p53: estructura y actividad biológica. La ruta p53-mdm2-arf Ignacio Palmero Master de Oncología Molecular

Transcripción

1 : estructura y actividad biológica. La ruta --ARF Ignacio Palmero Master de Oncología Molecular

2 alteraciones oncogénicas (estímulos mitogénicos inapropiados, daño a DNA) Mecanismos de defensa supresión tumoral transformación

3 La vía de señales de estrés supresión tumoral

4 oncogenes acortamiento telomérico daño a DNA ausencia de nutrientes hipoxia disrupción de microtúbulos genes diana parada de ciclo apoptosis supresión tumoral reparación

5 bajo nivel de estrés alto nivel de estrés parada de ciclo transitoria reparación parada de ciclo permanente (senescencia) apoptosis

6 ausencia de estrés degradación estrés estable genes diana apoptosis, parada

7 Conexiones entre y -Ub degradación salida a citoplasma ubiquitinación inhibición transcripcional -Ub

8 El locus INK4a/ARF E1beta E1alfa E2 E3 N C N p14arf p16ink4a C Rb

9 ARF bloquea la degradación de mediada por ARF + p14arf GFP

10 Localización nucleolar y mecanismo de acción de ARF ARF ARF +ARF

11 ARF estabilización ARF regulación transcripcional genes diana

12 ARF y regulación transcripcional: Conexión funcional ARF-ING1 incorporación relativa de BrdU AU5p33ING1 vector p33ing1 wild type ARF (-/-) / (-/-) V wt I ARF (-/-) V I estabilización ARF ING1 cofactor HAT/HDAC ARF ING1 actin

13 estrés mitogénico ARF señales mitogénicas normales control Ras wt MEF V Ras DAPI p19arf p19arf actin ARF es un sensor de señales mitogénicas

14 Regulación transcripcional de ARF estrés mitogénico JunD inhibidores TBX Bmi activadores E2F1 Myc DMP1 Twist CBX7 Pokemon E2F3 ARF

15 estrés mitogénico Ras Myc E1A estrés de cultivo ARF V E1A Ras /E1A ARF actin

16 . Papel de ARF en control de senescencia 50 inmortalización PDL ARF/ p19arf P1 P senescencia actina Pases

17 ARF Alteraciones oncogénicas Senescencia celular Cese de proliferación de células dañadas tumor Apoptosis Eliminación de células dañadas

18 estrés mitogénico estrés genotóxico ARF ATM/ATR

19 estrés genotóxico ATM, ATR Chk1, Chk2 P-Ser20 P-Ser15 estabilización activación

20 Activación de por estrés genotóxico IR UV, bloqueo a replicación ATM ATR Chk2 Chk1

21 Regulación de por fosforilación N P P P P P P P C activación unión rico en prolinas unión DNA tetramerización regulación

22 Regulación de por fosforilación N P P P P P P P C activación unión rico en prolinas unión DNA tetramerización regulación fosforilación ATM/Chk estabilización (bloqueo a ) modulación activación transcripcional

23 Modificación postraduccional de N- P P P S S P Ac P P Ac P -C activación unión rico en prolinas unión DNA tetramerización regulación ubiquitinación acetilación estabilización (bloqueo de ubiquitinación) modulación activación transcripcional? sumoilación estabilización (bloqueo de ubiquitinación)?

24 Acumulación y modificación postraduccional de en respuesta a estrés genotóxico Adriamicina UV Actina Control Adr Ac-Lys379 P-Ser15 Fibroblastos embrionarios de ratón (MEF)

25 estrés mitogénico estrés genotóxico ARF ATM/ATR Chk1/2

26 Regulación de estabilidad de ARF-BP1 Cop1 Pirh2 degradación

27 Regulación de estabilidad de ARF-BP1 Cop1 Pirh2 degradación activación

28 Regulación de estabilidad de HAUSP ARF ARF-BP1 Cop1 degradación Pirh2 activación

29 Control de localización subcelular de (1) PML bodies PML acetilación sumoilación núcleo merge PML

30 Control de localización subcelular de (2) citoplasmico inestable nuclear Parc Cullin-7 WWP1 citoplasmico estable

31 Función de y ARF fuera del núcleo nucleo mitocondria PUMA Bax smarf Bax apoptosis autofagia BclxL PUMA citoplasma BclxL

32 y metabolismo Glucosa AMPK glicolisis PGM TIGAR ATP NADPH ROS Piruvato SCO2 respiración mitocondrial O 2 ATP

33 autofagia metabolismo apoptosis reparacion senescencia cancer fertilidad envejecimiento diabetes enfermedades neurodegenerativas

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35 La familia de Para ver esta película, debe disponer de QuickTime y de un descompresor PNG. p73 p63

36 La familia de : p63 y p73 cell-cycle arrest apoptosis TAp Np TAp Np73 - -

37 Fenotipo de ratones KO de la familia de gen p63 p73 efectos en tumorognesis alta frecuencia de tumores ninguno ninguno efectos en desarrollo letalidad embrionaria por defectos en cierre tubo neural (25%) defectos en desarrollo de miembros, craneofacial y epitelial otras alteraciones en el adulto ausencia de piel hidrocefalia, defectos en inflamaci n

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39 oncogenes acortamiento telomérico daño a DNA depleción de nucleótidos hipoxia disrupción de microtúbulos genes diana parada de ciclo apoptosis supresión tumoral reparación

40 Genes diana de apoptosis APAF1 NOXA BAX PTEN PUMA FAS proapoptotico, caspasas proapoptotico, mitocondria proapoptotico, death receptors parada de ciclo y reparación angiogénesis e invasión metabolismo p21cip GADD45 R2 MMP2 KAI1 TIGAR SCO2 inhibidor cdk reparación inhibición angiogénesis anti estrés oxidativo autoregulación MDM2 CICLINA G degradación

41 modificación post-traduccional Ser46 P p21 AIP1 Lys320 Ac p21 ASPP1 Bax1 PUMA cofactores BRN3A p21 tipo de estrés X tejido X niveles de X modificacion X localizacion X cofactores

42 IR wt - + Hígado Corazón Riñón Piel g/g wt g/g wt g/g wt g/g - + p33ing1 p21 Actina IR wt - + Vejiga Timo Pulmón Testículo g/g wt g/g wt g/g wt g/g - + p33ing1 p21 Actina IR wt - + Bazo Intestino Cerebro g/g wt g/g wt g/g - + p33ing1 p21 Actina

43 estrés mitogénico, estrés genotóxico estrés mitogénico, estrés genotóxico funcional no funcional parada ciclo celular apoptosis reparación no reparación daño no apoptosis proliferación incontrolada eliminación de células potencialmente tumorales eliminación de daño génico proliferación de células potencialmente tumorales inestabilidad genómica: nuevas mutaciones supresión tumoral tumorogénesis