NÚMERO PROMEDIO DE HUEVOS

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1 ANEXO 1. INFORME TECNICO FINAL DEL PROYECTO DE INVESTIGACION Identificación y caracterización de aminoácidos y de ácidos grasos esenciales (polares y neutros) en los huevos del Trambollito vela (Emblemaria hypacanthus) alimentado con dietas artificiales y alimento vivo. RESUMEN El objetivo del presente estudio fue evaluar el desove en función de la composición en aminoácidos y ácidos grasos esenciales del alimento, mediante FRECUENCIA DE DESOVE, número y DIAMETRO de huevos, PORCENTAJE DE ECLOSIÓN y LONGITUD de las larvas recién NACIDAS, considerándolos como indicadores de la calidad del desove y reproducción del Trambollito Vela, en condiciones de laboratorio. El diseño experimental consistió en 4 tratamientos y 3 réplicas, en cada acuario se colocó una pareja de reproductores (machos 1.33 g; hembra 0.44 g). Se alimentaron a saciedad con una dieta comercial (alimento particulado), y tres presentaciones del alimento vivo (misidáceos naturales, misidáceos enriquecidos y crías de gupie enriquecidas), durante 15 días de acondicionamiento previo y durante 30 días de evaluación de los desoves. Las condiciones de calidad del agua NO FUE LIMITANTE para el desove del Trambollito. Los principales índices de reproducción encontrados en este estudio, se muestran en la tabla 1. El NÚMERO PROMEDIO DE HUEVOS por tratamiento fue: 208 para las crias de gupies; 261 para misidáceos naturales; y 282 para misidáceos enriquecidos; el DIAMETRO de los huevos fue de mm para crias de gupies; mm para misidáceos naturales; y mm para misidáceos enriquecidos, y LA LONGITUD DE las larvas recién NACIDAS fue de 4.10±0.15 mm, 3.53±1.06 mm y 4.05±0.15 mm, respectivamente. Todos los índices obtenidos coinciden con investigaciones previas sobre la misma especie. Los reproductores alimentados con la dieta comercial no desovaron. La composición en aminoácidos y ácidos grasos esenciales de los huevos desovados y de los alimentos aún no se conoce pues se mandaron a analizar al CIBNOR. Estos datos se incluirán en la publicación que se está elaborando. INTRODUCCION La falta de desarrollo de métodos adecuados de alimentación durante la etapa larvaria ha venido constituyendo una de las principales limitantes en el cultivo de varias especies de peces marinos (Lazo, 2000). Aunque se ha puesto cada vez mayor énfasis en el desarrollo de dietas artificiales microparticuladas, hasta la fecha no se han obtenido resultados tan satisfactorios como con el alimento vivo. Dado que la dependencia del alimento vivo desde el momento del nacimiento hasta la obtención del juvenil, varía según la especie (5 a 30 dias de edad) se trata de reducir su suministro al mínimo debido a su alto costo (Tucker, 1998; Lazo, 2000). Rotíferos y Artemia son las dos especies mayormente utilizadas, para alimentar a las larvas en los inicios de la etapa

2 larvaria; sin embargo, es ampliamente conocido que ambas especies son de forma natural deficientes en ácidos grasos insaturados (AGI's) de la serie w-3 (especialmente en DHA; Sargent, 1997) por lo que, es indispensable enriquecer el alimento vivo con productos ricos en AGI's, antes de suministrarlos a las larvas. Cualquiera que sea el método utilizado para enriquecer a los rotíferos o Artemia, los AGI's incorporados en el alimento vivo lo hacen principalmente en los lípidos neutros (triglicéridos) y no en los polares (fosfolípidos), los cuales, son mejor utilizados y cumplen una mejor función en el transporte de los ácidos grasos esenciales absorbidos por el intestino (Lazo, 2000; Civera-Cerecedo et al. 2001). Por otro lado, es importante determinar la función de los amino ácidos libres en el desarrollo embrionario y larvario de esta especie. Considerando lo anterior, el presente proyecto persigue conocer los efectos de alimentar a los adultos con los diferentas tipos de alimento (con y sin enriquecer con AGI's) y su efecto en la reproducción y composición nutricional tanto de huevos y larvas del Trambollito vela con dietas artificiales y alimento vivo enriquecido y sin enriquecer. MATERIAL Y METODOS Un lote de 50 machos y 20 hembras se colectaron en la Bahía de La Paz (zona de Pichilingue), mismos que fueron trasladados al Laboratorio de Biología Experimental, del CICIMAR y ubicados primeramente en dos tanques de fibra de vidrio (140 L) (machos o hembras por separado) durante un período de acondicionamiento de dos semanas. Posteriormente, se acomodaron en grupos de 5-6 organismos, en los acuarios del sistema experimental, manteniendo los sexos por separado, durante otras dos semanas, para después juntar los sexos. Las condiciones del estudio fueron: Fotoperíodo: 13D: 11N, Volumen de los acuarios: 40 L y Flujo del agua: 0.5 L/min. Estos últimos factores de acuerdo a los trabajos de Contreras-Olguín et al. (2001). Se mantienen separados los sexos, para acondicionar a los organismos a los acuarios y al alimento respectivo, y evitar que comiencen sus actividades reproductivas. Para realizar este trabajo, se utilizó un Diseño Experimental factorial de 4 X 3 (4 tratamientos, 3 réplicas por tratamiento). La densidad fue de una pareja de reproductores/acuario. Dado que, cada hembra puede producir, en promedio, 150 huevos cada tercer día, el periodo experimental fue de 30 días. EL PESO inicial promedio fue de: Hembras: 0.44±0.08 g; Machos: 1.33±0.20 g. Los acuarios se mantuvieron a una temperatura del agua de 25.9 ± 0.44 C. Esta temperatura se seleccionó con base al estudio previo de Coronado-Hinojosa (2004). Salinidad: 34.0±2.36 ; Oxígeno disuelto: 5.9±0.4 mg/l; amoníaco total: 0.0 mg/l; Nitritos: < 0.3 mg/l. Para las dietas se eligió dar misidáceos en dos de ellas, ya que es un alimento que ha dado buenos resultados con anterioridad, crías de gupies (pez de agua dulce) y una dieta comercial. Con lo cual, los tratamientos consistieron de: A) misidáceos naturales, B) misidaceos enriquecidos, C) crías de gupies enriquecidos y D) dieta comercial (Extra Bits ). El enriquecedor empleado en dos de las dietas consistió en probar una emulsión elaborada a base de 20% de aceite de ojo de atún, rico en omega 3, especialmente en ácido decahexanoico (DHA). Esto se hizo como vinculación con el proyecto SAGARPA No. 138 "Aprovechamiento de globos oculares de atún para

3 extracción de aceites ricos en ácidos grasos n-3 HUFAs y fosfolípidos como materia prima en la elaboración de enriquecedores para alimentos vivos y balanceados de larvas de peces". El método de enriquecimiento se basa en disolver dos mililitros de la emulsión en el cultivo de artemia recién eclosionada y darles un baño de aproximadamente 10 horas; posteriormente, se congelaba y se ofrecía (previa descongelación) a los misidáceos y a las crías de gupies. Todos los alimentos se ofrecieron a saciedad, 2 veces/día. RESULTADOS De manera sucinta, se enlistan las actividades realizadas para el montaje y mantenimiento del sistema experimental así como el desarrollo de la experimentación: Meta 1. Montaje del sistema de acuarios Instalación de los acuarios dentro del LBE (Fig. 1). Figura 1. Sistema experimental de acuarios Meta 2. Acondicionamiento de reproductores al sistema experimental Se mencionó en la metodología la cantidad de reproductores recolectados y trasladados al Laboratorio de Biología Experimental, así como el PESO por sexo registrados en la biometría inicial. La tabla 2 muestra las mediciones al inicio y al final del periodo experimental de los reproductores utilizados en el estudio. Tabla 2. Peso promedio (en g) de machos y hembras de Trambollito vela al dar inicio y al final del periodo experimental de 30 días. Machos Hembras Pi Pf Pi Pf Dieta comercial

4 Gupies enriquecidos Misidáceos naturales Misidáceos enriquecidos Pi= peso inicial; Pf= peso final Meta 3. Cultivo de alimento vivo y dietas Se mantuvo en el Laboratorio de Biología Experimental (LBE) una población de misidáceos colectados del mar (Pichilingue, Bahía de La Paz) y un lote de reproductores de un pez de agua dulce, Poecilia reticulata, de la familia Poecilidae, de los cuales obteníamos las crías para ser enriquecidas y luego ofrecerlas como alimento a los adultos del Trambollito vela. En la tabla 3 se muestra la composición en ácidos grasos de la emulsión utilizada para el enriquecimiento de las crías de gupies y misidáceos. Tabla 3. Composición porcentual de ácidos grasos en la emulsión Ác. Graso Promedio ds 14: so 14: : : :1 n :2 n :2 n : : : :1 n :1 n :2 n :3 n :4 n :1 n :1 n :4 n :5 n :6 n Omega saturados EPA+DHA EPA: ácido eicosapentanoico DHA: ácido dodehexanoico Puede notarse que el contenido en ácidos grasos esenciales (AGE) omega-3, así como la proporción de los ácidos EPA/DHA es bastante alta. Meta 4. Obtención de huevecillos del Trambollito vela 4.1 Registro de parámetros ambientales.

5 Se presentan a continuación los resultados del registro de estos factores de la calidad del agua. Oxígeno disuelto: 5.9±0.4 mg/l Salinidad: 34.±2.36 Amoníaco total: 0.0±0.0 mg/l Nitritos: < 0.3 mg/l De manera particular los valores de Amonio total y Nitritos encontrados no sobrepasan los límites aceptados para otras especies de peces marinos (Tucker, 1998). 4.2 Alimentación de los reproductores de Trambollito Vela El siguiente cuadro comparativo presenta los resultados encontrados en el presente estudio sobre los principales índices de la calidad de los desoves del Trambollito vela. No hay datos para los organismos alimentados con la dieta comercial debido a que no desovaron. Tabla 1. Datos de la reproducción del Trambollito vela (Emblemaria hypacanthus) a 26 C. Gupies Mysidaceos Mysidaceos Enriquecidos Naturales Enriquecidos Promedio desoves totales Frecuencia de desoves (por día) Total de huevos por tratamiento Promedio de huevos por pareja Total huevos fertilizados# Total huevos no fertilizados# 894 % Global de fertilización# Diámetro del huevo (mm) Periodo de incubación (días) Porcentaje de eclosión** Número de larvas producidas** Longitud de larvas recién nacidas (mm) GE: crías de gupie enriquecidas MN: misidáceos naturales ME: misidáceos enriquecidos #: Estos valores representan la suma de los tres tratamientos, para mostrar que el porcentaje global de fertilización es bastante alto y coincidente con resultados previos realizados en el Laboratorio de Biología Experimental. Cabe señalar que se presentaron problemas con la calidad del agua donde se realizaba la incubación de los huevos, lo que ocasiono elevadas mortandades aún en la etapa de desarrollo embrionario, razón por la cual el Porcentaje de eclosión ** y Número de larvas producidas **, fueron pobres comparado con

6 los resultados obtenidos en experiencias anteriores por Contreras-Olguín y col. (2002), Coronado-Hinojosa (2004) y Anguas-Vélez et al. (en preparación). IMPACTO La información generada sobre el cultivo de las especies de peces de ornato permite la disminución sobre la pesca de las especies nativas de los arrecifes de coral, se protege a las especies que pueden estar contenidas en la NOM- 059 de la Sagarpa y la Semarnat. Permite la dedicación de todos los miembros de una familia de pescadores, en las actividades de limpieza, empaque y comercialización de los peces cultivados, con pocos recursos económicos de operación pero excelentes ingresos por el valor económico de los peces de ornato así cultivados. Asimismo, esta línea de investigación permite la aplicación de los resultados en los cursos de posgrado del cicimar y genera material para las tesis del mismo nivel.