FERRITINA TURBIQUEST PLUS

Transcripción

1 FERRITINA TURBIQUEST PLUS Instrucciones de Uso Ref.:334 Finalidad. Sistema para la determinación cuantitativa de ferritina en muestras de suero por inmunoturbidimetría. [Solamente para uso diagnóstico in vitro.] Principio. Partículas de látex estabilizadas y recubiertas con anticuerpo anti-ferritina humana son aglutinadas cuando ferritina está presente en la muestra. La intensidad de la aglutinación, medida en absorbancia, está relacionada con la cantidad de ferritina, cuya concentración se obtiene a través de una curva de calibración. Características del sistema. El producto Ferritina Turbiquest Plus es un método inmunoturbidimétrico fácilmente aplicable a analizadores automáticos capaces de medir absorbancias a 540 nm (530 a 550 nm), permitiendo la realización de la medición junto con los demás exámenes bioquímicos, sin necesidad de la utilización de instrumentos especiales. Además, la medición inmunoturbidimétrica presenta un excelente desempeño operacional y permite la evaluación de un gran número de muestras en corto intervalo de tiempo. Todas estas características agregan mayor practicidad y seguridad al usuario, además de propiciar mayor agilidad al proceso analítico. El Calibrador Ferritina es una preparación liofilizada trazable al Patrón Internacional de Referencia de Organización Mundial de Salud (OMS): Second International Ferritin Standard for (85/578) de OMS (1992). Metodología. Reactivos Inmunoturbidimetría. 1 Reactivo 1 - Listo para su uso. Almacenar entre 2-8 ºC. No congelar. Contiene tampón tris mm ph 8,2 y azida sódica 14,6 mmol/l Reactivo 2 - Listo para su uso. Almacenar entre 2-8 ºC. No congelar. Suspensión de partículas de poliestireno recubiertas con anticuerpo antiferritina humana y azida sódica 14,6 mmol/l. 3. Calibrador Ferritina - Almacenar entre 2-8 ºC. Verificar la concentración en el rótulo del frasco. Preparación liofilizada que contiene ferritina en material de origen humano y azida sódica 14,6 mmol/l. El Calibrador Ferritina debe ser procesado exactamente como propuesto en las instrucciones de las aplicaciones automáticas. Los reactivos deben permanecer fuera de la temperatura de almacenamiento solamente por el tiempo necesario para obtenerse el volumen a ser utilizado. Los reactivos no abiertos, almacenados en las condiciones indicadas, son estables hasta la fecha de caducidad impresa en el rótulo. Durante la manipulación, los reactivos y el calibrador están sujetos a contaminaciones de naturaleza química y microbiana que pueden causar reducción de su estabilidad. Homogeneizar los reactivos con suavidad por inversión antes de utilizarlos. Evitar formación de espuma. El Calibrador Ferritina contiene derivados de sangre humana y fue ensayado para determinar la presencia de HBsAg, anticuerpos anti-hcv y anti-hiv presentando resultados negativos. A pesar de haber sido utilizados tests validados y aprobados, ninguno de ellos puede asegurar que productos derivados de la sangre humana estén libres de agentes infectivos. Por lo tanto, los cuidados habituales de seguridad deben ser aplicados en la manipulación del producto, que no debe ser pipeteado con la boca. Se recomienda manipularlo como siendo potencialmente infectivo. El congelamiento de los reactivos 1 y 2 altera irreversiblemente la funcionalidad de los mismos. Los cuidados habituales de seguridad deben ser aplicados en la manipulación de los reactivos, los que no deben ser pipeteados con la boca. Los reactivos contienen azida sódica que es tóxica. Se debe tener cuidado para evitar la ingestión y en caso de contacto con los ojos lavar inmediatamente con gran cantidad de agua y buscar auxilio médico. La azida sódica puede formar compuestos altamente explosivos con las cañerias de plomo y de cobre. Por lo tanto, utilizar grandes volúmenes de agua para descartar los reactivos. Materiales necesarios y no provistos 1. Analizador capaz de medir con exactitud absorbancia entre 530 y 550 nm. 2. Precauciones y cuidados especiales Control - Qualitrol Plus Ferritina (Ref. 344) - Labtest. Muestra Usar solamente suero. El analito es estable por 2 días entre 2-8 ºC y hasta 30 días en temperatura igual o inferior a ºC negativos, almacenado en recipiente apropiado para congelamiento. Asegurar que las muestras estén descongeladas y homogeneizadas antes de su utilización. No usar muestras con señales de contaminación o muestras congeladas y descongeladas repetidas veces. 01 Español - Ref.: 334

2 Se debe crear un Procedimiento Operacional Estándar (POE) que establezca procedimientos adecuados para la recolección, preparación y almacenamiento de la muestra. Destacamos que los errores debidos a la muestra pueden ser mucho mayores que los errores ocurridos durante el procedimiento analítico. Punto de la calibración Calibrador Ferritina ( µ L) Solución de NaCl ( µ L) Factor de dilución ,7 133, ,3 66, ,333 0,666 1,0 Como ningún ensayo conocido puede asegurar que las muestras de sangre no transmitan infecciones, todas ellas deben ser consideradas como potencialmente infectivas. Por lo tanto, al manipularlas se debe seguir las normas establecidas para bioseguridad. Para descartar los reactivos y el material biológico, sugerimos aplicar las normas locales, estatales o federales de protección ambiental. Interferencias Concentraciones de bilirrubina hasta 40 mg/dl, triglicéridos hasta 250 mg/dl, hemoglobina hasta 500 mg/dl y factor reumatoide hasta 725 UI/mL no producen interferencias significativas. Preparo del calibrador. Utilizando una pipeta volumétrica calibrada, añadir 3,0 ml de agua calidad grado reactivo al contenido del frasco. Recolocar el tapón de caucho, reposar durante 10 minutos y homogeneizar por inversión, con suavidad, hasta completa disolución del material. Evitar la formación de espuma. Después de la reconstitución, el Calibrador Ferritina es estable 30 días, almacenado entre 2-8 ºC bien cerrado, cuando no hubiera contaminación química o microbiana. Estable 90 días a ºC negativos cuando almacenado en recipiente apropriado para congelamiento. Para evitar congelamientos y descongelamientos repetidos, se sugiere separar el material en partes. Antes de utilizar, homogeneizar con suavidad y retirar la cantidad necesaria a emplear. Tapar inmediatamente y almacenar entre 2-8 ºC. La existencia de burbujas en el calibrador o cualquier muestra presente en la cubeta de muestras del equipo es causa común de errores en la determinación del analito. Procedimiento Ver el Protocolo de Automación para el Sistema Labmax 240. Están disponibles aplicaciones para otros sistemas automáticos y semiautomáticos. Calibración. La concentración del analito en el material Calibrador Ferritina es trazable al Patrón Internacional de Referencia de OMS: Second International Ferritin Standard for (85/578). Calibración de 4 puntos Punto 0: NaCl 150 mm (0,85%). Punto 1 al 3: Calibrador Ferritina - Ref preparado según el ejemplo a continuación. Preparar las diluciones de Calibrador Ferritina utilizando solución de cloruro de sodio 150 mm (0,85%) como diluyente, según las relaciones descriptas. La concentración de ferritina en cada dilución resulta de multiplicar el valor de ferritina del calibrador por el factor de dilución correspondiente según indicado en la tabla. La existencia de burbujas en el calibrador o cualquier muestra presente en la cubeta de muestras del equipo es causa común de errores en la determinación del analito. Intervalo de calibraciones Cuando el control de calidad lo indique. Cuando se utilice un nuevo lote de reactivos. Cuando se utilicen nuevos frascos de reactivos de un mismo lote, en caso de que una nueva calibración haya sido realizada durante la utilización del frasco anterior. Intervalo operacional. El intervalo de medición es de 5 a 600 ng/ml. Para concentraciones mayores, diluir la muestra con NaCl 150 mmol/l (0,85%), realizar nueva determinación y multiplicar el resultado obtenido por el factor de dilución. Controle interno de calidad. El laboratorio debe mantener un programa de control interno de calidad que defina claramente los reglamentos aplicables, objetivos, procedimientos, criterios para especificaciones de calidad y límites de tolerancia, acciones correctivas y registro de las actividades. Deben utilizarse materiales de control para monitorear la imprecisión de la medición y los desvíos de la calibración. Se recomienda utilizar los productos de la línea Qualitrol Plus - Labtest para control interno de calidad en ensayos de inmunoturbidimetría. Intervalo de referencia. Estos valores deben ser usado solamente como orientativos. Se recomienda que cada laboratorio establezca, en la población atendida, su propio intervalo de referencia. Niños y Adolescentes 1 Edad Recién nascido ng/ml 25 a 0 1 mes 0 a a 5 meses 50 a 0 6 meses a 15 años 7 a 142 Edad Adulto Edad Adulto Hombres Mujeres ng/ml 30 a 2 ng/ml a 110 Conversión: Unidades convencionales (ng/ml) x 1 = Unidades SI ( µ g/l) 02 Español - Ref.: 334

3 Características de desempeño Estudios de recuperación. En una muestra con concentración de ferritina igual a 94,6 ng/ml se añadió diferentes cantidades del analito, obteniéndose los siguientes resultados: Concentración (ng/ml) Inicial Añadida Esperada Encontrada 94,6 94,6 42,1 86,1 Los errores sistemáticos proporcionales obtenidos en valores de 30 ng/ml y 400 ng/ml son 0,55 ng/ml y 7,32 ng/ml, respectivamente. El error sistemático medio (1,83%) cumple con la especificación deseable ( ± 5%) basada en el Error Sistemático Total de los 2,3 componentes de la variación biológica (VB). Estudios de comparación de métodos. El método propuesto fue comparado con método de inmuensayo de metodología semejante, habiéndose obtenido los siguientes resultados: Número de muestras Ecuación de regresión Coeficiente de correlación 136,7 180,7 Utilizando la ecuación de regresión, el error sistemático medio (bias) es igual a 4,05% y 0,1% en concentración igual a 45 ng/ml y 1 ng/ml, respectivamente. Los resultados del estudio comparativo cumplen con la especificación deseable para Error Sistemático Total ( ± 5,0%) basada en los componentes de la variación biológica (VB). Estudios de precisión. Los estudios de precisión fueron realizados utilizando tres muestras con concentraciones de 33, 114 y 290 ng/ml ,3 174,6 Método Comparativo Recuperación (%) 99,7 96,6 Método Labtest 144 Método Labtest (ng/ml) = 0,977 x Comparativo + 2,857 0,988 La tres muestras evaluadas cumplen con la especificación deseable para Coeficiente de Variación ( 7,5%) basada en los componentes de la VB. El error total (error aleatorio + error sistemático) estimado en la concentración de 45 y 1 ng/ml es 14,4% y 4,9%, respectivamente. Los resultados indican que el método cumple con la especificación deseable para Error Total ( 17,3%) basada en los componentes de la VB. Efecto prozona. No fue observado efecto prozona en muestras con concentración de ferritina hasta 9000 ng/ml. Sensibilidad metodológica. Utilizándose la absorbancia mínima detectable como parámetro, la sensibilidad fotométrica en Labmax 240 es 1,6 ng/ml que corresponde a una diferencia de absorbancia igual a 0,001. Efectos de la dilución de la matriz. Una muestra de concentración conocida fue utilizada para evaluar la respuesta del sistema en diluciones de la matriz con NaCl 150 mmol/l. Se ha encontrado una recuperación de 100,2 %. El error sistemático medio (0,2%) cumple con la especificación deseable para el Error Sistemático Total ( ± 5,0%) basada en los componentes de la VB. Observaciones 1. La limpieza y el secado adecuados del material utilizado son factores fundamentales para la estabilidad de los reactivos y obtención de resultados correctos. 2. El laboratorio clínico tiene por objetivo proveer resultados exactos y precisos. La utilización de agua de calidad inadecuada es una causa potencial de errores analíticos. El agua utilizada en el laboratorio debe tener la calidad adecuada para cada aplicación. Así, para preparar reactivos, utilizar en mediciones y para el uso en el enjuague final de la vidriería, el agua debe tener resistividad 1 megaohm.cm o conductividad 1 microsiemens/cm y concentración de silicatos <0,1 mg/l. Cuando la columna desionizadora está con su capacidad saturada ocurre liberación de varios iones, silicatos y sustancias con gran capacidad de oxidación y reducción que deterioran los reactivos en pocos días o incluso en horas, modificando los resultados de forma imprevisible. Por ello es fundamental establecer un programa de control de calidad del agua. Repetitividad - Imprecisión intra-ensayo Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 Muestra 1 Muestra 2 Muestra 3 N N Media Reproducibilidad - Imprecisión total Media DE 1,7 1,4 2,4 DE 2,1 3,4 7,5 CV (%) 5,1 1,2 0,8 CV (%) 6,3 2,9 2,6 3. Varios factores alteran los resultados obtenidos con el Calibrador Ferritina. Entre estos factores están los errores de reconstitución, homogeneización, contaminación del agua o de la vidriería, el control inadecuado de la temperatura y los errores técnicos asociados al instrumento. Sugerimos el cumplimento de las buenas prácticas de laboratorio y la verificación de las instrucciones del fabricante del instrumento y de los reactivos utilizados, relacionadas con las limitaciones del procedimiento. 4. El valor del Calibrador Ferritina fue establecido utilizándose el procedimiento y el sistema Ferritina Turbiquest Plus (Ref. 334) según descripto en las instrucciones de uso. La exactitud de la calibración podrá no ser adecuada cuando se use reactivo de otro fabricante. 03 Español - Ref.: 334

4 Referencias 1. Tietz NW. Fundamentals of Clinical Chemistry, Philadelphia: W.B. Saunders, Sociedad Española de Bioquímica Clínica y Patología Molecular, Base de Datos de Variación Biológica. Disponible en:< ticle/ar ticleview/330/1/170> (acceso en 08/05). 3. Basques JC, Especificações da Qualidade Analítica. Labtest Diagnóstica Worwood M. Clin Chim Acta 1997;259: El volumen de reactivo por ensayo en aplicaciones automáticas depende de los parámetros de programación de cada equipo. Están disponibles aplicaciones para sistemas automáticos y semiautomáticos. Informaciones al consumidor [Términos y Condiciones de Garantia] Labtest Diagnóstica garantiza el desempeño de este producto dentro de las especificaciones hasta la fecha de caducidad indicada en los rótulos, siempre que los cuidados de utilización y almacenamiento indicados en los rótulos y en estas instrucciones sean seguidos correctamente. 5. Gottschalk R, Wigand R, Dietrich CF et al. Clin Chim Acta 00, 293: Labtest: Datos de archivo. Presentación Producto Referencia Contenido Ferritina Turbiquest Plus 334-1/ X 40 ml 1 X 10 ml 1 X 3 ml Labtest Diagnóstica S.A. CNPJ: / Av. Paulo Ferreira da Costa, Vista Alegre - CEP Lagoa Santa. Minas Gerais Brasil - Servicio de Apoyo al Consumidor sac@labtest.com.br Revisión: Junio, 12 Ref.: Copyright by Labtest Diagnóstica S.A. Reproducción bajo previa autorización 04 Español - Ref.: 334

5 PROTOCOLO DE AUTOMACIÓN PARA EL LABMAX 240 Item Name DATA INFORMATION # FERTP CALIBRATION UNITS ng/ml TYPE Spline DECIMALS 0 STANDARD #4 ANALYSIS #5 TYPE END #6 1 Main W.Length Sub W.length 2 METHOD Turbidimétrico CORR. SLOPE INTER Y = 1 X + 0 NORMAL RANGE Serum Urine Plasma CSF Dialysis Other LOW MALE HIGH LOW FEMALE HIGH # Posición de 1 a 77 en el panel de la concentración del analito que figura en el material Calibrador Ferritina (Ref ) Item Name # FERTP ASPIRATION KIND Single Double VOLUME SAMPLE 18 µl REAGENT1 VOL REAGENT2 VOL µl µl MONITOR Third Mix. OFF ON R1 Blank Water Blank R1-Blank1 0 LEVEL POINT 1 SPAN 3 DATA PROCESS READ MAIN SUB FACTOR Blank correction PROZONE CHECK FIRST SECOND THIRD START END ABSORBANCE LIMIT LOW HIGH ENDPOINT LIMIT LINEAR CHECK(%) START END LIMIT(%) Low Low 2 2 High High Item Name AUTO RERUN SW # FERTP AUTO RERUN CONDITION (ABSORBANCE) 3 ON OFF Absorbance Range AUTO RERUN RANGE (RESULTS) Serum Urine Plasma CSF Dialysis Other Lower Higher Lower Higher Prozone Range 05 Español - Ref.: 334

6 06 Español - Ref.: 334