UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
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- Natalia Araya Maestre
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1 UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS TESIS ACTIVIDAD ANTIFÍMICA DE LOS ACEITES ESENCIALES DE COMINO (Cuminum cyminum), CLAVO (Eugenia caryophyllata), CANELA (Cinnamomum verum), LAUREL (Laurus nobilis) Y ANÍS (Pimpinella anisum) CONTRA LA CEPA DE Mycobacterium tuberculosis H37Rv y CEPAS RESISTENTES A LOS ANTIFÍMICOS DE PRIMERA LÍNEA SERGIO ANDRADE OCHOA Chihuahua, Chih. México. Abril del 2012
2 << A la entropía, que de todas las posibilidades me ha entregado a mí la más maravillosa >> Espérame para hacer el bien Con todo mi amor, cariño y esfuerzo. A mi familia, que siempre ha sido fuente de mi inspiración y motivación. Gracias todos los miembros de ella, los amo a todos. Este triunfo es de todos. En particular agradezco a mis padres. A mi madre que con su tiempo y esfuerzo me encamino en este andar y a mi padre que con su sudor y su esfuerzo me lleno de voluntad para seguir caminando. Siempre los llevo en mi corazón. A Francisco Contreras Loya por brindarme su cariño y apoyo incondicional durante este nuevo periodo de mi vida. Seguimos caminando juntos. Si no puedes ser un gran ejemplo, se una advertencia espantosa i
3 AGRADECIMIENTOS Primeramente a la Facultad de Ciencias Químicas de mi Alma Mater la Universidad Autónoma de Chihuahua, por brindarme el espacio y la oportunidad de realizar mis estudios. Por la ciencia para el bien del hombre Al Dr. León Hernández Ochoa por creer en mí desde los inicios. Gracias por todo su apoyo incondicional. A la Dra. Virginia Nevarez Moorillón. Quiero agradecerle de todo mi corazón todo su apoyo y sus consejos, pero sobre todo, todas esas sonrisas y abrazos que me ha regalado. La llevo en el corazón. A la Dra. Blanca Estela Rivera Chavira por su apoyo incondicional y sus buenos deseos, por sus consejos, sus abrazos y sobre todo por compartirme su pasión por las micobacterias, pues me ha llenado de esos ánimos para seguir trabajando en esta área. A todos mis profesores de la licenciatura, quienes compartieron sus conocimientos y experiencias conmigo. A la Q.B.P. Leticia Aurora Lucero Díaz. Maestra cada palabra la llevó conmigo, es usted una fuente de inspiración. Sus conejos y conocimientos compartidos fueron la guía para encaminarme a la Química, no estaría aquí si no fuera por usted. A la M.C. Cristian Aniri Macías Castañeda, M.C. Yara Betzabe Aguirre Prieto y M.C. Karla Fabiola Chacón Vargas porque ustedes me enseñaron lo que es la ciencia y por todos los buenos momentos que pasamos juntos tanto dentro como fuera del laboratorio. Aniri todos esos cálidos momentos que pasamos juntos los llevaré siempre, por ti he conocido la ciencia y es por ti que he de seguir en este camino. Fabiola gracias por confiar en mí y compartir tus conocimientos, vivencias y muy buenos consejos. A Julieta, Héctor, Karin, Hiko, Arlen, Abraham, Ambar y Lavinia, con los que crecí durante toda mi vida. Estamos un paso más a realizarnos, esto es el principio. ii
4 A mi nueva familia con la que pase tantos momentos en la facultad. Sandra, Ricardo Richard, Lucía, Cristina, Gabriela, Ramiro, David, Marisela, Rebeca, Jorge, Davo, Cinthya, Gladys, Ulises, Wadih, Caro, Mayra, Julio, Esmeralda Joya, Karen y Esme mi hija. Los llevo siempre y seguimos siempre. De manera directa o indirecta me brindaron su apoyo y tiempo para el logro de mis objetivos. Agradezco especialmente a Sandra Ávila porque fue como mi hermana durante todo este tiempo, por sus desvelos y preocupaciones y con quien comparto también todos sus logros y a Ricardo Márquez porque en este lapso compartimos sueños y nos hicimos hermanos, gracias por todas las risas y frustraciones. A todos aquellos que de alguna manera hicieron posible la finalización de este proyecto. Les estoy muy agradecido. Me llevo de todos un poco. Muchísimas gracias. iii
5 RESUMEN En la presente investigación se utilizaron los aceites esenciales (AEs) de comino, clavo, canela, laurel y anís para determinar su Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) contra cepas de Mycobacterium tuberculosis. Para tal efecto, los AEs fueron extraídos por el método de hidrodestilación. La caracterización química de los AEs se llevó a cabo por cromatografía de gases acoplada a un espectrómetro de masas. Así mismo, se determinaron las CMI de dichos aceites contra la cepa de Mycobacterium tuberculosis H37Rv y contra dos cepas clínicas de M. tuberculosis resistentes a isoniacida (INH), dos cepas resistentes a rifampicina (RIF), dos cepas resistentes a estreptomicina (STR) y dos cepas resistentes a etambutol (ETB). Dichas cepas fueron evaluadas analíticamente y caracterizadas por medio de biología molecular por la M.C. Karla Fabiola Chacón Vargas en su tesis de maestría. La cepa H37Rv fue proporcionada por Instituto Nacional Ciencias Médicas y Nutrición Salvador Zubirán el 8 de noviembre del La CMI fue determinada por medio de la técnica de Azul de Alamar (MABA). Los resultados indicaron que los componentes mayoritarios de los AEs de comino, clavo, canela, laurel y anís fueron el cuminaldehído, el eugenol, el cinamaldehído, el eucaliptol y el trans-anetol respectivamente. Los AEs de comino y canela presentaron una CMI de 12.5 µg/ml sobre la cepa H37Rv, mientras que el clavo presentó una CMI de 25 µg/ml. Respecto a las cepas resistentes se observó que el AE de comino inhibió a todas las cepas a 12.5 µg/ml excepto a las cepas resistentes a STR, a las cuales inhibió a 6.25 µg/ml. El AE de clavo inhibió a todas las cepas resistentes a 12.5 al igual que el AE de canela, este último tuvo una disminución en la efectividad de la CMI contra las cepas resistentes a INH. Los AEs de anís y laurel inhibieron a 100 µg/ml tanto a la cepa H37Rv como a las cepas resistentes. El análisis estadístico ubicó a los aceites esenciales de canela y clavo en el mismo grupo que la isoniacida y el etambutol, por lo que se concluye que dichos aceites tienen el potencial para ser utilizados como posibles alternativas para el tratamiento contra la tuberculosis, por lo que se deben estudiar los compuestos de estos aceites para encontrar la estructura química que tenga actividad antituberculosa. iv
6 UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE CHIHUAHUA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS TESIS ACTIVIDAD ANTIFÍMICA DE LOS ACEITES ESENCIALES DE COMINO (Cuminum cyminum), CLAVO (Eugenia caryophyllata), CANELA (Cinnamomum verum), LAUREL (Laurus nobilis) Y ANÍS (Pimpinella anisum) CONTRA LA CEPA DE Mycobacterium tuberculosis H37Rv y CEPAS RESISTENTES A LOS ANTIFÍMICOS DE PRIMERA LÍNEA SERGIO ANDRADE OCHOA Chihuahua, Chih. México. Abril del
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