Frecuencia de serotipos STEC en enfermedad humana. Argentina
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- María del Pilar Hidalgo Aguilera
- hace 5 años
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1 Nº de cepas = 125 Frecuencia de serotipos STEC en enfermedad humana. Argentina O157[H7] 7,6% O15[H27,H-,NT] 13,6% O121[H19] 2,2% O26[H2,11,NT] 1,% O17[H8,21,28, H-] 1,0% O111[H-,NT] 0,8% O103[H2,H-,NT] 0,6% O8[H16,19] 0,% O91[H21,H-,NT] 0,% O113[H,19,21] 0,3% ONT[H6,7,11,12,19, 9,NT] 3,1% OR[H11,H-,NT] 0,6% Serotipos múltiples 0,8% (O22:H8; O130:H11; O178:H19)
2 PERFILES GENÉTICOS DE CEPAS STEC O157 (11,%) (1,3%) (1,0%) (0,6%) (8,3%) Sensibilidad antimicrobiana: 97,8%
3 PERFILES GENÉTICOS DE CEPAS STEC NO-O157 Others stx2/ehxa Ge enetic profile stx2c(b) stx2/eae stx2d2(vh-b) stx2 stx1/eae/ehxa stx2/eae/ehxa No. of strains Sensibilidad antimicrobiana: 81,8%
4 Genotipos de stx Pronóstico de evolución clínica Aislamientos de STEC Subtipificación de stx Diagnóstico de STEC - Hospitalización - Monitoreo de evolución a SUH - Terapia expansiva temprana stx 2, stx 2c, stx 2d-activable SUH stx 1, stx 1c, stx 2b, stx 2e, stx 2f Infección Diarrea - Observación (ambulatoria) - Hospitalización no necesaria Recuperación espontánea Una subtipificación de stx temprana de los aislamientos de STEC permite establecer el riesgo de evolución a SUH
5 VIGILANCIA MOLECULAR Diversidad genética y relación clonal o Protocolo de PulseNet 2-h CDC o Enzimas : XbaI y AvrII/BlnI o Cepa de Referencia: S. Braenderup CDC#H9812 o Software: BioNumerics Ver..01 (Applied Maths) Base de Datos STEC O157 Nº de cepas: 228 Nº de patrones XbaI-PFGE: 1039 Patrones XbaI-PFGE prevalentes (13%) AREXHX (7,6%) AREXHX (5,1%) STEC no-o157 Nº de cepas: 1553 Nº de patrones XbaI-PFGE: 932 Patrones XbaI-PFGE prevalentes (2,3%) AREXSX (O15) AREXWX (O103) Humanas: 1675 Alimentos: 208 Animales: 196 Medio Ambiente: 35
6 Base de Datos Nacional de E. coli O157:H7 Patrones XbaI-PFGE Prevalentes Humanos / AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX01.01 AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AR_XbaI Pattern
7 Base de Datos Nacional de E. coli O157:H7 Patrones XbaI-PFGE Prevalentes Alimentos y Animales / AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX01.05 AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AREXHX AR_XbaI Pattern
8 COMPARACIÓN DE PATRONES DE PFGE DE ARGENTINA Y EE.UU. ARG - XbaI pattern AREXHX USA - XbaI pattern EXHX ARG - BlnI pattern AREXHA USA - BlnI pattern EXHA ARG = patrón 1 / CDC = patrón 2
9 Emergencia Clon hipervirulento: Brote de Espinaca EE.UU-2006 Brote: el 8 Septiembre de 2006 se notifica al CDC sobre la aparición de casos de gastroenteritis. Nº de afectados: 20 infecciones por E. coli O157, 10 hospitalizados, 31 SUH, 3 muertes en 26 Estados de EE.UU. Un caso confirmado en Canadá. Alimento implicado: espinacas baby frescas, envasadas, listas para el consumo, provenientes de ranchos y comercializados por una sola empresa de California. Exportado a Canadá, México, Islandia y China. El 1/09, FDA emitió un alerta al público de EE.UU, advirtiendo sobre el riesgo del consumo y ordenó el decomiso. Probable origen en un rancho del Valle de Salinas por agua contaminada con estiércol. Cepa implicada: E. coli O157:H7, el 20/09 el CDC anunció que el patrón de PFGE de la cepa aislada de un paquete de espinacas era idéntico a la cepa causal del brote.
10 Brotes Internacionales E. coli O157 Cepas, casos y hospitalizaciones Cepa Año Alimento País Sakai 1996 Brote de rabanitos Japón Hamburguesa 5 Estados NO, EE.UU. EDL Hamburguesa Michigan y Oregon, EE.UU. TW Espinaca 26 Estados de EE.UU. TW Lechuga Estados Este, EE.UU. Clado Nº de casos Nº hospitalizados (%) Nº de SUH (%) (3-5) (0-3) (29) 1 (7) (70) 0 (0) (51) 31 (15) (75) 8 (11)
11 Estudio genético : Análisis de clados 500 Aislamientos clínicos Evaluación de los polimorfismos de nucleótidos únicos (SNP) 39 GENOTIPOS (GS) 9 Clados Manning, 2008
12 CLON PREVALENTE DE E. coli O157 Emergencia del clado 8 > PORCENTAJE DE HOSPITALIZACIÓN > PORCENTAJE DE CASOS DE SUH > FRECUENCIA EN NIÑOS MAS PEQUEÑOS > FRECUENCIA EN SEXO FEMENINO Manning, 2008
13 Identificación de determinantes de virulencia putativos ECSP_2870 ECSP_2872 ECSP_2687 ECSP_1773 ECSP_022 ECSP_3286 ECSP_3620 (NorV) Dominio eucarionte Serina estearasa Dominio eucarionte adherencia Locus prot. reduce expresión de citoquinas Inmunidad innata NF-kB Repeticiones de ankirina / proteína-proteína Dominio euc. fam. Citocromo b unión a grupo hemo Nítrico oxido reductasa
14 Escherichia coli O157:H7 hipervirulento Provincia de Neuquén: casos de SUH /10000 niños menores de 5 años. Cepas aisladas entre ESTUDIO DE CLADOS POR RT-PCR 91,5% cepas humanas: clado 8 ESTUDIO DE GENOTIPOS DE TOXINA o 92,2% stx 2 /stx 2c ESTUDIOS DE FACTORES DE VIRULENCIA PUTATIVOS o 100% ECSP 3620 aumenta la colonización intestinal y la expresión de Stx2. o 92,2% ECSP 2870/2872 estimula la adaptación de la bacteria a los vegetales o 81,% Ecsp 2687 disminución de respuesta inflamatoria
15 COMPARACION DE LOS PERFILES GENETICOS DE LAS CEPAS STEC O157 AISLADAS DE INFECCIONES ESPORADICAS Y DE GANADO NOVIEMBRE ABRIL cepas humanas 5 cepas bovinas stx2/stx2(vh-a): 76,1 vs. 55,5% Relación clonal entre aislamientos humanos y bovinos por XbaI-PFGE. XbaI-PFGE: 18 patrones/75% similitud 136 cepas en 37 clusters 5 clusters con cepas de ambos orígenes # A: PT stx2/stx2(vh-a) (12 H / 1 B) # B: PT-.053-stx2/stx2(vh-a) (1 H / B) # C: PT stx2/stx2(vh-a) (1 H / B) # D: PT stx2/stx2(vh-a) (7 H / 1 B) # E: PT stx2/stx2(vh-a) (7 H / 1 B) D Astek et al. Foodborne Pathog. Dis., 9: 57-6, 2012
16 Brote Jardín Maternal. Ciudad de Córdoba Septiembre 2009 Septiembre /08/ M (21 m) D DS SUH F (33 m) D DS SUH CA (12 m) 5 niños D SUH, D (5), CA = E. coli O157:H7, stx2/stx2c(vh-a)/eae/ehxa XbaI-PFGE: AREX MLVA: ARMLVA.0010 Excreción prolongada: 15-9 días
17 Brote por STEC O10:H Del 02/05/11 al 28/06/11: 881 casos de SUH, 32 defunciones, 3.11 casos de diarrea Casos notificados por Alemania (95%), Austria, Dinamarca, España, Finlandia, Francia, Luxemburgo, Noruega, Países Bajos, Polonia, Suecia, Suiza, Reino Unido, República Checa, Canadá, EE.UU. Hechos relevantes: Alto Nº de casos de SUH Fundamentalmente adultos (88% > 20 años) Mayoría sexo femenino (70% ) Complicaciones neurológicas severas (50%) Probable vehículo: Semillas germinadas Fenogreco
18 Esquema propuesto de la emergencia del nuevo patotipo EAEC/STEC
19 CASO: En el mes de enero de 2013 una paciente de 6 años fue atendida en Centro Periférico de Salud Ramón Carrillo del Hospital Zonal de Trelew, por un cuadro de diarrea (sin evolución a SUH). En el Laboratorio de la Dirección de Patologías Prevalentes de la Pcia. de Chubut se realizó el aislamiento de una cepa de Escherichia coli. La cepa fue remitida al Laboratorio Nacional de Referencia donde se realizó la caracterización feno-genotípica.
20 Serotipificación: O10:H PCR múltiple wzxo10/flich/ter: O10:H + / ter- PCR aggr (región del gen correspondiente al regulador de expresión AggR): + PCR pcvd32 (fragmento correspondiente a la secuencia del plásmido): + PCR aaic C (gen que codifica para la proteína secretora AaiC ): + PCR lpfo113(gen que codifica para la fimbria polar larga): + gen stx: - ATB: S (ac. Nalidíxico, Amicacina, Ampicilina, Ciprofloxacina, Cloranfenicol, Colistín, Estreptomicina, Fosfomicina, Gentamicina, Tetraciclina, Trimetropim-sulfametoxazol y Nitrofurantoina) PFGE: 66% de similitud entre cepas EAEC aisladas durante el Dice (Opt:1.50%) (Tol 1.5%-1.5%) (H>0.0% S>0.0%) [0.0%-100.0%] 100 PFGE-XbaI 66%
21 El hallazgo de una cepa EAEC del serotipo O10:H enfatiza la necesidad de fortalecer la vigilancia basada en laboratorio de E. coli diarreigénico mediante metodologías sensibles, específicas y oportunas. Considerando que E. coli posee un genoma dinámico debemos estar alertas a la probable aparición de patógenos emergentes asociados a enfermedad humana.
22 FACTORES DE RIESGO Caso Control (relación: ) (edad, barrio, período de exposición) Buenos Aires (Garrahan), Mendoza (Notti) Enero 2001-diciembre 2002 Transmisión por alimentos Comer carne mal cocida en la casa y fuera de la casa Comer en reuniones sociales Transmisión persona a persona Contacto con niño con diarrea Concurrir a Jardín Maternal o de Infantes Transmisión por contacto con animales Vivir o visitar el campo Vivir o visitar un lugar con animales domésticos Factores del huésped Factores del huésped Ser de sexo femenino
23 FACTORES DE PROTECCION Lavado de manos siempre con agua y jabón después de manipular carne cruda Comer fruta y vegetales en forma frecuente Rivas et al. EID 2008, 1:
24 MEDIDAS DE INTERVENCION PREVENCION Laboratorio de control de alimentos Trazabilidad: de la granja al consumidor CONTROL Laboratorio de Salud Pública Investigación de brotes: del paciente a la fuente
25 Medidas de control Tratamiento específico de los casos, de acuerdo con el origen de la patología y la búsqueda de posibles nuevos casos. Toma de muestras clínicas de alimentos, ambiente y de origen animal. Coordinación entre las áreas de Epidemiología, Bromatología, Ambiente y Servicios Veterinarios, articulando acciones en forma oportuna y estratégica para reducir la morbimortalidad. Fuente: Manual de Normas y Procedimientos de Vigilancia y Control de Enfermedades de Notificación Obligatoria. Revisión Nacional 2007
26 MEDIDAS DE PREVENCION Asegurar la completa y homogénea cocción de la carne, especialmente la carne picada. Utilizar distintos utensilios para alimentos crudos y cocidos. Evitar el contacto de la carne cruda con otros alimentos.
27 MEDIDAS DE PREVENCION Consumir lácteos y jugos de frutas pasteurizados. Conservar la cadena de frío. Utilizar agua potable para consumo y preparación de alimentos
28 MEDIDAS DE PREVENCION Lavar cuidadosamente frutas y verduras, especialmente las que vayan a ingerirse crudas. Lavar cuidadosamente las manos después de ir al baño, y antes y durante la preparación de alimentos. Bañarse en aguas recreacionales habilitadas.
29 Muchas Gracias! Servicio Fisiopatogenia INEI ANLIS Dr. Carlos G. Malbrán Secretaría de Políticas, Regulación e Institutos Ministerio de Salud
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