CONGRESO EVELAM 2013 DICIEMBRE DE 2013 CANCÚN, Q.R. BIOPSIA MUSCULAR Dr. Luis A. Ruano Calderón Clínica Neurológica Hospital General de Durango Secretaria de Salud de Durango Durango, México
BIOPSIA MUSCULAR Es uno de los procedimientos diagnósticos más frecuentemente utilizado en la evaluación de miopatias. La utilidad y campo diagnóstico varia de 36% a 69% de casos.
BIOPSIA MUSCULAR Estudio necesario para establecer diagnóstico definitivo en miopatías Es indispensable que sea precedida por una historia clínica completa, y estudios neurofisiológicos cuando sea necesario Poco útil en enfermedades de placa neuromuscular, salvo síndromes miasténicos y en miotonias El estudio histopatológico puede ser complementado con estudios bioquímicos o genéticos.
Diagnóstico de miopatias Pacientes con diagnóstico de miopatía Datos epidemiológicos Historia Clínica BIOPSIA MUSCULAR Examen físico detallado EMG+CPK
Biopsia muscular Indicaciones. Presencia de síntomas negativos y/o positivos. CPK elevada. EMG: patrón miopático. Enf. sistémica que involucra al músculo.
Biopsia muscular: utilidad Inflamatorias Polimiositis Dermatomiositis Miositis por cuerpos de inclusión Vasculitis Miofascitis Mialgia eosinofilia HIV HTLV-I Triquinosis Toxoplasma Cisticercosis /equinococosis /tripanosomiasis. No inflamatorias Distrofia muscular Mitocondrial MCI Miotónica proximal Congénita Metabólica.
Biopsia muscular: NO indicada Diagnóstico por neurofisiología. MG, trastornos miotónicos. Diagnóstico por estudio genético. FSH Neuropatía periférica. Excepto en enfermedades sistémicas que produzca neuropatía y miopatía.
Biopsia muscular Buena realización y preparación. Evita una 2a Bx. Conocer las indicaciones. Evita Biopsias innecesarias. EMG previa ayuda.
BIOPSIA MUSCULAR Selección del músculo a biopsiar: - Enfermedad crónica afección moderada - Enfermedad aguda o subaguda afección moderada o severa - Específicos: bíceps, deltoides, quadriceps - Estudios de imagen: TAC, RM - Evitar: EMG, inyecciones, trauma.
BIOPSIA MUSCULAR
BIOPSIA MUSCULAR Abierta Invasiva Costosa Necesidad de infraestructura Necesidad de personal entrenado (procesamiento e interpretación)
BIOPSIA MUSCULAR
BIOPSIA MUSCULAR
BIOPSIA MUSCULAR Técnica abierta Proceso inmediato de montaje y congelación Muestras para: Tinciones histológicas Bioquímica Estudios inmunogenéticos Parafina Microscopía electrónica
BIOPSIA MUSCULAR Técnica: - Tinciones cortes en frío (isopentano) - Reacciones enzimáticas cortes en frío - Inmunohistoquímica cortes en frío o parafina - Estudios bioquímicos e inmunogenéticos congelado en N - Microscopia electrónica glutaraldheido - Inflamación parafina
BIOPSIA MUSCULAR
Tinciones histológicas BIOPSIA MUSCULAR H/E TG PAS ORO
Biopsia muscular Lesiones morfológicas: - modificación de tamaño de fibras - aumento y/o centralización nuclear - necrosis - regeneración
BIOPSIA MUSCULAR Datos a Valorar: - Alteración del tamaño de las fibras: atrofia, hipertrofia - Forma de las fibras: redondeadas, anguladas - Centralización nuclear ( > 3% sugiere miopatía) - Imagen de necrosis, fagocitosis, regeneración - Cambios crónicos distróficos: fibrosis, infiltración grasa - Presencia de vacuolas - Depósitos anormales: glucógeno, lípidos, amiloide - Infiltrados inflamatorios: tipo celular y localización - Alteraciones de la arquitectura intrafibrilar (reacciones enzimáticas): alteraciones mitocondriales, cuerpos centrales, fibras en diana, fibras borradas, fibras lobuladas, cuerpos citoplasmáticos - Predominio o atrofia selectiva de un tipo de fibras
Morfología general Núcleo.- posición y número Citoplasma Hematoxilina/eosina
Morfología Agregados Mitocondrias Agregados tubulates Fibras rojas rasgadas Tricrómico modificado
BIOPSIA MUSCULAR Tinciones histológicas
H/E Fibras hipertrofiadas Distrofia muscular
H/E Tamaño de las fibras (atrofia musculare espinal)
H/E Vacuolas Vacuolas bordeadas
H/E Fibras en diana NEUROPATIA Fibras anguladas
H/E Miofascitis Polimiositis
H/E Centralización nuclear Necrosis de fibra
Tricrómico modificado Normal Acúmulos anormales (Bastones) Fibras rojas rasgadas
PAS Cuerpos de Lafora
Rojo Oleoso (ORO)
Biopsia muscular Reacciones enzimáticas: - diferenciación del tipo de fibras - demostración de acúmulos anormales intrafibrilares - ausencia de reacción focal o completa
Reacciones enzimáticas: BIOPSIA MUSCULAR DPNH SDH
DPNH SDH Refleja concentración de mitocondrias Tipo de fibras (I.- obscuras / II.- claras) Tiñe mitocondrias
MENADION FOSFORILASA Tiñe túbulos Enzima metabólica
ATPasa ATPasa 4.35 ATPasa 4.63 ATPasa 9.4 Tipo I.- obscuras Tipo II.- claras Tipo I.- obscuras Tipo II.- claras Tipo I.- claras Tipo II.- obscuras
Enzima mitocondrial COX
SDH DPNH fibras rojas rasgadas (fibras azules rasgadas) Central core Lobuladas En diana
Diferencia en tamaño por atrofia II ATPasa 9.4
MIOPATIAS Congénitas: - Centronuclear - Central core - Nemelínica
MIOPATIAS Metabólicas: - Mitocondriales - Lípidosis - Glucogenopatías
MIOPATIAS Inflamatorias: - Polimiositis - Dermatomiositis - Miositis por cuerpos de inclusión
MIOPATIAS Distrofias: - Cinturas - FSH - Miotónica - Distales
BIOPSIA MUSCULAR Distrofia Mitocondriopatía Inflamatoria Inmunohistoquímica de proteínas Estudios bioquímicos de cadena respiratoria Inmunohistoquímica de células inflamatorias
BIOPSIA MUSCULAR Distrofia de cinturas Inmunohistoquímica de proteínas musculares
BIOPSIA MUSCULAR (Inmunohistoquímica)
BIOPSIA MUSCULAR (Inmunohistoquímica)
Biopsia muscular: Inmunoensayos comerciales. LG 2D LG 2E LG 2C LG 2F LG 2B Miyoshi LG 2A Miofibrilar Distrofia congénita Emery-Dreifuss LG 1B a-sarcoglicano b-sarcoglicano g-sarcoglicano d-sarcoglicano Disferlina Disferlina Calpaina Desmina Merosina Emerina Laminina A/C
Biopsia muscular Estudios bioquímicos: - deficiencia o ausencia de enzimas específicas - cuantificación de complejos de cadena respiratoria - cuantificación de proteínas estructurales de la fibra muscular.
BIOPSIA MUSCULAR Microscopia electrónica: - características ultraestructurales - NO siempre indicada - Miopatías congénitas - Enfermedades mitocondriales - Apoyo: miositis por cuerpos de inclusión
BIOPSIA MUSCULAR Microscopia electrónica
BIOPSIA MUSCULAR Bastones
BIOPSIA MUSCULAR Utilidad diagnóstica Según sospecha clínica Indicación precisa Toma adecuada Proceso adecuado e inmediato Panel de técnicas completo (mínimo indispensable)
GRACIAS laruanoc@hotmail.com