Prueba ABtest. Para la cuantificación del pool beta-amiloide en sangre TOTAL

Transcripción

1 Prueba Para la cuantificación del pool beta-amiloide en sangre TOTAL

2 Introducción Es esencial un diagnóstico temprano. En la práctica clínica actual el diagnóstico de la enfermedad de Alzheimer se realiza en estadios de la enfermedad con un avanzado proceso neurodegenerativo, donde el paciente manifiesta ya los síntomas de demencia y además se han producido daños cerebrales irreversibles. Braak Stages 1 6 2

3 Introducción Es necesario diagnosticar la enfermedad en una fase muy temprana, antes de que en el cerebro se hayan producido lesiones irreversibles y antes de que aparezcan los primeros síntomas de la enfermedad. Es necesario además disponer de herramientas para la investigación de la enfermedad de Alzheimer que nos ayuden a: Identificar las diferentes etapas de la enfermedad y a diferenciar entre personas sanas y enfermas. Monitorizar la respuesta a los tratamientos y la evolución de la enfermedad. Mejorar el diseño de los ensayos clínicos en enfermedad de Alzheimer 3

4 El objetivo de Araclon es poner en manos de los profesionales médicos una herramienta que ayude a diagnosticar la enfermedad en una fase lo más temprana posible, antes de que aparezcan los primeros síntomas y los daños cerebrales sean ya irreversibles. Y todo esto, con una muestra poco molesta para el paciente, fácil de obtener y de bajo coste. 4

5 Araclon Biotech ha desarrollado y patentado unos kits de detección de los péptidos Aß 40, 42 y 17 en sangre TOTAL, con unos niveles de sensibilidad, detección y reproducibilidad mayores que cualquier otro producto en el mercado. 40, 42 y 17 son kits ELISA colorimétricos en los que Araclon Biotech ha incorporado innovaciones resultado de la investigación que desarrolla. 5

6 40, 42 y 17, junto con los trabajos de investigación llevados a cabo, nos han permitido la determinación directa del POOL de beta-amiloide (Aβ) en sangre TOTAL, un nuevo concepto de importancia relevante para la investigación de la enfermedad de Alzheimer, que nos permite cuantificar la totalidad de los péptidos beta-amiloides 40, 42 y 17 existentes en sangre TOTAL. 6

7 es una prueba que determina directamente en SANGRE TOTAL los niveles de las proteínas beta-amiloides 40, 42 y 17 (Pool de beta-amiloide). Araclon Biotech realiza actualmente esta prueba en sus instalaciones utilizando sus propios kits ( 40 / 42 / 17) para, de esta forma, garantizar la correcta determinación. Con nuestra prueba, se detecta la cantidad total de Aβ40, Aβ42 y Aβ17 en sangre (pool de beta-amiloide en sangre TOTAL). Hasta ahora, con los kits convencionales se detectaba sólo los péptidos Aβ40 y 42 libres en el plasma (aprox. el 15% del total). 7

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10 En la actualidad está ya disponible como herramienta cuantificadora de los péptidos Aβ40, Aβ42 y Aβ17 para cualquier estudio de investigación que la requiera. Los parámetros que proporcionamos con la realización de son: Aβ L + Aβ P + Aβ C = POOL en sangre TOTAL de las proteínas beta-amiloides Aβ 40.. pg/ml.. pg/ml.. pg/ml.. pg/ml Aβ 42.. pg/ml.. pg/ml.. pg/ml.. pg/ml Aβ 17.. pg/ml.. pg/ml.. pg/ml.. pg/ml Aβ L Aβ P Fracción de péptido beta-amiloide libre en plasma Fracción de péptido beta-amiloide unido a otros componentes polasmáticos Aβ C Fracción de péptido beta-amiloide unido a las células sanguíneas. 10

11 Araclon Biotech ha diseñado un sistema logístico de recogida, almacenamiento, transporte y entrega de muestras que asegura el cumplimiento de las condiciones adecuadas para realizar la prueba, de manera que cualquier profesional dedicado a la investigación en cualquier área relacionada con la enfermedad de Alzheimer pueda acceder a la realización de la prueba. MUY IMPORTANTE: Para garantizar los correctos resultados de es necesario cumplir con las condiciones que se describen a continuación. 11

12 Servicio de apoyo técnico Servicio de apoyo técnico Servicio de apoyo técnico y logístico. 12

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14 Aparataje: Centrifuga g Ultracongelador (-80 ºC) 14

15 Materiales: Un tubo de polipropileno con EDTA de 10ml. Dos micropipetas desechables Ocho tubos de polipropileno de 1,5 ml etiquetados. 15

16 1. Codificación de las muestras: Los tubos para guardar las muestras tienen que estar perfectamente codificados. (Comprobar que las etiquetas a utilizar son las adecuadas para soportar temperaturas de -80ºC) 16

17 2. Extracción de 10 ml de sangre. Condiciones recomendadas de extracción: En ayunas, sin ejercicio previo, noche anterior dieta blanda y sin ingesta de alcohol. 17

18 3. Rellenar el tubo de 10 ml (de polipropileno con EDTA) con la sangre (10 ml ). Es importante proceder al centrifugado de la sangre y el posterior alicuotado del plasma y del sedimento de células inmediatamente después de la extracción. Si esto no fuese posible de manera inmediata, podremos guardar la muestra a temperatura de refrigeración ( Tª 5º ± 3ºC) un máximo de 8 horas hasta proceder al centrifugado, alicuotado y congelación a -80ºC. 18

19 4. Centrifugar el tubo 15 minutos a g. 19

20 5. Recoger, con una de las micropipetas desechables, el plasma procedente del tubo centrifugado y rellenar 4 tubos Eppendorf de polipropileno de 1,5 ml, poniendo 1 ml de plasma en cada tubo. Comprobar que los tubos están etiquetados con el código correspondiente. Importante: Procurar no absorber el precipitado, especialmente al recoger la última alícuota. 20

21 6. Recoger con la otra micropipeta desechable, el sedimento de células del tubo centrifugado y rellenar 4 tubos Eppendorf de polipropileno de 1,5 ml, poniendo 0,5-0,7 ml en cada uno. Comprobar que los tubos están etiquetados con el código correspondiente. 21

22 Servicio de apoyo técnico 22

23 CONGELAR -80 C Antes de congelar a -80 ºC comprobar que los tubos están perfectamente cerrados y etiquetados. 23

24 Servicio de apoyo técnico y logístico. 24

25 Unidades de muestras para enviar. Por seguridad recomendamos guarden las dos alícuotas de células y las dos de plasma restantes a Tª de (-80 º C). 25

26 Unidades de muestras para enviar. Comprobar de nuevo que las muestras están perfectamente identificadas. 26

27 Una vez estén todas las muestras preparadas se coordinará con Araclon la recogida de las muestras. Araclon coordinará con la empresa courier la entrega del material necesario para transportar las muestras a la temperatura correcta (-80 ºC) hasta el laboratorio de referencia donde se realice el. 27

28 Asimismo, Araclon coordinará los plazos y la documentación necesaria para hacer llegar las muestras al laboratorio de referencia. 28

29 Finalmente, y en el tiempo convenido previamente entre las dos partes, Araclon emitirá el informe de los resultados obtenidos con. 29

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31 Un mundo de valores 31