinidad (K i ) por diversos receptores de una serie de psicofármacos, incluyendo antipsicóticos atípicos (clozapina, aripiprazol, ziprasidona, zotepina, quetiapina, olanzapina, risperidona) y típicos (haloperidol, clorpromazina) (nm) National Institute of Mental Health (USA) Psychoactive Drug Screening Program: Base de Datos PDSP ( Fármacos que utilizan mecanismos de acción que no requieren equilibrio Fármaco Diana Tipo K off Aspirina COX-1 Irreversible Irreversible Omeprazol, lansoprazol ATPasa H +,K + Irreversible Irreversible Ac. clavulánico, sulbactam β-lactamasa Irreversible Irreversible Selegilina, tranilcipromina MAO Irreversible Irreversible Vigabatrina GABA transaminasa Irreversible Irreversible Celecoxib, valdecoxib COX-2 Pseudoirreversible Rivastigmina Acetilcolinesterasa Pseudoirreversible > 48 h -1 Finasterida 5α-reductasa Basada en mecanismo Formestano Aromatasa Basada en mecanismo Candesartán, telmisartán Receptor angiotensina II (AT1) Antagonismo insuperable ~ 100 min -1 Tiotropio Receptor muscarínico M 3 Antagonismo insuperable ~ 35 h -1 Desloratadina Receptor de histamina H 1 Antagonismo insuperable > 6 h -1 Granisetrón Receptor de serotonina 5-HT 3 Antagonismo insuperable ~ 15 min -1 N.b.: el inverso de la K off es el tiempo de residencia D. C. Swinney, Nature Rev. Drug. Discov. (2004) 3:
5 EJEMPLOS DE FÁRMACOS QUE SE UNEN COVALENTEMENTE A SU DIANA DESARROLLADOS EN LOS ÚLTIMOS 100 AÑOS RESPUESTAS DE TODO O NADA % animales que responden 100% Efecto deseado DE 50 Dosis requerida para producir el efecto deseado en el 50% de los animales tratados log [F] RESPUESTA DE TODO O NADA: pérdida del reflejo de enderezamiento en ratas por un anestésico general La pérdida de conciencia en los seres humanos tiene lugar en un intervalo muy estrecho de concentraciones anestésicas (a) y se correlaciona con la pérdida del reflejo de enderezamiento en roedores (b). General anaesthesia: from molecular targets to neuronal pathways of sleep and arousal Nicholas P. Franks Nature Reviews Neuroscience 9, (May 2008)
6 RESPUESTAS DE TODO O NADA RESPUESTAS DE TODO O NADA % pacientes que responden Efecto terapéutico Indice terapéutico Efecto tóxico Porcentaje de pacientes que responden al fármaco Ventana terapéutica Respuesta terapéutica Efectos adversos CE 50 o DE 50 DE 50 DT 50 Concentración de fármaco en plasma (ng/ml) o Dosis administrada (mg/kg) escala logarítmica Distribución de frecuencias vs. Distribución acumulativa de frecuencias Índice terapéutico (en animales)* *Este índice en seres humanos se calcula utilizando la DT 50 en lugar de la DL 50 DE 50 vs. DE 99
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