ES A1. Número de publicación: PATENTES Y MARCAS. Número de solicitud: Int. Cl. 7 : A23C 9/12

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1 k 19 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA 11 k Número de publicación: k Número de solicitud: k Int. Cl. 7 : A23C 9/12 k 12 SOLICITUD DE PATENTE A1 k 22 Fecha de presentación:.0.01 k 43 Fecha de publicación de la solicitud: k 71 Solicitante/s: IPARLAT, S.A. Pol. Ind. Erratzu, parcela E-F 1 Urnieta, Guipúzcoa, ES k 72 Inventor/es: Zulaika Orozco, Miren Jaione k 43 Fecha de publicación del folleto de la solicitud: k 74 Agente: Carpintero López, Francisco k 4 Título: Procedimiento para la obtención de leche ĺıquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa. k 7 Resumen: Procedimiento para la obtención de leche líquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa. El procedimiento comprende la adición de enzima β- galactosidasa a una leche líquida de origen animal de partida previamente estandarizada, homogeneizada y pasterizada esterilizada o tratamiento UHT, en una cantidad adecuada para hidrolizar parte de la lactosa contenida inicialmente en la leche líquida de partida para alcanzar el contenido en lactosa deseado en la leche líquida con un contenido reducido en lactosa. La leche líquida resultante es apta para el consumo humano, particularmente por personas con intoleranciaalalactosa. ES A1 Venta de fascículos: Oficina Española de Patentes y Marcas. C/Panamá, Madrid

2 1 ES A1 2 DESCRIPCION Procedimiento para la obtención de leche líquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa. Campo de la invención La invención se refiere a la producción de una leche líquida de origen animal con un contenido reducidoenlactosa,aptaparaelconsumohumano, especialmente por personas con intolerancia a la lactosa. Antecedentes de la invención La lactosa, β-d-galactopiranosil-(1 4)-D-glucopiranosa, es un disacárido que se encuentra presente en la leche de origen animal y, para su aprovechamiento, debe ser hidrolizado para liberar sus monosacáridos constitutivos por acción de la enzima β-galactosidasa o lactasa. La carencia total o parcial de esta enzima en las personas provoca que la lactosa no pueda ser hidrolizada, lo que se conoce como intolerancia a la lactosa, e implica que tales personas no puedan ingerir dicho alimento ni sus derivados. Este problema ha llevado al desarrollo de leches especiales con bajo contenido en lactosa para que puedan ser consumidas por personas con intolerancia a la lactosa. Se conocen procedimientos para la obtención de leches líquidas de origen animal con bajo contenido en lactosa basados en métodos enzimáticos que comprenden el empleo de elevadas cantidades de β-galactosidasa para hidrolizar la lactosa antes de esterilizar e higienizar la leche. Estos procedimientos presentan varios inconvenientes, entre los que se encuentran un elevado consumo de enzima y un rendimiento bajo en la reacción de hidrólisis de lactosa debido, entre otras razones, a que el tratamiento térmico posterior a la adición de la enzima conduce, en gran medida, a la desnaturalización de la enzima empleada y a una leche con un contenido en lactosa difícilmente controlable y, en ocasiones, superior al deseado. También se conocen procedimientos para reducir el contenido en lactosa de una leche líquida de origen animal que comprende el empleo de preparados enzimáticos a base de β-galactosidasa. Esta alternativa puede realizarse en el hogar del consumidor, añadiendo dicho preparado enzimático a la leche líquida. No obstante, presenta el inconveniente de que no se puede garantizar la calidad higiénica ni sanitaria de la leche líquida resultante. Por tanto, sigue existiendo la necesidad de desarrollar una alternativa para la producción de leches líquidas de origen animal, con un reducido contenido en lactosa, que supere la totalidad o parte de los inconvenientes señalados. Compendio de la invención La invención se enfrenta con el problema de desarrollar un procedimiento alternativo para la producción de una leche líquida de origen animal, con un contenido reducido en lactosa. La solución propuesta por esta invención se basa en que se ha observado que la adición directa de una β-galactosidasa a leche líquida de origen animal, después de que ésta ha sido sometida a los procesos convencionales de estandarización, homogeneización y esterilización, permite obtener una leche líquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa, contenido que puede fijarse hidrolizando la cantidad deseada de la lactosa contenida inicialmente en la leche líquida de partida mediante la adición de enzima en la cantidad o con la actividad específica adecuada en función de los contenidos inicial y final de lactosa. El preparado enzimático se añade directamente a la leche inmediatamente antes de su envasado o durante su envasado, esto es, instantes antes de ser cerrado el envase. Esto permite que la dosis de enzima empleada sea muy inferior a la que se necesitaría para hidrolizar la lactosa previamente al tratamiento térmico de pasterización, esterilización o UHT. La β- galactosidasa que produce el desdoblamiento de la lactosa, está producidaapartirdelafermentación sumergida de una cepa seleccionada de determinada levadura, siendo su ph, temperatura y estabilidad óptimas a las características de cada tipo de leche. Un procedimiento como el proporcionado por esta invención presenta numerosas ventajas, por ejemplo, se optimiza el consumo de enzima evitándose un gasto innecesario de la misma, se garantiza la calidad higiénico-sanitaria de la leche y se obtiene una leche líquida con el contenido en lactosa deseado. La leche líquida de origen animal resultante, con un contenido reducido en lactosa, es apta para su consumo por todo tipo de personas debido a su alta digeribilidad y, en particular, por personas con intolerancia a la lactosa. Descripción detallada de la invención La invención se refiere a un procedimiento para la obtención de una leche líquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa, en adelante leche líquida parcialmente deslactosada, que comprende la adición de una enzima β-galactosidasa a una leche líquida de origen animal de partida, previamente estandarizada, homogeneizada y pasterizada, esterilizada o sometida a un tratamiento térmico UHT, en una cantidad adecuada para hidrolizar la mayor parte de la lactosa contenida inicialmente en la leche líquida de partida para alcanzar el contenido en lactosa deseado en la leche líquida parcialmente deslactosada. Una característica del procedimiento proporcionado por esta invención radica en que la adición de la enzima β-galactosidasa a una leche líquida de origen animal, a diferencia de los procedimientos enzimáticos conocidos de obtención de leches líquidas con bajo contenido en lactosa, tiene lugar después de haber sometido a la leche líquida de partida a los tratamientos de estandarización, homogeneización, pasterización, esterilización o UHT y, opcionalmente, enriquecimiento con vitaminas y/o minerales, antes de proceder a su envasado, por ejemplo, inmediatamente antes de proceder a su envasado o durante el mismo, en cualquier caso, instantes antes de cerrar el envase. En el sentido utilizado en esta descripción, la expresión leche líquida de origen animal se refiere alalechelíquida procedente de un animal, apta para consumo humano, por ejemplo, leche líquida procedente de vaca, oveja, búfala, cabra, etc., y sus mezclas que contiene el porcentaje de lactosa típico de dicha leche. En general, el contenido típico en lactosa de una leche de origen animal apta para consumo humano es de aproximada-

3 3 ES A1 4 mente igual o inferior al % en peso de lactosa. A modo de ejemplo, el contenido porcentual en peso de lactosa en leche de vaca es del 4,7 %, el de leche de oveja es del 4,1 %, el de leche de cabra es del 4, % y el de leche de búfala es del 4,88%, aproximadamente [Norman N. Potter, en La Ciencia de los Alimentos, Edutex, S.A., edición, 1973, página 380, Tabla ]. En el sentido utilizado en esta descripción, la expresión leche líquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa = olechelíquida o parcialmente deslactosada = se refiere a una leche líquida de origen animal que tiene un contenido en lactosa inferior al contenido en lactosa presente en la leche líquida de partida de la que procede dicha leche líquida parcialmente deslactosada tras la hidrólisis enzimática parcial de la lactosa presente en dicha leche líquida de partida. A modo de ejemplo, el contenido en lactosa en dicha leche líquida parcialmente deslactosada puede ser igual o inferior al % en peso respecto al contenido en lactosa en la leche líquida de partida. A modo ilustrativo, el porcentaje en peso de lactosa contenida en la leche parcialmente deslactosada proporcionada por el procedimiento de esta invención puede ser igual o inferior al 0, %. El contenido en lactosa tanto en la leche líquida de partida como en la leche líquida parcialmente deslactosada se puede determinar por métodos convencionales, por ejemplo, mediante colorimetría empleando tiras reactivas Clinistix7 (Bayer Diagnostics Ano2A01793). La estandarización de la leche líquida de partida tiene por objetivo establecer su contenido en materia grasa, con el fin de obtener las distintas variedades de leche (entera, semidesnatada y desnatada). Este tratamiento se realiza mediante métodos convencionales según lo establecido por la legislación vigente en materia alimentaria. Adicional y opcionalmente, si se desea, durante la estandarización de la leche líquida de partida se puede efectuar el enriquecimiento de la leche con vitaminas y/o minerales, mediante la incorporación a la leche de partida de tales vitaminas y/o minerales utilizando métodos convencionales conocidos por los expertos en la materia y de acuerdo con la legislación vigente en materia alimentaria. El enriquecimiento en vitaminas y/o minerales se realiza teniendo en cuenta el contenido inicial de la leche líquida de partida en dichos componentes y las pérdidas originadas durante la estandarización en materia grasa y el tratamiento térmico de conservación. La dosis de enriquecimiento a añadir deberá ser la adecuada para obtener un producto equilibrado y rico en micronutrientes. La homogeneización de la leche estandarizada se realiza por métodos convencionales, por ejemplo, a una presión comprendida entre 180 y 2 bares. La pasterización, esterilización o tratamiento UHT de la leche estandarizada, homogeneizada y, opcionalmente enriquecida, se realiza mediante los métodos convencionales apropiados para cada tipo de leche según la legislación vigente en materia alimentaria. Este tratamiento consta de un ciclo térmico que combina tiempo y temperatura para garantizar la calidadhigiénico-sanitaria de la leche, por ejemplo, esterilización, pasteurización o UHT. La hidrólisis de la lactosa se realiza por acción de la enzima β-galactosidasa que, como se ha mencionado previamente, se añade a la leche líquida previamente estandarizada, homogeneizada, pasterizada, esterilizada tratamiento térmico UHT, y, opcionalmente enriquecida con vitaminas y/o minerales, antes de proceder al envasado de la leche o durante el propio envasado, en cualquier caso, instantes antes de cerrar el envase. La enzima β-galactosidasa debe ser de origen y procedencia aprobado según la legislación vigente en materia alimentaria. La enzima β-galactosidasa puede añadirse tal cual o incluida en una preparación o extracto enzimático que comprende dicha enzima. En una realización particular, la enzima β-galactosidasa se obtiene mediante fermentación sumergida de una levadura productora de dicha enzima. En otra realización particular, dicha enzima es un producto comercial. Para asegurar las mejores condiciones microbiológicas, la enzima se añade, preferentemente, mediante un sistema de dosificación con un filtro estéril, con conducciones autoesterilizables que se conectan a la máquina llenadora. La enzima β-galactosidasa se añade a la leche líquida de partida previamente estandarizada, homogeneizada, esterilizada, y, opcionalmente enriquecida en vitaminas y/o minerales, en una cantidad adecuada para hidrolizar la mayor parte de la lactosa contenida inicialmente en la leche líquida de partida para alcanzar el contenido en lactosa deseado en la leche líquida parcialmente deslactosada. Para ello, tras determinar el contenido en lactosa presente en la leche líquida de partida y/o en la leche líquida de partida pasterizada, estandarizada o tratamiento térmico UHT homogeneizada, esterilizada y, opcionalmente enriquecida, se añade la enzima en una relación enzima/sustrato adecuada para obtener el contenido en lactosa deseado en el producto final (leche líquida parcialmente deslactosada). Para ello, dicha relación enzima/sustrato se ajusta en función de, entre otros factores, el contenido inicial de lactosa, el contenido deseado en lactosa en la leche líquida total o parcialmente deslactosada, la enzima utilizada y la actividad específica de la enzima utilizada. Tras la adición de la enzima β-galactosidasa, la leche líquida se envasa. La hidrólisis enzimática de la lactosa tiene lugar, por tanto, durante las primeras horas de almacenamiento, en las condiciones estándar de almacenamiento, por ejemplo, en el caso de la leche pasteurizada a una temperatura inferior a mientras que en el caso de la leche uperisada la hidrólisis de la lactosa se efectúa a temperatura ambiente. En una reacción particular, se hidroliza una cantidad de lactosa igual o superior al 90 % en peso respecto al contenido en lactosa presente en la leche líquida de partida de manera que el contenido en lactosa en la leche líquida total o parcialmente deslactosada es igual o inferior al % de la lactosa contenida en la leche líquida de partida. Como resultado del procedimiento proporcionado por esta invención, se obtiene una leche líquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa [típicamente igual o inferior al % en 3

4 ES A1 6 peso de la lactosa contenida inicialmente en la leche líquida de partida (lo que supone un contenido en lactosa típico igual o inferior a, aproximadamente, el 0, % en peso en el producto final) estandarizada, homogeneizada, pasterizada, esterilizada o tratamiento térmico UHT y, opcionalmente enriquecida en vitaminas y/o minerales] que posee las mismas características de conservación y consumo que las leches líquidas de origen animal que contienen lactosa. Dicha leche resulta apta para el consumo humano por su mayor digeribilidad, tanto por personas sanas como por personas que sufren de intolerancia a la lactosa. El producto final obtenido por el procedimiento de la invención presenta buenas características nutricionales y organolépticas (mantiene el color, 1 olor y sabor característicos y específicos de cada tipo de leche) porque no se producen modificaciones ni el color ni el olor, únicamente el sabor es más dulce, debido a la hidrólisis de la Lactosa en Glucosa y Galactosa, es muy digestiva y contiene todos los componentes presentes en cualquier leche entera, semidesnatada o desnatada. El procedimiento de la invención se puede realizar en continuo o por lotes (batch). Una ventaja del procedimiento de la invención radica en la posibilidad de optimizar el consumo de enzima, evitando un gasto innecesario de la misma, debido a que la hidrólisis de la lactosa se realiza después de la etapa de tratamiento térmico (pasterización, esterilización o tratamiento UHT)

5 7 ES A1 8 REIVINDICACIONES 1. Un procedimiento para la obtención de una leche líquida de origen animal con un contenido reducido en lactosa (leche líquida parcialmente deslactosada), que comprende la adición, instantes antes del envasado, durante el envasado o, en cualquier caso, instantes antes de cerrar el envase, de una enzima β-galactosidasa a una leche líquida de origen animal de partida (leche líquida de partida), previamente estandarizada, homogeneizada y esterilizada, en una cantidad adecuada para hidrolizar la totalidad o parte de la lactosa contenida inicialmente en la leche líquida de partida para alcanzar el contenido en lactosa deseado en la leche líquida total o parcialmente deslactosada. 2. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicha leche líquida de origen animal de partida se selecciona del grupo de leche procedente de leche de vaca, oveja, búfala, cabra y sus mezclas. 3. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicha leche líquida de origen animal de partida. tiene un contenido en lactosa igual o inferior al % en peso. 4. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicha enzima β-galactosidasa es de origen natural.. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicha enzima β-galactosidasa se encuentra en una preparación o extracto enzimático que comprende dicha enzima. 6. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que dicha enzima se añade mediante un sistema de dosificación con un filtro estéril con conduccio nes autoesterilizables que se conectan a la máquina llenadora. 7. Procedimiento según la reivindicación 1, que comprende la adición de dicha enzima β-galactosidasa a la leche líquida de partida estandarizada, homogeneizada, pasterizada, esterilizada o tratada mediante UHT, inmediatamente antes o durante su envasado. 8. Procedimiento según la reivindicación 7, en el que la hidrólisis de la lactosa por acción de la enzima β-galactosidasa tiene lugar durante el almacenamiento de la leche envasada, en las condiciones estándar de almacenamiento de la leche. 9. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que se hidroliza una cantidad de lactosa igual o superior al 90 % en peso respecto al contenido en lactosa presente en la leche líquida de partida.. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la cantidad de lactosa presente en la leche líquida total o parcialmente deslactosada es igual o inferior al % en peso de la lactosa contenida en la leche líquida de partida. 11. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la cantidad de lactosa presente en la leche líquida total o parcialmente deslactosada es igual o inferior al 0, % en peso. 12. Procedimiento según la reivindicación 1, que comprende, además, el enriquecimiento en vitaminas y/o minerales de la leche líquida de partida. 13. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el modo de operación es en continuo. 14. Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el modo de operación es por lotes (batch)

6 OFICINA ESPAÑOLA DE PATENTES Y MARCAS ESPAÑA k 11 ES k 21 N. solicitud: 077 k 22 Fecha de presentación de la solicitud:.0.01 k 32 Fecha de prioridad: INFORME SOBRE EL ESTADO DE LA TECNICA k 1 Int. Cl. 7 : A23C 9/12 DOCUMENTOS RELEVANTES Categoría Documentos citados Reivindicaciones afectadas X GB A (TETRA PAK INTERNATIONAL A.B.) ,6-8 Y 4,,9-12 X FR 0269 A1 (TETRA PAK INTERNATIONAL A.B.) ,6-8 Y 4,,9-12 Y US A (STEVENS) , columna 1, líneas 42-49; 4,,9-12 columna 2, líneas -68; columna 3, líneas X US 3782 A (KOHLER) , columna 1, líneas 11-; 1,3,7,8, columna 2, líneas ,14 Categoría de los documentos citados X: de particular relevancia Y: de particular relevancia combinado con otro/s de la misma categoría A: refleja el estado de la técnica O: referido a divulgación no escrita P: publicado entre la fecha de prioridad y la de presentación de la solicitud E: documento anterior, pero publicado después de la fecha de presentación de la solicitud El presente informe ha sido realizado para todas las reivindicaciones para las reivindicaciones n : Fecha de realización del informe Examinador Página J. López Nieto 1/1