División Ciencis de l Vid Cmpus Irputo-Slmnc Jueves 27 y Viernes 28 de Myo de 2010 CONTROL BIOLOGICO DE JITOMATE CON LA CEPA MEXICANA Bcillus sutilis No 21 Bsurto-Cden M.G. *, Slcedo-Hernández R., Vázquez-Arist M., Romero-Vldez M.E., Díz-Serrno F.R., Bucio-Villloos C.M., Mrtínez-Jime O.A. Deprtmento de Alimentos, División de Ciencis de l Vid, Cmpus Irputo- Slmnc, Universidd de Gunjuto, Irputo, Gunjuto, México. Deprtmento de Agronomí, División de Ciencis de l Vid, Cmpus Irputo- Slmnc, Universidd de Gunjuto, Irputo, Gunjuto, México. * cdeng@ducine.ugto.mx RESUMEN México se encuentr entre los diez primeros productores de jitomte en el mundo y su importnci rdic en su utilizción pr consumo en fresco y procesdo. Desfortundmente los principles prolems que limit l productividd del cultivo de jitomte son ls plgs y ls enfermeddes, los cules hn sido controldos con el uso indiscrimindo de groquímicos. Estos productos químicos hn incidido de mner importnte en l slud humn provocndo enfermeddes como el cáncer, mlformciones, prolems neurológicos, fecciones respirtoris y lergis; sí como en l slud mientl. Un lterntiv pr controlr ls plgs y enfermeddes de los productos grícols es el uso del control iológico. En este trjo se evluó el efecto de l cep de Bcillus sutilis No. 21, isld de plnts sns de cultivos de fres, en un cultivo de jitomte jo condiciones de inverndero. Los resultdos mostrron que trtndo ls plnts de jitomte con B. sutilis No. 21 en l ríz y sperjándolo en el follje se otuvo, por plnt, myor número de frutos con más peso y tmño. Con lo nterior, l plicción de B. sutilis No. 21 en el cultivo de jitomte prece ser un opción vile pr el control de enfermeddes y como reguldor de crecimiento. ABSTRACT Mexico is one of the ten min tomto producers in the world nd its importnce is due to its extensive consumption s fresh vegetle nd processing product. Unfortuntely, productivity of this griculturl product is limited y the presences of pests nd diseses which re controlled with the excessive use of chemicl products. These chemicl products produced, in time, prolems with humn helth such s cncer, mlformtions, neurologicl nd respirtory ffections, nd llergies; s well s environmentl helth. Biologicl control is n option to control pest nd diseses prolems during the griculturl products production. In this work nd under greenhouse conditions, the effect of Bcillus sutilis No. 21 strin, which ws isolted from helthy strwerry plnts, ws evluted in the tomto production. Results showed tht tomto plnts treted with the Bcillus sutilis No. 21 strin on roots nd leves produced more tomto per plnt with igger weigh nd size. With the ove, the ppliction of the Bcillus sutilis No. 21 strin seems to e very good option to control tomto diseses nd s growth regultor. Plrs clve: Bcillus sutilis, control iológico, reguldor de crecimiento. INTRODUCCION Si ien el jitomte se cultiv en más de cien píses, tnto pr consumo en fresco como pr su industrilizción, los diez principles productores concentrn más del 80% del totl mundil: Chin, Estdos Unidos, Turquí, Itli, Indi, Egipto, Espñ, Irán, Brsil, y México, siendo los tres primeros los que mrcn ls tendencis de precios y consumo mundiles (FAO, 2008). En México el cultivo de tomte es uno FH1551
División Ciencis de l Vid Cmpus Irputo-Slmnc Jueves 27 y Viernes 28 de Myo de 2010 de los más importntes en cunto generción de empleo y su demnd ument continumente y con ell su cultivo, producción y comercio. (SECOFI, 1993). En México el jitomte se produce en diez estdos, entre ellos destcn Sinlo, Bj Cliforni, Sn Luis Potosí y Nyrit, que producen el 75%; su vez, son ls entiddes con mejores rendimientos. El jitomte mexicno es un producto competitivo que cuent con un mercdo sólido, tnto en el interior como en el exterior y con posiiliddes de expnsión. Deido que el sector grícol en el Estdo de Gunjuto en su myorí se dedic l cultivo de cereles, l producción de otros cultivos se ve reducid como l de jitomte donde León, Sn Luis de l Pz, Cortázr y Cely son los municipios con myor producción (SIAP SAGARPA, 2008). Ls enfermeddes constituyen el fctor limitnte en l producción de jitomte en muchs prtes del mundo cundo no se utilizn cultivres con resistenci vris de ells. Existen cerc de 200 enfermeddes en el jitomte con diverss cuss y etiologís (Crisntes y col., 1992); sin emrgo, el mrchitmiento vsculr del jitomte, cusdo por el hongo Fusrium oxysporum, es l enfermedd cusnte de grndes pérdids en este cultivo y est mplimente distriuid en todo el mundo. Este hongo sorevive en restos de cultivo de un tempord otr y posee estructurs de resistenci que le permiten perdurr en el suelo por espcio de 6 ños, le fvorecen l tempertur cálid (20 C) y lt humedd (Vliel, 1979). El Control iológico es un de ls herrmients de un conjunto de técnics de control eficces desde el punto de vist iológico, ecológico y económico. En el control iológico se utilizn orgnismos que son enemigos nturles de un plg o ptógeno, con el fin de reducir o eliminr sus efectos dñinos en ls plnts o sus productos. (Fuchs y col., 1999). Bsurto-Cden (2006) utilizó, nivel de inverndero, l cep Bcillus sutilis No. 21 pr el control de Fusrium verticillioides y Rhizoctoni solni, hongos cusntes de l enfermedd de l secder en el cultivo de l fres. MATERIALES Y METODOS Mteril vegetl. Se trjó con 72 plnts de jitomte de l vriedd Griel, de ls cules 12 se usron como testigo. Los ensyos se relizron en el inverndero de l División de Ciencis de l Vid de l Universidd de Gunjuto. Bcteri ntgonist. Se trjo con l cep de Bcillus sutilis No. 21, l cul fue isld de plnts sns de cultivos de fres e identificd en el lortorio de Microiologí del Deprtmento de Alimentos de l División de Ciencis de l Vid (Bsurto-Cden, 2006). Hongos ptógenos. Se islron de plnts de jitomte que presentron sistems de lgun enfermedd, siguiendo l metodologí sugerid por Bsurto-Cden FH1552
División Ciencis de l Vid Cmpus Irputo-Slmnc Jueves 27 y Viernes 28 de Myo de 2010 (2006) y l identificción se relizó en el lortorio de Microiologí del Deprtmento de Alimentos. Antgonismo in vitro de hongos ptógenos y l cep de Bcillus sutilis No. 21. El enfrentmiento de los hongos isldos e identificdos con B. sutilis No. 21se llevó co de cuerdo l protocolo sugerido por Bsurto-Cden (2006). Preprción de inoculo de B. Sutilis No. 21. Se preprn tuos de ensye con 10 ml de cldo nutritivo y se les semró un zd de l cep Bcillus sutilis N 21, semrd con nterioridd en gr nutritivo (cj petri), y se incuron 35±2 C por 24 hr con gitción constnte. Preprción de l solución concentrd de B. Sutilis No. 21. Del inoculo se tomó 1mL y se dicionó un mtrz erlenmeyer con 500 ml con cldo nutritivo y se incuó 35±2 C por 5 dís en gitción constnte. Se tomron 150 ml de est solución y se llevron un volumen de 1,500 ml con gu destild pr otener un concentrción finl de 1 x 10-7 céluls por ml. Trtmientos en inverndero. Los trtmientos que se relizron en el inverndero fueron cutro: T1. Aplicción de solución concentrd de B. sutilis No. 21en ríces; T2. Aplicción de solución concentrd de B. sutilis No. 21en ríces y follje; T3. Aplicción de solución concentrd de B. sutilis No. 21en follje; y T4. Testigo. En cd trtmiento se utilizron 20 plnts más cutro testigos por trtmiento (72 plnts en totl). Análisis estdístico. Se relizó un diseño completmente l zr, plicndo l prue múltiple de Duncn pr los dtos de distriución norml y l prue de Kruskl-Wllis pr quellos que no presentron distriución norml (Montgomery, 1991). Los prámetros evludos fueron: peso, diámetro polr y diámetro ecutoril de los frutos. Se relizron 6 recolecciones de los frutos cd 15 dís. RESULTADOS Hongos ptógenos. Los géneros de los hongos identificdos del cultivo de jitomte según sus crcterístics morfológics mcroscópics y microscópics fueron: Fusrium sp, Rhizopus sp, Rhizoctoni sp, Alternri sp. (Brnett y Hunter, 1897 y Nelson et l., 1983). Antgonismo in vitro de hongos ptógenos y l cep de Bcillus sutilis No. 21. Ejemplos del ntgonismo in vitro presentdo por los hongos isldos de ls plnts de jitomte se puede precir en ls Figurs 1 y 2. FH1553
División Ciencis de l Vid Cmpus Irputo-Slmnc Jueves 27 y Viernes 28 de Myo de 2010 Hongo Hongo Fig. 1. Alternri sp (Hongo) vs B. sutilis N 21 (B.s.) Hongo Fig. 2. Fusrium sp (Hongo) vs B. sutilis N 21 (B.s.) Trtmientos en inverndero. Ls Figurs 3, 4 y 5 muestrn los resultdos otenidos durnte el experimento después de ls 6 colects de frutos.. RECOLECCIÓN N 6 PROMEDIO PESO PESO (gr) 60 50 40 30 20 10 0 1 2 3 4 TRATAMIENTOS FH1554
División Ciencis de l Vid Cmpus Irputo-Slmnc Jueves 27 y Viernes 28 de Myo de 2010 Fig. 3. Peso de jitomtes Not: 1. B. sutilis No. 21 en ríces; 2. B. sutilis No. 21 en ríces y follje; 3. B. sutilis No. 21 en follje; y 4. Testigo. Ls letrs igules no presentn diferenci significtiv (α= 0.05%) RECOLECCIÓN N 6 PROMEDIO DIÁMETRO ECUATORIAL De (cm) 5 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 1 2 3 4 TRATAMIENTOS Fig. 4. Diámetro ecutoril (De) de jitomtes Not: 1. B. sutilis No. 21 en ríces; 2. B. sutilis No. 21 en ríces y follje; 3. B. sutilis No. 21 en follje; 4. Testigo. Ls letrs igules no presentn diferenci significtiv (α= 0.05%) RECOLECCIÓN N 6 PROMEDIO POLAR Dp (cm) 4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 1 2 3 4 TRATAMIENTOS Fig. 5. Diámetro polr (Dp) de jitomtes Not: T1. B. sutilis No. 21 en ríces; T2. B. sutilis No. 21 en ríces y follje; T3. B. sutilis No. 21 en follje; T4. Testigo. Ls letrs igules no presentn diferenci significtiv (α= 0.05%) FH1555
División Ciencis de l Vid Cmpus Irputo-Slmnc Jueves 27 y Viernes 28 de Myo de 2010 DISCUSION Y CONCLUSIONES Estudios de ntgonismos relizdos nivel de lortorio e inverndero con l cep mexicn Bcillus sutilis Nº 21 mostrron l posiilidd pr controlr hongos fitoptógenos en fres (Bsurto, 1993; Bsurto-Cden, 2006), y estos estudios nos sirvieron de se pr relizr nuestro trjo. Los hongos ptógenos isldos e identificdos fueron Alternri sp, Fusrium sp, Rhizopus sp y Rhizoctoni sp, los cules presentron ntgonismo in vitro frente l cep de B.sutilis Nº 21. Los resultdos del nálisis estdístico relizdo, considerndo cutro trtmientos en plnts de jitomte en su estdo de mdurción (presenci de colorción roj en el fruto), mostrron que los trtmientos T1 y T2, donde se plicó l solución concentrd de B.sutilis Nº 21 en l ríz y en l ríz y follje respectivmente, fueron mejores que los trtmientos T3 y T4, en cunto peso, diámetro polr y diámetro ecutoril y no mostrron diferencis significtivs entre ellos l finl del experimento; sin emrgo, el trtmiento T2 presentó myores vlores numéricos que el trtmiento T1 cundo se midieron los prámetros de diámetro polr y ecutoril. Por otro ldo, el trtmiento T3, donde se plicó l solución de concentrd de B.sutilis Nº 21 en el follje únicmente y el testigo T4, sin B.sutilis Nº 21, no presentron diferenci significtiv entre ellos l finl del periodo de experimentción. En generl, se puede decir que los resultdos de control iológico en los trtmientos T1 y T2 donde se plicó l cep de B.sutillis Nº21 presentron mejores resultdos de peso, diámetros polr y ecutoril; demás, se oservó que l mdurción de los frutos en estos trtmientos fue más rápid en comprción con los frutos de los trtmiento T3 yt4, lo que sugiere que posilemente B.sutilis Nº 21 tmién ctuó como gente promotor de crecimiento. Finlmente, otro specto importnte que se dee enftizr es que los prolems de plgs y enfermeddes deerín mnejrse de un mner sostenid trvés de un progrm de control integrdo, con el cul l plicción de vrios métodos de control, incluido el iológico, podrí llegrse estlecer un equilirio, de tl form que ls polciones de plgs y enfermeddes puedn mntenerse en un nivel tl que su impcto económico y socil en los cultivos se mínimo pr evitr el deterioro de l slud humn y mientl. BIBLIOGRAFIA Brnett H.L. y Hunter B.B. 1897. Illustrted gener of imperfect fungi. Fourth Edit. Mcmilln Pulishing Co. USA. 218 pp. FH1556
División Ciencis de l Vid Cmpus Irputo-Slmnc Jueves 27 y Viernes 28 de Myo de 2010 Bsurto, C.M. 1993. Alterntivs de control iológico de hongos fitoptógenos que tcn l fres. Act Universitri 3:3-10. Bsurto-Cden M.G.L. 2006. Control iológico de hongos fitoptógenos en fresón con cteris ntgonists en México. Tesis Doctorl. Universidd Politécnic de Vlenci. Vlenci, Espñ. Crisntes Enciso Theojri, A. Lorence, H. Rojs, y L. S. Sntillán. 1992. Estudio de l fctiilidd de l producción y vent de semills de jitomte resistente lepidópteros. Deprtmento de Biotecnologí. UAM-Iztplp, p. 22. Food nd Agriculture Orgniztion (FAO). 2004-2008. Sttics. http://www.fao.org. Fuchs J.G., Y. Moënne-Loccoz y G. Défgo. 1999. Aility of Nonpthogenic Fusrium oxysporum F047 to Protect Tomto ginst Fusrium Wilt. Biologicl Control 14. Montgomery D.C. 1991. Diseño y nálisis de experimentos. Ed. Ieromericn. Pp 112-116. Nelson P.E. Toussoun T.A. y Mrss W.F.O. 1983. Fusrium Species. The Pennsylvni Stte. University Press. 193 pp. Secretri de Comercio y Fomento Industril (SECOFI). 1993. Trtdo del lire comercio de Améric del Norte. Porrú. Pp.230, 253-255 Servicio de Informción Alimentri y Pesquer. Secretri de Agricultur, Gnderi, Desrrollo Rurl, Pesc y Alimentción (SIAP SAGARPA). 2008. Anurio Estdístico de l Producción Agrícol Ncionl. http://www.sip.sgrp.go.mx. Vliel, F. 1979. Introducción l Fitoptologí. INTA. Buenos Aires, Argentin. Pp 435-440. FH1557