Taula Rodona: Sífilis 2013 Les proves. Juliana Esperalba Esquerra Servei de Microbiologia Hospital Universitari Vall d Hebron

Tamaño: px

Comenzar la demostración a partir de la página:

Download "Taula Rodona: Sífilis 2013 Les proves. Juliana Esperalba Esquerra Servei de Microbiologia Hospital Universitari Vall d Hebron"

Manuel Carrizo Campos
hace 6 años
Vistas:

1 Taula Rodona: Sífilis 2013 Les proves Juliana Esperalba Esquerra Servei de Microbiologia Hospital Universitari Vall d Hebron

2 Introducció: Treponema pallidum subsp. pallidum Ordre Spirochaetales Família Spirochaetaceae Gènere Treponema T. pallidum subsp. pallidum Morfologia helicoidal amb flagel > 95% homologia entre espècies (morfologia i antigenèticament) Gram negatius (*) Paràsits obligats del home, únic reservori

3 Diagnòstic Clínica Sífilis primària / secundària amb lesions Cribatge / Seguiment posttractament Neurosífilis Sífilis congènita Tècnica diagnòstica Diagnòstic directe / indirecte Mostra Local / sistèmica

4 Diagnòstic DIRECTE TINCIONS I MICROSCOPIA CULTIU BIOLOGIA MOLECULAR CAMP FOSC CONTRAST FASES GRAM PCR FLUORESCÈNCIA TEIXITS SEQÜENCIACIÓ

Tinció de Gram NO (diàmetre < 1 μm) 3. Tinció fluorescent Microscopia de fluorescència DFA TP (direct fluorescent antibody for T.

5 Diagnòstic DIRECTE TINCIONS I MICROSCOPIA CAMP FOSC GRAM FLUORESCÈNCIA TEIXITS 1. Sense tincions Microscopia de camp fosc: Mostres locals de lesions < 20 minuts des de la recollida de la mostra motilitat (làbil: oxigen, calor, ph no fisiològic, desecació) 2. Tinció de Gram NO (diàmetre < 1 μm) 3. Tinció fluorescent Microscopia de fluorescència DFA TP (direct fluorescent antibody for T. pallidum): Mostres locals de lesions Secades: no necessita visualització immediata Pràcticament no s utilitza 4. Tincions de teixits DFAT TP (direct fluorescent antibody tissue for T. pallidum) IHC (immunohistochemistry) Per mostres de teixits lesionats: cervell, gastrointestinals, placenta, cordó umbilical o pell. Diagnòstic de fases tardanes o sífilis congènita

6 Diagnòstic DIRECTE BIOLOGIA MOLECULAR PCR (polymerase chain reaction): Tècnica diagnòstica més nova Mostres de LCR, genitals, líquid amniòtic i sang (poca sensibilitat en fases avançades) Ens permetria diferenciar espècies HUVH: PCR multiplex a temps real: RealCycler HSVT G v.2 (control intern i control positiu) Dianes: T. pallidum supesp. pallidum i Haemophilus ducrey PCR SEQÜENCIACIÓ

7 Diagnòstic INDIRECTE TREPONÈMIQUES EIA (enzyme immunoassay) TPHA (Treponema pallidum haemagglutination) FTA ABS (fluorescent treponemal antibody absorption) Immunoblots NO TREPONÈMIQUES RPR (rapid plasma reagin) VDRL (venereal disease research laboratory)

8 Diagnòstic INDIRECTE: TREPONÈMIQUES Antígen de T. pallidum subsp. pallidum per detectar Ac específics Detecció d Ac IgM: útil en el diagnòstic de sífilis congènita. No són útils pel seguiment del tractament o per diagnòstic de reinfeccions ja que són positius durant molts anys/al llarg de la vida. Falsos positius Immunoassaigs ELISA (enzyme linked immunosorbent assay) CLIA (chemiluminescence) TPHA (Treponema pallidum haemagglutination) Hemaglutinació FTA ABS (fluorescent treponemal antibody absorption) IFI Immunoblots

9 Treponèmiques: Cribatge

10 Treponèmiques: TPHA i FTA ABS

11 Diagnòstic INDIRECTE: NO TREPONÈMIQUES RPR / VDRL Antígen = cardiolipina + colesterol + lecitina Detecten Ac IgG i IgM en resposta a cardiolipina o altres lípids segregats per les cèl lules infectades o pels treponemes. Reacció immunitària: aglutinació de les partícules lipídiques VDRL necessita lupa RPR utilitza partícules de carbó que la fan visible Ràpid i senzill Tècniques quantitatives Útil pel seguiment del tractament Baixa sensibilitat en fase primària o terciària Falsos positius Efecte prozona

12 Diagnòstic INDIRECTE: RPR

13 Algoritme HUVH Sèrum LCR Sèrum per congènita EIA TPHA RPR FTA ABS FTA ABS VDRL* EIA (mare) IgM (IFI) (nounat) PCR

14 Diagnòstic INDIRECTE

15 Diagnòstic INDIRECTE Sensibilitat Especificitat Fase Primària Secundària Latència Terciària VDRL RPR WHO FTA ABS TPHA EIA

16 En resum Sífilis primària Sífilis secundària Sífilis latent (< 1 any) Sífilis latent o terciària (> 1 any) Neurosífilis Congènita Directe: lesions Directe: lesions Indirecte: Directe: PCR Directe: PCR Indirecte: T positives Indirecte: Precoç: no detecció Ac Indirecte: 100% sensibilitat T i NT positives NT van disminuint NT positives o negatives Clínica Indirecte: T sèrum + FTA ABS VDRL Control embaraç NT falses IgG > 6m IgM

17 Per finalitzar... Diagnòstic serològic: dos sèrums mínim Gran quantitat de tècniques per un diagnòstic Dificultat en la interpretació dels resultats Reinfeccions Valor de la IgM en sífilis aguda (no congènita) Gràcies per la vostra atenció

Documentos relacionados

ORDEN SPIROCHAETALES FAMILIA TREPONEMATACEAE GÉNERO TREPONEMA. QF L. Urra 12-08-13

ORDEN SPIROCHAETALES FAMILIA TREPONEMATACEAE GÉNERO TREPONEMA QF L. Urra 12-08-13 Infección por T. pallidum subespecie pallidum Huésped produce anticuerpos: 1. contra material lipoidal liberado por las