LIAISON VZV IgG (310850)

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1 DiaSorin S.p.A. Via Crescentino snc Saluggia (Vercelli) - Italy Atención a las modificaciones! LIAISON VZV IgG (310850) 1. FINALIDAD DEL ENSAYO El ensayo LIAISON VZV IgG emplea la tecnología de la quimioluminiscencia (CLIA) en un ensayo inmunológico para la determinación cuantitativa de anticuerpos específicos de clase IgG dirigidos contra el virus de varicela-zoster (VZV) en muestras de suero o plasma humano. El ensayo debe realizarse en la serie de instrumentos LIAISON. 2. SUMARIO Y EXPLICACIÓN DEL TEST La varicela es una enfermedad viral aguda, muy contagiosa, caracterizada por un exantema máculo-papular generalizado, a menudo acompañada con hipertermia. La enfermedad tiene distribución mundial, con estacionalidad clara con un pico principalmente en invierno y en primavera. Su evolución es generalmente benigna si se manifiesta en edad pediátrica pero tiende a ser más grave en personas adultas y puede ser fatal, sobre todo en recién nacidos y en sujetos inmunocomprometidos. El virus de varicela-zoster (VZV), el agente etiológico de la varicela, forma parte de la familia de los Herpesviridae y presenta baja variabilidad genética (se conoce solamente un serotipo viral). Después de la infección primaria, el virus VZV permanece en estado latente en los ganglios nerviosos y ante una reactivación, puede causar el herpes zoster, una enfermedad que afecta sobre todo a personas ancianas y a las inmunocomprometidas, caracterizada por dolor agudo radicular neurálgico bien localizado y erupción unilateral de lesiones vesiculares variceliformes. La IgM anti-virus de varicela-zoster puede ser detectada durante la infección primaria y la reactivada. La determinación del estado inmunitario del paciente para el virus VZV puede ayudar para la gestión de los pacientes inmunocomprometidos y para la suministración de fármacos antivirales. La varicela en las mujeres susceptibles embarazadas puede provocar una enfermedad grave del recién nacido, a veces fatal. Si la infección se produce en los primeros cuatro meses de gestación puede causar malformaciones congénitas, mientras que si se contrae cerca de la fecha del parto puede causar la diseminación generalizada de la enfermedad, con evolución potencialmente fatal. Si bien las infecciones específicas se puedan prevenir o modificar con la suministración de inmunoglobulinas anti-vzv o tratar con fármacos antivirales, la varicela se puede controlar solamente con la vacunación. 3. PRINCIPIO DEL ENSAYO El método para la determinación cuantitativa de IgG específica anti-virus de varicela-zoster es un ensayo indirecto basado en el principio de la quimioluminiscencia (CLIA). El antígeno del virus de varicela-zoster se emplea para recubrir las partículas magnéticas (fase sólida) y un anticuerpo monoclonal de ratón anti-igg humana está enlazado a un derivado del isoluminol (conjugado anticuerpo-isoluminol). Durante la primera incubación, los anticuerpos anti-virus de varicela-zoster presentes en los calibradores, en las muestras o en los controles enlazan la fase sólida. Durante la segunda incubación, el anticuerpo conjugado reacciona con la IgG anti-virus de varicela-zoster ya enlazada a la fase sólida. Después de cada incubación, se elimina el material no enlazado mediante un ciclo de lavado. A continuación, se añaden los reactivos starter que inducen una reacción de quimioluminiscencia. La señal luminosa, y por lo tanto la cantidad de conjugado anticuerpo-isoluminol, se mide con un fotomultiplicador en unidades relativas de luz (RLU, relative light units) e indica la concentración de IgG anti-virus de varicela-zoster presente en los calibradores, en las muestras o en los controles. 4. MATERIALES SUMINISTRADOS Integral de reactivos Partículas magnéticas (1,3 ml) Calibrador 1 (2,7 ml) Calibrador 2 (2,7 ml) Diluyente de muestras (28 ml) Conjugado (13 ml) Partículas magnéticas recubiertas con antígeno del virus de varicela-zoster (extracto parcialmente purificado de cultivos celulares infectados, cepa ROD), albúmina sérica bovina, tampón PBS, < 0,1% azida sódica. Suero/plasma humano que contiene niveles bajos de IgG anti-virus de varicela-zoster, albúmina sérica bovina, tampón fosfato, 0,2% ProClin 300 y un colorante amarillo inactivo. Las concentraciones de los calibradores (mui/ml) son calibradas contra la Preparación Estándar Internacional de la OMS (W1044). Suero/plasma humano que contiene niveles altos de IgG anti-virus de varicela-zoster, albúmina sérica bovina, tampón fosfato, 0,2% ProClin 300 y un colorante azul inactivo. Las concentraciones de los calibradores (mui/ml) son calibradas contra la Preparación Estándar Internacional de la OMS (W1044). Albúmina sérica bovina, tampón fosfato, 0,2% ProClin 300 y un colorante amarillo inactivo. Anticuerpos monoclonales de ratón anti-igg humana conjugados con un derivado del isoluminol, albúmina sérica bovina, tampón PBS, 0,2% ProClin 300, conservantes. Número de ensayos 50 Todos los reactivos se suministran listos para su uso. El orden de los reactivos refleja el orden con el que se han ensamblado los contenedores en el integral de reactivos. 32 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011

2 Materiales requeridos, pero no suministrados Instrumentos LIAISON XL Instrumentos LIAISON LIAISON XL Cuvettes (código X0016). LIAISON Module (código ). LIAISON XL Disposable Tips (código X0015). LIAISON XL Starter Kit (código ). LIAISON Starter Kit (código ) o LIAISON XL Starter Kit (código ). LIAISON Light Check (código ). LIAISON Wash/System Liquid (código ). LIAISON Wash/System Liquid (código ). LIAISON XL Waste Bags (código X0025). LIAISON Waste Bags (código ). LIAISON Cleaning Kit (código ). Otros materiales requeridos Controles LIAISON VZV IgG (negativo y positivo) (código ). 5. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Sólo para uso diagnóstico in vitro. Todas las unidades de suero y plasma utilizadas para la fabricación de los componentes de este kit se han analizado y se han encontrado no reactivas para la presencia de HBsAg, anti-hcv, anti-hiv-1 y anti-hiv-2. Sin embargo, visto que ningún método de análisis puede asegurar que los agentes patógenos estén ausentes, todo el material de origen humano se deberá considerar potencialmente infeccioso y manipularlo como tal. 6. NORMAS DE SEGURIDAD No coma, beba, fume o se maquille durante la ejecución del ensayo. No pipetee las soluciones con la boca. Evite el contacto directo con el material potencialmente infeccioso usando batas de laboratorio, gafas de protección y guantes desechables. Lávese cuidadosamente las manos al terminar el ensayo. Evite salpicaduras o formación de aerosoles. En caso de que esto sucediera, cada gota de reactivo se debe eliminar con una solución de hipoclorito sódico al 5% y el medio utilizado se deberá tratar como material residuo potencialmente infeccioso. Todas las muestras, los reactivos biológicos del kit y los materiales usados para efectuar el ensayo se deben considerar capaces de transmitir agentes infecciosos; por lo tanto los residuos se deberán eliminar de acuerdo con las reglamentaciones de las agencias autorizadas que tengan jurisdicción sobre el laboratorio, y con las normativas de cada país. El material desechable deberá ser incinerado; los residuos líquidos deberán ser descontaminados con una solución de hipoclorito sódico a una concentración final del 5% durante media hora como mínimo. Cualquier material que pueda ser reutilizado deberá ser tratado en autoclave con un tratamiento de exceso (overkill) (USP 24, 2000, p. 2143). Generalmente se considera que una hora a 121 C es un tiempo de esterilización adecuado; sin embargo se recomienda a cada usuario que verifique la eficacia del ciclo de descontaminación mediante una validación inicial y el uso rutinario de indicadores biológicos. Los reactivos que contienen ProClin 300 se clasifican como irritantes según las Directivas Europeas aplicables: R 43 - Posibilidad de sensibilización en contacto con la piel. S 24 - Evítese el contacto con la piel. S 37 - Úsense guantes adecuados. S 60 - Elimínense el producto y su recipiente como residuos peligrosos. 7. PREPARACIÓN DEL INTEGRAL DE REACTIVOS Observe escrupulosamente las siguientes precauciones importantes para manipular los reactivos: Resuspensión de las partículas magnéticas Las partículas magnéticas deben estar completamente resuspendidas antes de colocar el integral en el instrumento. Siga los pasos indicados a continuación para garantizar la suspensión completa de las partículas: Antes de quitar la protección de los contenedores, gire hacia adelante y hacia atrás la ruedecilla dentada situada por debajo del contenedor de las partículas magnéticas hasta que la suspensión adopte una coloración morena. Agite horizontalmente el integral de reactivos con delicadeza y sumo cuidado para favorecer la suspensión de las partículas magnéticas (evite la formación de espuma). Controle visualmente el fondo del contenedor de las partículas magnéticas para cerciorarse de que no hayan quedado partículas magnéticas sedimentadas. Seque con sumo cuidado la superficie de cada pared para eliminar el líquido residual. Si es necesario, repita el procedimiento hasta la completa resuspensión de las partículas magnéticas. Formación de espuma en los reactivos Para garantizar las mejores prestaciones del integral, se recomienda evitar la formación de espuma en los reactivos. Observe las recomendaciones siguientes para evitarla: Antes de usar el integral, controle visualmente los reactivos, especialmente los calibradores (situados en la segunda y tercera posición del integral, después del contenedor de las partículas magnéticas) para excluir la presencia de espuma. Si se observa la presencia de espuma después de la resuspensión de las partículas magnéticas, coloque el integral en el instrumento y deje que se disuelva la espuma. El integral está listo para el uso cuando se ha dejado descansar en el instrumento, las partículas magnéticas han sido mantenidas en agitación automática y se ha disuelto la espuma. 33 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011

3 Cargar el integral en el área de los reactivos del instrumento Instrumentos LIAISON Coloque el integral de reactivos en el área de los reactivos del instrumento con la etiqueta de los códigos de barras situada a la izquierda y déjelo agitar durante 30 minutos antes del uso. Durante este tiempo las partículas magnéticas serán mantenidas en agitación automáticamente para garantizar una resuspensión completa. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para cargar las muestras e iniciar el ensayo. Instrumentos LIAISON XL El instrumento LIAISON XL está dotado de un dispositivo magnético interno que favorece la dispersión de las micropartículas antes de colocar un integral de reactivos en el área de los reactivos del instrumento. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para los detalles técnicos. a. Coloque el integral de reactivos en la ranura específica. b. Deje descansar el integral de reactivos en el dispositivo magnético por al menos 30 segundos (hasta varios minutos). Si es necesario, repita la operación. Luego coloque el integral de reactivos en el área de los reactivos del instrumento con la etiqueta situada a la izquierda y déjelo agitar durante 15 minutos antes del uso. Durante este tiempo las partículas magnéticas serán mantenidas en agitación automáticamente para garantizar una resuspensión completa. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para cargar las muestras e iniciar el ensayo. 8. CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD DEL INTEGRAL DE REACTIVOS En el momento de su llegada, el integral de reactivos se debe mantener en posición vertical para facilitar la resuspensión de las partículas magnéticas. Si el integral se conserva sellado y se mantiene en posición vertical, los reactivos son estables a 2-8 C hasta la fecha de caducidad. No congele. El integral de reactivos no se debe usar pasada la fecha de caducidad indicada en las etiquetas del kit y del integral. Después de la eliminación de la protección, el integral de reactivos es estable durante cuatro semanas si se conserva refrigerado a 2-8 C o bien en el área de los reactivos del instrumento. 9. RECOGIDA Y PREPARACIÓN DE LAS MUESTRAS El ensayo se puede efectuar en muestras de suero o plasma humano. Se pueden utilizar anticoagulantes como el citrato, el EDTA y la heparina. Recoja la sangre mediante punción venosa, déjela coagular y separe el suero del coágulo lo antes posible. Clarifique por filtración o centrifugación antes del ensayo las muestras que presenten material en suspensión, opalescencia, lipemia o residuos eritrocitarios. No use muestras fuertemente hemolizadas o lipémicas, ni muestras que presenten material suspendido o evidente contaminación microbiana. Elimine las eventuales burbujas de aire que pueda haber antes del ensayo. Si el ensayo se lleva a cabo dentro de los siete días sucesivos a la recogida, las muestras se pueden conservar a 2-8 C. En caso contrario, se deben subdividir en alícuotas congeladas a 20 C o a temperaturas inferiores. Si las muestras han sido descongeladas, agítelas con cuidado antes de realizar el ensayo. Ocho muestras de diferente reactividad se han conservado durante siete días a 2-8 C y se han sometido a cinco ciclos de congelación y descongelación. Los resultados no han presentado diferencias significativas. El volumen mínimo de muestra necesario es 170 L (20 L de muestra L de volumen muerto). 10. CALIBRACIÓN El ensayo de los calibradores específicos contenidos en el integral de reactivos permite ajustar la curva predefinida memorizada por el fabricante en las unidades relativas de luz (RLU = relative light units) detectadas. Con una solución de los calibradores es posible realizar cuatro calibraciones. La calibración debe realizarse en triplicado cada vez que se verifique al menos una de las siguientes condiciones: Se usa un nuevo lote de integral de reactivos o un nuevo lote de reactivos starter. La calibración anterior fue realizada más de dos semanas antes. El instrumento ha sufrido una intervención de asistencia técnica. Los valores de los controles están fuera de los rangos esperados. Instrumentos LIAISON : Los valores de los calibradores están almacenados en los códigos de barras de la etiqueta del integral. Instrumentos LIAISON XL: Los valores de los calibradores están almacenados en el Tag para identificación de radiofrecuencia (Radio Frequency IDentification transponder, RFID Tag). 11. PROCEDIMIENTO OPERATIVO Para obtener unas prestaciones analíticas ideales hay que respetar estrictamente las instrucciones del manual operativo del instrumento. Analizadores LIAISON. Cada parámetro del test se identifica mediante el código de barras incluido en la etiqueta del integral de reactivos. Si el código de barras no se puede leer, no será posible usar el integral y tendrá que desecharse. Para obtener información detallada, consulte el manual del analizador. Analizadores LIAISON XL. Cada parámetro del test se identifica mediante la información codificada en la etiqueta de identificación por radiofrecuencia (RFID) del integral de reactivos. Si la etiqueta RFID no se puede leer, no será posible usar el integral y tendrá que desecharse. Para obtener información detallada, consulte el manual del analizador. El instrumento realiza las operaciones siguientes: 1. Distribuye calibradores, controles o muestras en el módulo de reacción. 2. Distribuye las partículas magnéticas recubiertas. 3. Distribuye el diluyente de muestras. 4. Incuba. 5. Lava con el líquido de lavado. 6. Distribuye el conjugado en el módulo de reacción. 7. Incuba. 8. Lava con el líquido de lavado. 9. Añade los reactivos starter 1 y 2 y mide la luz emitida. 34 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011

4 12. CONTROL DE CALIDAD Los controles LIAISON se deben analizar individualmente para evaluar las prestaciones del test. El control de calidad se debe realizar analizando los controles LIAISON VZV IgG (a) por lo menos una vez por cada día de trabajo, (b) cuando se usa un nuevo integral de reactivos, (c) cuando se calibra el kit, (d) cuando se usa un nuevo lote de reactivos starter, (e) cuando se determina la adecuación de las prestaciones del integral de reactivos abierto con más de cuatro semanas de anterioridad, o según las disposiciones legislativas y las reglamentaciones vigentes en cada país. Los valores de los controles tienen que estar comprendidos entre los rangos esperados: cada vez que uno o ambos valores estén fuera de los rangos esperados habrá que volver a efectuar la calibración y probar de nuevo los controles. Si los valores experimentales de los controles estén de nuevo fuera de los rangos predefinidos después de la calibración, habrá que repetir el test usando un frasco de control no abierto. Si los valores de los controles estén fuera de los rangos esperados, los resultados de las muestras no deben ser notificados. Las prestaciones de otros controles se deben evaluar para asegurar su compatibilidad con este test antes del uso. Por lo tanto es indispensable establecer los intervalos de los valores de los materiales usados para el control de calidad. 13. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS El instrumento calcula automáticamente las concentraciones de IgG anti-virus de varicela-zoster expresadas en mui/ml y clasifica los resultados. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para una información más detallada. Los calibradores y los controles pueden dar unos resultados de concentración o de unidades relativas de luz (RLU) distintos en LIAISON y LIAISON XL, pero los resultados de los pacientes son equivalentes. Intervalo de ensayo mui/ml de IgG anti-virus de varicela-zoster. Las muestras que contengan concentraciones de anticuerpo superiores al intervalo de ensayo pueden ser pre-diluidas mediante la función Dilute del instrumento y reanalizadas (el factor de dilución aconsejado es 1:10). Los resultados se multiplicarán automáticamente por el factor de dilución para obtener los niveles de anticuerpos de las muestras no diluidas. El diluyente de muestras disponible en exceso en el integral de reactivos permite realizar la pre-dilución de 10 muestras. La dilución de muestras con concentraciones superiores a las del intervalo de ensayo puede suministrar resultados cuantitativos imprecisos a causa de la respuesta no paralela que depende de la muestra. El valor límite elegido para obtener la especificidad y la sensibilidad diagnósticas más elevadas en la población analizada es de 150 mui/ml de IgG anti-virus de varicela-zoster. Los resultados de las muestras deben ser interpretados como sigue: Las muestras con concentraciones de IgG anti-virus de varicela-zoster por debajo de 150 mui/ml se deben clasificar negativas. Las muestras con concentraciones de IgG anti-virus de varicela-zoster iguales o por encima de 150 mui/ml se deben clasificar positivas. Se recomienda repetir el test con las muestras que contengan concentraciones de IgG anti-virus de varicela-zoster comprendidas entre 10% del valor límite, para confirmar el primer resultado. Las muestras repetidamente positivas se considerarán positivas. Las muestras negativas al segundo análisis se considerarán negativas. El archivo de ensayo de determinación de IgG anti-vzv en el analizador LIAISON XL es VZV-G, y contiene la interpretación de resultados anterior. Un resultado negativo indica que no se ha adquirido inmunidad, pero no excluye una infección aguda. Hay que recordar que los niveles de IgG son, generalmente, negativos durante el período de incubación y la fase aguda de la enfermedad. Si se sospecha que el paciente ha estado expuesto al virus de varicela-zoster aunque el ensayo de la IgG sea negativo, hay que recoger y ensayar una segunda muestra por lo menos una o dos semanas más tarde. Un resultado positivo generalmente indica infección reciente por el virus de varicela-zoster o suministración de inmunoglobulinas específicas, pero no representa una indicación de infección activa ni de la fase de la enfermedad. Nota - La Comisión permanente de vacunación alemana (Impfempfehlungen der Ständigen Impfkommission, STIKO) sugiere seguir la siguiente interpretación de los resultados en el Epidemiologisches Bulletin Nr. 8 (Robert-Koch-Institut, 2001, Berlín, Alemania): Las muestras con concentraciones de IgG anti-virus de varicela-zoster por debajo de 50 mui/ml se deben clasificar negativas. Las muestras con concentraciones de IgG anti-virus de varicela-zoster comprendidas entre 50 y 100 mui/ml se deben clasificar dudosas, pero los resultados se deben considerar negativos. Las muestras con concentraciones de IgG anti-virus de varicela-zoster por encima de 100 mui/ml se deben clasificar positivas. En el analizador LIAISON, la configuración predeterminada del archivo de ensayo refleja el valor de corte prescrito con muestras de 150 miu/ml de concentración. Póngase en contacto con el representante local de DiaSorin si decide utilizar las muestras con concentración de 100 miu/ml como alternativa. Con un analizador LIAISON XL, utilice el archivo de ensayo VZG100 si decide optar por esta posibilidad: muestras con concentración de 100 miu/ml. Las prestaciones metodológicas del kit están indicadas en el punto 15.5 para las dos interpretaciones de los resultados. 14. LIMITACIONES DEL ENSAYO Para obtener resultados fiables es necesario atenerse estrictamente a las instrucciones de utilización y poseer una adecuada técnica manual. La contaminación bacteriana de las muestras o la inactivación mediante calentamiento pueden modificar los resultados del análisis. Las características del test en los recién nacidos o en los vacunados no han sido establecidas. Los resultados en los sujetos inmunocomprometidos se deben interpretar con cautela. Los resultados del test se muestran de manera cuantitativa como positivos o negativos para la presencia de anticuerpos IgG anti-virus de varicela-zoster. Sin embargo, el diagnóstico de una enfermedad infecciosa no se debe formular en base al resultado de un solo ensayo, sino que éste se debe validar con otras pruebas clínicas, procedimientos diagnósticos y con la opinión del médico. Los integrales no deben utilizarse con los dos tipos de instrumentos (LIAISON y LIAISON XL). Cuando se ha usado un integral con un tipo de instrumento éste debe continuar siempre a usarse en dicho instrumento hasta que se termine. Por cuestiones de posibilidad de rastreo que derivan de esta declaración, es necesario terminar el seguimiento de los pacientes con el mismo tipo de instrumento (LIAISON o LIAISON XL), sin efectuar intercambios ni desplazamientos. 35 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011

5 15. PRESTACIONES METODOLÓGICAS DEL KIT Especificidad analítica La especificidad analítica se define como la capacidad que tiene el test para detectar exactamente el analito ante la presencia de factores potencialmente interferentes en la matriz de la muestra (por ejemplo, anticoagulantes, hemolisis, efectos de tratamientos de la muestra) o de reacciones cruzadas con anticuerpos potencialmente interferentes. Interferencias. Estudios controlados sobre los factores potencialmente interferentes han demostrado que las prestaciones del test no están influenciadas por anticoagulantes (citrato, EDTA, heparina), hemolisis (hasta 1000 mg/dl de hemoglobina), lipemia (hasta 3000 mg/dl de triglicéridos), bilirrubinemia (hasta 20 mg/dl de bilirrubina) o por los ciclos de congelación y descongelación de las muestras. Reacciones cruzadas. Se analizaron 41 muestras potencialmente interferentes, positivas para IgG dirigidas contra uno o varios agentes etiológicos. 26 muestras proporcionaron resultados positivos para IgG anti-ebv EBNA, 25 muestras proporcionaron resultados positivos para IgG anti-ebv VCA, 27 muestras proporcionaron resultados positivos para IgG anti-hcmv, 23 muestras proporcionaron resultados positivos para IgG anti-virus de la rubéola, 26 muestras proporcionaron resultados positivos para IgG anti-hsv-1/2, 3 muestras proporcionaron resultados positivos para IgG anti-toxoplasma gondii, 2 muestras proporcionaron resultados positivos para IgG anti-borrelia burgdorferi, 14 muestras proporcionaron resultados positivos para anticuerpos anti-nucleares (ANA). Todas las muestras potencialmente interferentes proporcio-naron resultados negativos con el test LIAISON VZV IgG Precisión con los instrumentos LIAISON La repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo (es decir las variaciones intra-ensayo e inter-ensayo) han sido determinadas utilizando las muestras de referencia en diferentes concentraciones de analito. La variabilidad observada no ha dado lugar a una clasificación errónea de las muestras. Los resultados se refieren a los grupos de pacientes tomados en consideración; no se trata de prestaciones garantizadas porque pueden existir diferencias entre los diferentes laboratorios. Repetibilidad. Para evaluar la repetibilidad se han analizado veinte replicados en la misma sesión analítica. Repetibilidad A B C D E Número de determinaciones Media (mui/ml) 21,40 29,38 406,0 708,7 1185,5 Valor mínimo 19,07 26,24 349,4 601,9 1028,0 Valor máximo 24,90 33,66 454,0 808,4 1385,0 Coeficiente de variación (%) 6,0 6,1 7,4 7,8 8,6 Reproducibilidad. Para evaluar la reproducibilidad se han analizado varios replicados en días diferentes (una o dos sesiones analíticas al día) utilizando tres lotes diferentes de integral. Los ensayos se realizaron en dos sitios, en el laboratorio donde se desarrolló el kit (sitio 1) y en un laboratorio independiente (sitio 2). Reproducibilidad SITIO 1 SITIO 2 F G H I F G H I LOTE Nr. 01 Número de determinaciones Media (mui/ml) 15,28 518,5 1016,0 2073,0 18,19 363,9 738,4 1613,0 Valor mínimo 12,33 394,8 847,2 1696,0 13,44 289,5 602,7 1101,0 Valor máximo 20,42 575,3 1289,0 2488,0 25,13 425,7 967,7 1906,0 Coeficiente de variación (%) 14,4 8,9 12,2 11,9 20,9 12,4 14,3 14,4 LOTE Nr. 02 Número de determinaciones Media (mui/ml) 18,07 487,2 929,2 1681,0 20,73 361,6 702,3 1114,0 Valor mínimo 15,99 440,5 635,4 1437,0 17,19 285,2 581,3 778,5 Valor máximo 23,00 531,1 1211,0 2198,0 28,45 477,0 884,4 1345,0 Coeficiente de variación (%) 10,7 5,0 12,6 12,2 17,9 15,9 14,3 13,5 LOTE Nr. 03 Número de determinaciones Media (mui/ml) 11,45 439,3 1046,0 2009,0 17,61 362,5 856,7 1713,0 Valor mínimo 9,54 377,1 892,8 1612,0 14,86 303,7 726,5 1426,0 Valor máximo 16,73 537,3 1246,0 2504,0 24,63 475,8 1115,0 1970,0 Coeficiente de variación (%) 15,6 10,4 9,0 11,6 17,9 14,5 13,6 12,0 36 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011

6 15.3. Precisión con los instrumentos LIAISON XL La repetibilidad y la reproducibilidad del ensayo (es decir las variaciones intra-ensayo e inter-ensayo) han sido determinadas utilizando las muestras de referencia en diferentes concentraciones de analito. La variabilidad observada no ha dado lugar a una clasificación errónea de las muestras. Repetibilidad. Para evaluar la repetibilidad se han analizado veinte replicados en la misma sesión analítica. Repetibilidad Control negativo Control positivo Número de determinaciones Media (mui/ml) 10,68 157,2 194,4 282,6 792, ,36 527,5 Desviación estándar 0,59 7,10 13,55 21,32 46,20 88,93 153,59 2,56 41,20 Coeficiente de variación (%) 5,6 4,5 7,0 7,5 5,8 6,6 6,4 5,8 7,8 Valor mínimo 9, ,3 166,8 236,0 679, ,88 442,7 Valor máximo 11,68 168,2 216,2 312,7 869, ,57 604,4 Reproducibilidad. Para evaluar la reproducibilidad se han analizado veinte replicados en días diferentes (una o dos sesiones analíticas al día). Reproducibilidad Control negativo Control positivo Número de determinaciones Media (mui/ml) 10,02 157,3 185,6 267,5 619, ,50 434,8 Desviación estándar 1,28 14,33 26,14 33,05 91,74 146,30 229,06 6,05 66,61 Coeficiente de variación (%) 12,7 9,1 14,1 12,4 14,8 12,1 11,5 13,9 15,3 Valor mínimo 7, ,8 140,8 196,4 450,1 959, ,48 277,7 Valor máximo 13,37 174,2 239,2 313,4 765, ,43 572, Efecto saturación con altas concentraciones Cuando se ensayen muestras que contengan unas concentraciones de anticuerpos sumamente elevadas, se pueden obtener unos niveles aparentes de anticuerpo inferiores al nivel real por efecto de la saturación. Sin embargo, un sistema bien optimizado con dos incubaciones excluye que se obtengan resultados subestimados, porque la señal analítica permanece siempre elevada (curva a saturación). La presencia de un efecto saturación ha sido evaluada analizando dos muestras positivas para IgG anti-virus de varicelazoster con alto título. Todas las muestras han presentado unos valores de concentración por encima del intervalo de ensayo, como se espera de las muestras con alto título, indicando que la clasificación de las muestras es correcta Especificidad y sensibilidad diagnósticas Se analizaron 393 muestras para la presencia de IgG anti-vzv con el test LIAISON VZV IgG y con tres métodos de referencia con marca CE. Las muestras utilizadas para el estudio incluyen muestras provenientes de diversas poblaciones (mujeres embarazadas, donantes de sangre, sujetos sometidos a trasplante de órgano), muestras caracterizadas como negativas y muestras provenientes de un programa de control de calidad. Si se obtuvieron los mismos resultados con dos de los tres métodos de referencia, los resultados se consideraron concordantes (319 resultados positivos y 70 resultados negativos). La especificidad y la sensibilidad diagnósticas se calcularon una vez excluidos los cuatro resultados discordantes. Especificidad diagnóstica: 97,14% (68/70) - intervalo de confianza al 95%: 90,05-99,65%. Sensibilidad diagnóstica: 100% (319/319) - intervalo de confianza al 95%: 98,85-100%. Los resultados indicados se obtuvieron utilizando el valor límite estándar de 150 mui/ml. Si se calcula la especificidad y la sensibilidad diagnósticas en la misma población utilizando el valor límite de 100 mui/ml según las recomendaciones STIKO (véase la Nota en el punto 13), se obtienen los resultados siguientes: Especificidad diagnóstica: 92,86% (65/70) - intervalo de confianza al 95%: 84,13-97,64%. Sensibilidad diagnóstica: 100% (319/319) - intervalo de confianza al 95%: 98,85-100%. 37 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011

7 LIAISON Control VZV IgG (310851) 1. FINALIDAD DEL ENSAYO Los controles LIAISON VZV IgG (negativo y positivo) deben ser usados en los ensayos de quimioluminiscencia (CLIA) LIAISON para verificar la fiabilidad de los ensayos. Las prestaciones metodológicas de los controles LIAISON VZV IgG no son definidas con otros ensayos o instrumentos automáticos diferentes que LIAISON y LIAISON XL. Instrumentos LIAISON. El certificado de análisis contiene informaciones específicas sobre el lote de los controles, que debe introducirse manualmente en el software del instrumento antes de cargar los frascos de los controles en el instrumento. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para una información más detallada. Instrumentos LIAISON XL. Los códigos de barras del certificado de análisis contienen informaciones específicas sobre el lote de los controles y deben ser leídos por el lector manual de los códigos de barras del instrumento LIAISON XL antes de cargar los frascos de los controles en el instrumento. Hágase referencia al manual operativo del instrumento para una información más detallada. 2. MATERIALES SUMINISTRADOS Control negativo (2 x 0,7 ml) Control positivo (2 x 0,7 ml) Suero/plasma humano no reactivo para IgG anti-vzv, estabilizado en tampón TRIS- NaCl, 0,2% ProClin 300 y conservantes. Suero/plasma humano reactivo para IgG anti-vzv, estabilizado en tampón TRIS- NaCl, 0,2% ProClin 300, conservantes y un colorante amarillo inactivo. Todos los reactivos se suministran listos para su uso. El intervalo de las concentraciones para cada control está impreso en el certificado de análisis e indica los límites definidos por DiaSorin para los valores de los controles obtenidos con test fiables. Cada laboratorio es responsable de adoptar límites diferentes para cumplir exigencias específicas. 3. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Sólo para uso diagnóstico in vitro. Los controles no son específicos para lote de kit. Se pueden intercambiar también con lotes diferentes de integral de reactivos. Todos los materiales utilizados para la fabricación de los componentes de este kit se han analizado y se han encontrado no reactivos para la presencia de HBsAg, anti-hcv, anti-hiv-1 y anti-hiv-2. Sin embargo, visto que ningún método de análisis puede asegurar que los agentes patógenos estén ausentes, todo el material de origen humano se deberá considerar potencialmente infeccioso y manipularlo como tal. Observe las precauciones necesarias para la manipulación de los reactivos de laboratorio. Los residuos deben eliminarse de acuerdo con la reglamentación local NORMAS DE SEGURIDAD No coma, beba, fume o se maquille durante la ejecución del ensayo. No pipetee las soluciones con la boca. Evite el contacto directo con el material potencialmente infeccioso usando batas de laboratorio, gafas de protección y guantes desechables. Lávese cuidadosamente las manos al terminar el ensayo. Evite salpicaduras o formación de aerosoles. En caso de que esto sucediera, cada gota de reactivo se debe eliminar con una solución de hipoclorito sódico al 5% y el medio utilizado se deberá tratar como material residuo potencialmente infeccioso. Todas las muestras, los reactivos biológicos del kit y los materiales usados para efectuar el ensayo se deben considerar capaces de transmitir agentes infecciosos; por lo tanto los residuos se deberán eliminar de acuerdo con las reglamentaciones de las agencias autorizadas que tengan jurisdicción sobre el laboratorio, y con las normativas de cada país. Los reactivos que contienen ProClin 300 se clasifican como irritantes según las Directivas Europeas aplicables: R 43 - Posibilidad de sensibilización en contacto con la piel. S 24 - Evítese el contacto con la piel. S 37 - Úsense guantes adecuados. S 60 - Elimínense el producto y su recipiente como residuos peligrosos. 5. CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD En el momento de su llegada, los controles se deben mantener a 2-8 C en posición vertical para evitar el contacto de la solución con la tapa del frasco. No congele. Si los controles se conservan sellados y en posición vertical, ellos son estables a 2-8 C hasta la fecha de caducidad. Después de la apertura, los controles son estables durante cuatro semanas si se conservan refrigerados a 2-8 C entre dos usos sucesivos. Evite la contaminación bacteriana de los controles. Los controles no se deben usar pasada la fecha de caducidad indicada en las etiquetas de los frascos. 6. PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS Coloque los frascos de los controles en las gradillas C del instrumento LIAISON. Con una solución de control es posible realizar por lo menos 20 test. El volumen mínimo de control necesario es 420 L (20 L de control L de volumen muerto). En el momento del uso, acondicione los controles a temperatura ambiente (20-25 C) antes de la apertura de los frascos y déjelos en el área de las muestras del instrumento sólo durante el tiempo requerido para realizar el test de control de calidad. Después del uso, tape los frascos lo antes posible y manténgalos a 2-8 C en posición vertical. Durante la manipulación de los controles, adopte las precauciones necesarias para evitar la contaminación microbiana. VZV-G-es.fm LIAISON Control VZV IgG (310851) 38 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011

8 7. MANIPULACIÓN Hágase referencia al manual operativo del instrumento para la manipulación correcta. 8. VALORES ESPERADOS Los valores esperados y los intervalos de las concentraciones de IgG anti-vzv de los controles están indicados en el certificado de análisis. Estos se han establecido considerando la variabilidad de las sesiones analíticas respecto a la curva predefinida memorizada por el fabricante, a fines de garantizar la precisión de los resultados analíticos y obtener indicaciones sobre la estabilidad y el deterioro de los reactivos. Si los valores experimentales de los controles están repetidamente fuera de los intervalos predefinidos, con mucha probabilidad, el ensayo se ha llevado a cabo de forma incorrecta. VZV-G-es.fm LIAISON Control VZV IgG (310851) 39 / 138 ES - 200/ , G - 10/2011