Colecciones de tejidos y ADN. isabel.rey@csic.es
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- Ramón Miranda Pinto
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1 Colecciones de tejidos y ADN isabel.rey@csic.es
2 Colecciones de tejidos y ADN En la década de los 70 estuvieron disponibles las herramientas necesarias para cortar, pegar y copiar el ADN Enzimas de restricción Enzimas de ligado Clonación Métodos para descifrar la secuencia de nucleótidos del ADN GILBERT & MAXAM,1973, 1977; SANGER & COULSON, 1975; SANGER ET AL., 1977
3 Colecciones de tejidos y ADN El ADN es molécula donde radica la información de cada individuo y donde se almacenan las diferencias o cambios (mutaciones) que provocan la variabilidad y las diferencias específicas Uso extensivo para estudios Taxonomía ( Filogenia ( Microevolución y macroevolución Genética de poblaciones vincristina y vinblastina Búsqueda de componentes bioactivos naturales localizados en plantas y animales con interés para la biotecnología
4 Colecciones de tejidos y ADN Durante los últimos cuarenta años del siglo pasado han aparecido un tipo de nuevas colecciones, denominadas de forma genérica biobancos, colecciones de tejidos, bancos de germoplasma, bancos de recursos genéticos, biorrepositorios, etc Todos estos términos se han empleado tanto en ciencias biológicas como en disciplinas médicas y esto ha provocado cierta confusión entre los propios investigadores y en la sociedad en general.
5 Colecciones de tejidos y ADN A priori, todas se consideran bajo un mismo paraguas porque conservan tejidos y moléculas orgánicas o inorgánicas básicamente congeladas; pero su finalidad y espectro de posibilidades puede ser muy diferente Desde un biobanco de sangre de cordón umbilical hasta uno de muestras ambientales cuya finalidad es localizar contaminantes químicos
6 Colecciones de tejidos y ADN Importancia Crecimiento muy rápido Los laboratorios se quedan sin espacio Almacenado en condiciones no optimas Documentación variable - disociación Dispersos a través de la institución Gestionado por investigadores individuales Sin estrategia de conservación a largo plazo
7 Colecciones de tejidos y ADN 90 Importancia NON SPAIN SPAIN NON SPAIN
8 Colecciones de tejidos y ADN The Cryogenic Collection The Museum of Comparative Zoology (MCZ) at Harvard University 1973 MVZ Tissue Collection, Museum of Vertebrate Zoology. University of California, Berkeley 1973 South Australian Biological Tissue Collection (ABTC) 1979 Colección de Tejidos y ADN, MNCN 2000 The Ambrose Monell Collection for Molecular and Microbial Research, AMNH 2001 Molecular and Frozen Tissues, NHM London 2011
9 Colecciones de tejidos y ADN En la actualidad se conocen alrededor de 100 instituciones con colecciones de tejidos y ADN exclusivamente de biodiversidad. Berkeley AMNH Australian Museum Burke Kew ABTC
10 La colección de Tejidos y ADN del MNCN
11 MÉTODOS DE CONSERVACIÓN SECO Tarjetas FTA Tejido / ADN Silica gel Tejido Liofilizados Tejido / ADN FLUIDO Alcohol etílico 96-70% Tejido Tampón DMSO o EDTA Tejido CONGELADO -80º C, -20º C Tejido / ADN SILICA FTA ADN LM Smith and LA Burgoyne Collecting, archiving and processing DNA from wildlife samples using FTA databasing paper. BMC Ecology, 4
12 MÉTODOS DE CONSERVACIÓN SECO Tarjetas FTA Tejido / ADN Silica gel Tejido Liofilizados Tejido / ADN FLUIDO Alcohol etílico 96-70% Tejido Tampón DMSO o EDTA Tejido CONGELADO -80º C, -20º C Tejido / ADN SILICA FTA ADN LM Smith and LA Burgoyne Collecting, archiving and processing DNA from wildlife samples using FTA databasing paper. BMC Ecology, 4
13 MÉTODOS DE CONSERVACIÓN SECO Tarjetas FTA Tejido / ADN Silica gel Tejido Liofilizados Tejido / ADN FLUIDO Alcohol etílico 96-70% Tejido Tampón salino con DMSO Tejido CONGELADO -80º C, -20º C Tejido / ADN DMSO DIMETHYL SULFOXIDE SEUTIN G., WHITE B.N., BOAG P.T. Preservation of avian blood and tissue samples for DNA analyses. Canadian Journal of Zoology (1991) 69:82 90 HUMASON, GRETCHEN L Humason's Animal Tissue Techniques
14 MÉTODOS DE CONSERVACIÓN SECO Tarjetas FTA Tejido / ADN Silica gel Tejido Liofilizados Tejido / ADN FLUIDO Alcohol etílico 96-70% Tejido Tampón salino con DMSO Tejido CONGELADO -80º C, -20º C Tejido / ADN
15 MÉTODOS DE CONSERVACIÓN SECO Tarjetas FTA Tejido / ADN Silica gel Tejido Liofilizados Tejido / ADN FLUIDO Alcohol etílico 96-70% Tejido Tampón salino con DMSO Tejido CONGELADO -80º C, -20º C Tejido / ADN ALCOHOL FROZEN FREEZE- DRIED
16 ORIGEN DE LOS FONDOS Proyectos de investigación Centros de recuperación de fauna Zoológicos y acuarios Decomisados
17 Colecciones clásicas ORIGEN DE LOS FONDOS Conservados en fluidos Especímenes en seco
18 ORIGEN DE LOS FONDOS Hippotragus niger variani Antílope Sable gigante Población Angola Colecciones clásicas Descubierto en 1909 por Frank Varian, al que se le dedicó la subespecie en 1916 El espécimen del MNCN fue cazado en 1946
19 ORIGEN DE LOS FONDOS Colecciones clásicas Cymbiola aulica (Sowerby I, 1825)
20 Especímenes Muestras Tipos 132 Especies especímenes, están disponibles en
21 EU NON EU SPAIN MNCN USUARIOS Especímenes prestados
22 El número de catálogo de la colección es un número de resguardo o voucher number que se le asigna a un fragmento de tejido o al contenido genómico de un espécimen
23 ADN
24 ADN
25
26 MNCN:ADN:7283 CÓDIGO FONOTECA 9015 MNCN:ENT:73569
27 Congeladores: muestras de tejido y ADN congelado Baldas (A -D) Racks (1-6) Cajones (A -E) Cajas (1-5)
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30 Laboratorio de Identificación Molecular Determinación del sexo (aves y mamíferos) Identificación de especies (ADN mitocondrial) Identificación individual y paternidades (microsatélites) ADN antiguo Investigación sobre conservación preventiva Muestras frescas Manchas de sangre Plumas Pelo Hueso / Marfil Piel Madera
31 ADN antiguo Cultura Moche Falange (1400 a 1500 años AD) Huaca del Sol y Luna
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33 Gracias por su atención Isabel Rey Fraile
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