PRÁCTICO N 8 CONTROL DE CALIDAD DE AGUA

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1 PRÁCTICO N 8 CONTROL DE CALIDAD DE AGUA OBJETIVOS Incorporar conocimientos generales sobre los posibles contaminantes en agua. Conocer los parámetros microbiológicos que debe reunir el agua ya sea para consumo humano o para algún uso específico (agrícola, riego, recreacional etc.). Conocer la metodología analítica disponible para realizar el control de calidad de aguas para consumo humano. Adquirir habilidades y/o destrezas para evaluar la calidad sanitaria de muestras de agua mediante la búsqueda de microorganismos mesófilos totales. Valorar la responsabilidad, interacción, cooperación y respeto para fomentar una eficiente labor grupal.

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3 Instructivo para la toma de muestras de agua Análisis microbiológicos recipientes estériles Análisis químicos recipientes limpios

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5 Si es de grifo situado en una cañería de agua corriente Limpiar la boca del grifo Dejar correr el agua por 2 o 3 minutos Esterilizar el grifo Dejar correr el agua Tomar la muestra

6 Si es de un grifo situado en una cañería de un pozo semisurgente. Grifos que estén conectados directamente a las cañerías ascendentes del pozo Pozo de uso continuo: correr el agua por 30 minutos Pozo fuera de servicio: dejar correr el agua por 5 horas. Se procede a la toma de muestra como en el punto anterior

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8 Llenado de frascos hasta 2-3 cm antes de la tapa para agitar

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12 Evaluación de la calidad microbiológica del agua Recuento de microorganismos mesófilos totales Presencia-Ausencia de Pseudomonas aeruginosa Recuento de organismos Coliformes totales y fecales o termotolerantes Presencia-ausencia de Escherichia coli

13 Evaluación de la calidad microbiológica del agua Recuento de microorganismos mesófilos totales Medio PCA (Agar para conteo en placa) Método de inmersión o embebido Incubación a C por 48 horas

14 Evaluación de la calidad microbiológica del agua Presencia-Ausencia de Pseudomonas aeruginosa Siembra por estriado en dos medios de cultivo diferenciales Incubación a 37 C por 24 hs Fluoresceína + Piocianina + Medio King B: observación de fluorecencia bajo luz UV Medio King A

15 Evaluación de la calidad microbiológica del agua Recuento de organismos Coliformes Método del Número más Probable (NMP) Medio liquido Mc Conkey Coliformes totales: incubación a 35-37ºC por 48 hs Coliformes fecales o termotolerantes: incubación a 44-45ºC por 48 hs Positivo: producción de gas y viraje de color acidificación del medio. Negativo: sin viraje de color y sin producción de gas.

16 Evaluación de la calidad microbiológica del agua Presencia-ausencia de Escherichia coli Medio sólido EMB-Levine Incubación a 44-45ºC por 48 hs Colonias presuntivas de E. coli de color negro con brillo verde metalizado

17 Método para la determinación de microorganismos mesófilos y coliformes Concentración doble Mesófilos y Coliformes totales Muestra de agua 1 ml 1 ml 10 ml 1 ml 9 ml H2O destilada ml Recuento de mesófilos totales Organismos coliformes totales Incubar a 37 C por 48 hs LECTURA

18 Método para la determinación de microorganismos mesófilos y coliformes Coliformes fecales o termotolerantes se repican mediante la técnica del NMP en medio líquido Mac Conkey Tubos positivos para coliformes totales Incubar 44-45ºC por 48 hs Lectura

19 Método para la determinación de microorganismos mesófilos y coliformes Escherichia coli Se siembra por estriado en medio sólido EMB-Levine Incubar 44-45ºC por 48 hs Tubos positivos para coliformes fecales o termotolerantes colonias presuntivas de E. coli Confirmación mediante métodos bioquímicos.

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21 Normas de calidad de agua para consumo humano, uso recreacional y efluentes Valores limites permitidos Mesófilos totales (UFC/mL) Coliformes totales (Bacterias/100 ml) Coliformes fecales (Bacterias/100 ml) Pseudomonas aeruginosa (Ausencia/100 ml) E. coli (Ausencia/100 ml) Agua potable (CAA) 500 <3 NE Ausente Ausente Agua envasada (CAA) 500 <3 NE Ausente Ausente Recreacional (EPA) NE NE NE Efluentes (SRH) NE < 5000 <1000 NE NE NE: no especifica. CAA: Código Alimentario Argentino. U.S. EPA: Agencia de Protección Ambiental de los EEUU. SRH: Subsecretaría de Recursos hídricos.

22 Normas calidad de agua para riego según la OMS (Organización Mundial de la Salud) Valores limites permitidos /100 ml Categoría A: riesgo para consumidores y trabajadores (cultivos hortícolas, campos de deportes y parques públicos) Coliformes fecales E. coli <100 Ausente Categoría B: riesgo para trabajadores (cereales, forrajeras, árboles <1000 Ausente Categoría C: sin riesgo para consumidores ni trabajadores (forestaciones) <1000 <1

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24 Actividades 1. Siembra de microorganismos mesófilos totales -Trabajando en condiciones de asepsia, realizar la siembra de muestras de agua de distinta procedencia (agua para consumo humano, bebedero de animales y tambo). 2. Interpretación de resultados - Realizar el recuento de coliformes fecales y comparar con normas de referencia. - Observar colonias de E. coli creciendo sobre medio EMB-Levine.

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