QUÉ CONTIENE UN MEDIO? Aquellos requerimientos nutricionales que los microorganismos necesitan para crecer. Depende del ambiente en donde viven.

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2 OBJETIVOS u Diferenciar entre ciertos tipos de medios u Conocer actividades bioquímicas de las bacterias u Conocer los procesos bioquímicos de fermentación u Descibir los patrones de fermentación de carbohidratos de algunas bacterias y como algunos patrones resultan en producción de un ácido o de un ácido y un gas.

3 QUÉ CONTIENE UN MEDIO? Aquellos requerimientos nutricionales que los microorganismos necesitan para crecer. Depende del ambiente en donde viven.

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5 Algunos Requerimientos nutricionales: Carbono (C) Nitrógeno (N) Elementos no metálicos: azufre (S) y fósforo (P) Elementos metálicos: Ca ++, Na ++, K +, Cu ++, Mg ++, Mn ++, Fe +2,+3 y trazas de Zn ++ Vitaminas H 2 0

6 Factores físicos que afectan el crecimiento Temperatura ph ** ambas afectan las actividades enzimáticas Disponibilidad de oxígeno oxígeno atmosférico Formación de ATP fermentación anaerobia

7 MEDIOS DE CULTIVO Clasificación: 1. Físicamente Medio %Agar Ejemplo Líquido 0 Caldo Nutritivo Semisólido 0.5 a 1 Medio Movilidad Sólido 1.5 a 2 Agar Nutritivo 2. Químicamente Definido o Sintético: Composición quím. definida (Sales) Complejo o no Sintético: Composición quím. difícil de definir (Peptona, Extracto de levadura,etc).

8 3. Uso Líquido (caldo): Crecimiento gran # microorganismos Estudios fermentación Semisólido: Crecimiento anaerobio (fermentación) Motilidad Sólido: Crecimiento superficial Cultivo puro (transferencia)

9 3. Uso Líquido (caldo): Crecimiento gran # microorganismos Estudios fermentación Semisólido: Crecimiento anaerobio (fermentación) Motilidad Sólido: Crecimiento superficial Cultivo puro (transferencia)

10 TIPOS DE MEDIOS Selectivo: Para aislar un grupo de bacteria específico. Se incorporan sustancias químicas que ayudan al crecimiento de cierto organismo e inhiben el crecimiento de otros grupos de bacterias.

11 DIFERENCIAL Distinguir entre grupos de organismos relacionados tanto morfológica como bioquímicamente. Se le incorporan compuestos químicos que producen un cambio característico en el crecimiento de la bacteria y sus alrededores

12 ENRIQUECIDO Posee características nutricionales específicas para estimular la producción de algún componente. Staphylococcus spp.

13 MacConkey Agar ( Selectivo y diferencial) No fermentadores de lactosa (izq) fermentadores de lactosa (der) Eosin Methylene Blue Agar Bacilos entéricos Gram negativos Blood Agar Hemolisis Beta, Alfa y Gamma (observar propiedades hemolíticas)

14 FERMENTACIÓN Son reacciones bioquímicas que producen energía en la cual moléculas orgánicas sirven como aceptadores o donadores de electrones. v La habilidad de un organismo fermentar carbohidratos ayuda a la caracterización. v Un carbohidrato puede ser fermentado a numerosos productos dependiendo el organismo que este envuelto. v Los productos finales son característicos para ciertos grupos de bacterias v Alcoholes v Acidos v Gases v Otras moléculas orgánicas

15 DSMINUCION DE PH Si bacterias fermentadoras crecen en un medio de cultivo líquido conteniendo glucosa, pueden producir ácidos orgánicos como intermedarios de la fermentación. v Estos ácidos son liberados en el medio y bajan el ph. v Indicadores de ph como rojo fenol o azul de bromocresol pueden ser incluidos en el medio (Cambio de medio de su color original a amarillo)

16 PRODUCCIÓN DE GAS Gases prodcidos durante un proceso pueden ser detectados usando pequeños tubos invertidos llamados tubos Durham( Edward Durham,bacteriólogo) dentro del medio de cultivo. v Si gas es producido, el medio líquido dentro del tubo Durham será desplazado, entrando el gas en forma de una burbuja.

17 ENZIMA B- GALACTOSIDASA Enzima para el metabolismo de la lactosa Lactosa -----Galactosa y glucosa

18 E. COLI Es un anaerobio facultativo Bacilo Gran negativo Produce ácido y gas catabolizando glucosa y otros carbohidratos. β-galactosidasa positiva y puede usar lactosa como única fuente de carbono

19 PARTE EXPERIMENTAL Seleccionar bacterias Inocular en tubos con diferentes azúcares (glucosa, sucrosa y lactosa) Observar bacteria a las 2 horas, 4 horas y 24 horas. Anotar observaciones y comparar los resultados con la literatura.

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