Calidad de muestras. Bioquímica Lucrecia Drago Bioquímica María Fernanda Pontoriero

Transcripción

1 Calidad de muestras Bioquímica Lucrecia Drago Bioquímica María Fernanda Pontoriero

2 Calidad de muestras Factores intervinientes: Obtención de muestra Contenedores Anticoagulantes Manipulación Preparación antes de procesamiento Corrección de parámetros predeterminados en equipos (Hb)

3 Contenedores 1. Jeringas de vidrio: Ventajas: Material inerte e impermeable Desventajas: Esterilización. Fuera de uso

4 2. Jeringas de plástico: Ventajas: Baratas Estériles Especiales para EAB: émbolo elevable, heparinización previa con heparina cristalina. Desventajas: Intercambio gaseoso (material permeable)

5 3. Capilares de vidrio heparinizados Ventajas: Material de vidrio Desventajas: Sellado Obtención de muestra Homogeneización

6 Anticoagulantes 1. Tipos de anticoagulantes: Heparina de Sodio Heparina de Litio Heparinas líquidas (1000 UI/ml): la pco2 y la po2 suelen tener valores cercanos al aire ambiente (pco2=7,5 mmhg y po2=160 mmhg). Heparinas liofilizadas: menor tiempo y sin efecto dilutorio No se recomienda usar: Citratos Oxalatos EDTA

7 2. Volumen de anticoagulantes 5% de heparina. No exceder el 10% 200 μl de heparina sódica o de litio (1.000 UI/ ml) evitan la coagulación de 5 ml de sangre Concentración final: 40 UI/ml. (40 ml de heparina sódica de 1000 UI/ml por cada ml de sangre)

8 3. Interferencias por anticoagulante Poco volumen de muestra Dilución: superior al 10% Disminución de la pco2 y parámetros calculados (HCO 3 - y EB) Aumento de la po2 ph resistente al efecto dilutorio inferior al 5% Coagulación de la muestra: muestra heterogénea, coágulos interferentes en el contacto con los electrodos, equipo tapado Se recomienda rechazar muestras con burbujas o coaguladas. Quelación Disminución del calcio iónico Heparina equilibrada electrolíticamente

9 Muestras Obtención y tipos de muestra: Paciente en equilibrio ventilatorio Respiración espontánea: reposo por 15 minutos Respiración asistida: sin cambios por 30 minutos

10 Sangre venosa: Sirve para valorar EAB No es útil para conocer estado de oxigenación Precaución con el uso de torniquete Sangre arterial: Sirve para valorar EAB y gases Punción directa de la arteria Catéter arterial: eliminar completamente las soluciones de lavado Sangre capilar arterializada: Difícil extracción arterial o contraindicada (recién nacidos, obesos, quemados) Al tomar la muestra, eliminar la primera gota (rica en fluído extracelular)

11 Manipulación La sangre debe mantenerse en condiciones anaerobias Sellar la muestra con tapón. No usar aguja. Impedir la formación o el ingreso de burbujas: La presencia de aire en la muestra tiende a disminuir la pco 2 y a equilibrar la po 2 con la po 2 ambiental. A mayor superficie de contacto, mayor es el error (pequeñas y múltiples burbujas).

12 Manejo y conservación de las muestras: Procesamiento inmediato 30 minutos posteriores a su extracción: conservar a T ambiente Conservación de la jeringa en recipiente con aguahielo: se produce una disminución relativa de O 2 a causa del enfriamiento (aumenta la solubilidad del O 2 y aumenta la afinidad de la Hb por el O 2 ) aumentando el gradiente entre la muestra y el aire. Estudio de gradiente alveolar o Shunt: procesar en 5 minutos

13 Leucocitosis o trombocitosis: analizar inmediatamente para reducir el consumo de O 2 Homogeneizar bien la muestra en jeringa o capilares de vidrio. No deberían formarse burbujas. Descartar 100 a 200 ml de muestra para detectar posibles coágulos. La alícuota de la muestra que se transferirá al analizador debe ser homogénea y representativa.

14 Errores derivados de la conservación y el transporte Glicólisis: produce formación de lactato con el consecuente cambio en el ph, HCO 3 - y EB Consumo de O 2 por leucocitos y plaquetas: disminuye po 2 y aumenta la pco 2. (Estos procesos metabólicos se reducen enfriando la muestra) Vidrio: gases sin alteración si se conservan en aguahielo por 60 minutos. Plástico: si se refrigera la muestra, aumenta la entrada de O 2 con el consecuente aumento de la po 2. Sedimentación celular: modificación en ph, pco 2 y po 2

15 Corrección de parámetros predeterminados en equipos: Hemoglobina % de Saturación

16 Caso clínico Comparación de 2 muestras de un paciente. Muestra 1: Heparina de Sodio (5000 UI/ml) ph 7,44 pco2 13,3 po2 117,4 HCO - 3 9,0 EB +15,1 Hb 7,6 Sodio 156,8 Potasio 1,0 Calcio iónico No registra dato No se valida ni informa este resultado Muestra 2: Jeringa con heparina liofilizada 7,46 25,7 118,5 18,1-5,6 13, ,0 1,16 Resultado validado

17 Análisis de resultados y consideraciones Urgencia del resultado vs Calidad del resultado (resultado de máxima calidad y en el menor tiempo posible) Error = defecto Consideraciones preanalíticas: obtención y conservación La muestra: representa al paciente? Espacio muerto en la jeringa: Cuánta heparina queda allí? Extracción dificultosa: relación heparina:sangre (efecto dilutorio) Alteración de parámetros por exceso de heparina

18 Resultados incorrectos suelen ser peores para el paciente que ningún resultado en absoluto Los problemas significativos a los que nos enfrentamos hoy no pueden resolverse al mismo nivel de razonamiento que tenían cuando fueron creados. Albert Einstein

19 Bibliografía: Recomendaciones preanalíticas para la medición del equilibrio ácido-base y gases en sangre. Sociedad Española de Bioquímica Clínica y Patología Molecular. Comité Científico. Comisión de Magnitudes Biológicas relacionadas con la Urgencia Médica. Documento H. Fase 3. Versión NCCLS. Procedures for the collection of arterial blood specimens; Approved Standard. 4th Edition. H11-A El laboratorio de urgencia en la detección de errores preanalíticos. Tovo y col. Hospital Materno Infantil Ramón Sardá. 2008