Maria Teresa Rugeles L. MSci. DSci.

Transcripción

1 Caracterización inmunológica de individuos VIH-1 positivos capaces de controlar la carga viral en forma espontánea ("controladores") Maria Teresa Rugeles L. MSci. DSci. Grupo Inmunovirología Universidad de Antioquia

2 Modificado de: Curso clínico de la infección

3 Modificado de: TReg

4 Respuesta Inmune a la infección por el VIH TReg Neutralization NKT Dendritic cells NK Production of cytokines Antigenic presentation Production of cytokines, Cytotoxic response Modificado de:

5 Infección Progresores Típicos Progresores Rápidos Progresores lentos Controladores Mecanismos de resistencia Genéticos Inmunológicos

6 Individuos Controladores Individuos con al menos 1 año de diagnóstico de infección por el VIH, sin terapia antirretroviral que ejercen control de la replicación viral Grupo Controladores élite Controladores virémicos Carga viral < 50 copias/ml < 2000 copias/ml

7 Mecanismos de resistencia natural al VIH

8 Factores solubles anti-vih RANTES, MIP-1α, MIP-1 y SDF-1, HAD y HBD HBD, SLPI α-defensinas

9 Defensinas

10 SLPI Células epiteliales de mucosas, neutrófilos y macrófagos actividad antibacterial, antifúngica y antiviral. Concentraciones antivirales en mucosa oral y genital. Anti-VIH en monocitos y linfocitos en pasos previos a la transcripción reversa.

11 Hallazgos en los controladores

12 Hallazgos en los controladores

13 Cuáles son los mecanismos celulares del SI asociados con el control de la replicación del VIH-1? Qué papel juegan los factores solubles en la inhibición y control de la infección por VIH-1?

14 Objetivos específicos 1. Determinar la frecuencia y estado de activación de células del sistema inmune en sangre periférica. 2. Determinar la expresión de RNAm de HAD-1 y SLPI en cultivos de polimorfonucleares de sangre periférica en respuesta a la estimulación in vitro con el VIH Evaluar la expresión de alelos de HLA

15 Controladores: 11 / Progresores: 11 / Controles sanos: 20 Extracción de DNA para determinar la presencia de alelos de HLA Expresión de factores solubles Aislamiento y cultivo de Neutrófilos Estimulación con VIH-1 Extracción de RNA PCR en tiempo real de SLPI y HAD-1 Evaluación de células del sistema inmune Sangre periférica Frecuencia y fenotipo de células NK (CD69), inkt, mdc (CD86), pdc (CD86), LT CD4+ y CD8+ (CD38-HLA- DR) y ntreg. Correlacionar los hallazgos con el recuento de LT CD4+ y la carga viral

16 Resultados

17 Información clínica y demográfica HIV-1 infected individuals Controllers (n= 11) Progressors (n= 11) p value Age in years, Median (range) Gender, Male:Female 29 (23-44) 33 (23-49) : 4 9 : 2 N/A Time of diagnosis in months Median (range) 34 (13-87) 13 (1-43) Plasma HIV-1 viral load in RNA copies/ml Median (range) 907 ( ) ( ) < CD4 + T cell counts Median (range) ( ) ( ) CD4 + T cell percentage, Median (range) 36% (21.8% %) 19.2% (5.9% - 29%)

18 Bajos niveles de Treg y NK y mayor frecuencia de mdc en controladores del VIH-1

19 Baja expresión de marcadores de activación inmune en controladores del VIH-1

20 Altos niveles de SLPI en PMN de los controladores del VIH-1 Alelos de HLA: No hubo diferencias significativas

21 En resumen Controladores vs. Progresores Frecuencia de mdc Frecuencia de Treg y NK Expresión de moléculas de activación en LT, mdc y NK Expresión de SLPI No hubo diferencias significativas: Frecuencia de pdc, inkt y LT CD8+ Expresión de CD86 en pdc y HLA-DR y CD38 con LT CD8+ Expresión de HAD-1

22 En resumen Controladores vs. Controles sanos Frecuencia de células inkt y pdc Frecuencia de LT CD8+ Expresión de moléculas de activación en LT CD8+ No hubo diferencias significativas: Frecuencia de NK, mdc y TReg Expresión de moléculas de activación en LT CD4+, NK, pdc Expresión de SLPI y HAD-1

23 Controladores SLPI Otros factores??? Se conservan los componentes innatos y adaptativos del SI deterioro del SI Actividad de mdc y LT CD8+ apoptosis mediada por activación y expansión de TReg deterioro de barreras físicas

24 Perspectivas Evaluar la respuesta de células citotóxicas Evaluar la expresión de otros factores solubles con actividad anti-vih-1 Evaluar el mecanismo de acción antiviral Evaluar frecuencia, fenotipo y actividad de células del sistema inmune en tracto gastrointestinal

25 Implicaciones Terapéuticas Inmunoterapia Prevención/tratamiento con proteínas antivirales recombinantes Modelo para nuevas terapias (Maraviroc)

26 Agradecimientos Natalia Taborda Carlos Julio Montoya Juan Carlos Cataño Fundación Gestión Cultura, Mariano Roldán. Salud Sura

27 Muchas gracias!