EXOPOL EXOPOL DIAGNÓSTICO DE PROCESOS RESPIRATORIOS EN LA ESPECIE PORCINA.

Transcripción

1 EXOPOL EXOPOL DIAGNÓSTICO DE PROCESOS RESPIRATORIOS EN LA ESPECIE PORCINA

2 DIAGNÓSTICO DE PROCESOS RESPIRATORIOS EN LA ESPECIE PORCINA Los procesos respiratorios en la especie porcina es una enfermedad multifactorial en la que están implicados diferentes factores: agentes infecciosos, nutrición, causas predisponentes de manejo (temperatura, ventilación, densidad de animales), tipo de instalaciones... Dentro de las causas infecciosas del Complejo Respiratorio Porcino encontramos los siguientes agentes: Bacterias: Mycoplasma hyopneumoniae, Actinobacillus pleuropneumoniae Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Mycoplasma hyorhinis. Virus: PRRS, Influenza, PCV2, Coronavirus respiratorio (PRCV). Parásitos: Metastrongylus spp. Es muy importante el análisis laboratorial para detectar los agentes implicados y de esta manera tomar medidas efectivas.

3 TOMA DE MUESTRAS En función de la disponibilidad y el objetivo de análisis (diagnóstico de un caso clínico o monitorización de la explotación), se puede enviar diferentes tipos de muestras. Ver Tabla 1 en páginas 3-4. Recalcar que los lavados bronquioalveolares (figura 1) son de gran utilidad en procesos respiratorios donde no hay bajas, testaremos animales con síntomas respiratorios como toses, disnea etc. Los lavados permiten muestrear más animales que en caso de envío de pulmones y podemos estratificar por edades, naves o estado de producción. Al ser una muestra tomada del pulmón aporta información exacta de los agentes presentes a nivel pulmonar. Figura 1: esquema del lavado bronquioalveolar en ganado porcino. La metodología es sencilla y rápida una vez familiarizado con ella. Escanea este código QR o busca en YouTube "Lavado traqueobronquial en cerdos - Exopol" para acceder a un vídeo explicativo de la realización de la técnica.

4 Tipo de muestra Material Técnica diagnóstica Pulmones Material de necropsias estéril. Recipientes limpios y herméticos. Guantes, Caja de corcho blanco y bloques de hielo-gel. Cultivo micribiológico. PCR. Estudio histopatológico. Lavados o raspados broquialveolares Sondas de distintos tamaño y flexibilidad según la edad del animal. Jeringas y agujas desechables. Suero fisiológico salino. Tubos estériles y herméticos. Guantes, Caja de corcho blanco y bloques de hielo-gel. Cultivo micribiológico. PCR. Fluidos orales Soga de algodón natural. Tubos estériles y herméticos. Guantes, Caja de corcho blanco y bloques de hielo-gel. PCR Serología Hisopos nasales Hisopos con medio de transporte tipo AMIES o STUART. Guantes, Caja de corcho blanco y bloques de hielo-gel. Cultivo microbiológico PCR Sueros sanguíneos Jeringas y agujas desechables. Tubos de sangre sin anticoagulantes. Serología

5 Ventajas Inconvenientes Muestra idónea en caso de bajas. Permite un diagnóstico completo. Requiere animales muertos o sacrificados. Riesgo de que el animal analizado no sea representativo del grupo. Muestreo de animales vivos. Permite muestrear un mayor número de animales. Permite el cultivo microbiológico, realización de antibiograma y técnicas de PCR. Aporta información de los agentes presentes en pulmón. La toma de muestra requiere personal entrenado y material específico. No se puede realizar estudio histopatológico. Análisis de varios animales en una única muestra. Permite realizar búsqueda de antígenos y de anticuerpos. Buen sistema de monitorización en explotaciones asintomáticas. Los animales enfermos no suelen interactuar con las cuerdas. No se puede realizar cultivo microbiológico ni estudio histopatológico. Conservación de la muestra crítica. Muestreo sencillo de animales. Presencia de cepas no patógenas en vías altas. Es posible no detectar agentes presentes en pulmón. No se puede realizar estudio histopatológico. Muestreo sencillo de los animales. Buen sistema de monitorización mediante la realización de seroperfiles Indica la presencia de anticuerpos no del agente infeccioso. Es necesario analizar un número significativos de animales. En la mayoría de las enfermedades no se puede diferenciar la respuesta a la vacuna de la infección natural.

6 DIAGNÓSTICO LABORATORIAL En función del tipo de muestra enviada, se pueden realizar diferentes pruebas que lleven a la resolución del caso: Cultivo microbiológico: permite la obtención de la cepa para realizar estudios de sensibilidad antibiótica, tipado, autovacunas, etc. PCR a tiempo real (qpcr): permite detectar virus y bacterias implicadas en el proceso respiratorio. En Exopol contamos con los siguientes paneles: Respiratorio 1: Cultivo microbiológico, qpcr de: PRRS, Influenza y Myc. hyopneumoniae. Respiratorio 2: Cultivo microbiológico, qpcr de : PRRS, Influenza, Circovirus, Myc. hyopneumoniae, Myc. hyorhinis, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis y Streptococcus suis. Respiratorio Fluidos Orales: PRRS (EU/USA), Influenza, Myc. hyopneumoniae, Myc. hyorhinis, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus parasuis y Streptococcus suis. Secuenciación de PRRS: tras obtener un PCR positivo se puede realizar la secuenciación. De interés en explotaciones positivas en las que se quiera realizar un seguimiento epidemiológico Estudio histológico: de gran interés para valorar la importancia de cada unos de los agentes implicados en el complejo respiratorio porcino. Serología: valorar la presencia de anticuerpos como respuesta a la exposición a los agentes infecciosos o vacunaciones preventivas. Son interesantes lo seroperfiles y también los estudios de seroconversión con sueros pareados. Contamos el siguiente panel serológico: Serología Respiratorio: PRRS (EU), Influenza, Circovirus (IgG e IGM), Myc. hyopneumoniae, Actinobacillus pleuropneumoniae. A continuación adjuntamos ejemplos de casos reales llegados a nuestro laboratorio: Casos 1 y 2: muestras de pulmones Caso 3: lavado bronquioalveolar Caso 4 y 5: fluidos orales

7 CASO 1: Resultados de la Analítica: M92XXX DATOS DEL CASO Animales de cebo de 26 semanas de vida. Sospecha de Actinobacillus pleuropneumoniae. Muertes sobreagudas. Tratados con Marbofloxacina. Vacunados frente a Circovirus y Mycoplasma hyopneumoniae en lactación y a las 17 semanas frente a PRRS. Recibimos como muestra dos pulmones de cebos de 26 semanas OBSERVACIONES MACROSCÓPICAS A la necropsia, ambos pulmones presentan focos de necrosis hemorrágica consolidados y fibrina en la superficie. Congestión generalizada.

8 CULTIVO MICROBIOLÓGICO CROTAL IDENTIFICACIÓN Pulmón 1: Actinobacillus pleuropneumoniae***, Sensible a: CN, ENR, E, SXT, P, EFT, AMP, AMC, KF, CAZ, FL, SH, CT, TMS Pulmón 2: Actinobacillus pleuropneumoniae* Streptococcus suis***, Sensible a: CN, ENR, S, SXT, P, EFT, AMP, B, AMC, KF, CAZ, FL, SH /Enterobacterias** *** Cultivo masivo. **Se observa un número elevado de colonias. *Se observan sólo unas pocas colonias. Antibióticos testados en el antibiograma: Acetamidas: FL: Florfenicol; Penicilinas: AMC: Amoxicilina-Acido clavulónico; AMP*: Ampicilina; P: Penicilina; Cefalosporinas: KF*: Cefalotina; EFT: Ceftiofur; CAZ: Ceftazidime. Aminociclitoles: SH: Spectinomicina; Aminoglicósidos: APR: Apramicina; CN: Gentamicina; N: Neomicina; S: Streptomicina; Fluoroquinolonas: ENR: Enrofloxacina; Macrólidos: E: Eritromicina; DA*: Clindamicina; TMS: tilmicosina; Polipéptidos: B: Bacitracina; CT: Colistina sulfato; Tetraciclinas: TE*: Tetraciclina; Inhibidores folato: SxT :Sulfametoxazol + Trimethoprim. Nota*: las bacterias sensibles a AMP se consideran sensibles a amoxicilina. Si son sensibles a KF también lo son a todas las cefalosporina de primera generación. Si son sensible a DA también lo son a lincomicina. Si son sensibles a TE también lo son a clortetraciclina, doxiciclina, oxitetraciclina y minociclina. SEROTIPADO APP Y STREPTOCOCCUS SUIS MUESTRA Cepa de APP RESULTADO Serotipo 4 Serotipado: Coaglutinación: Serotipos 1-12: / / 2 / 4/ 5 / 7 / 10 /12 Los serotipos y se realizan en pool debido a la reacción cruzada entre ellos. MUESTRA Cepa de S. suis RESULTADO Serotipo 9 Serotipado: PCR a tiempo real frente a los serotipos 1, 2, 7 y 9 de S. suis

9 CONCENTRACIÓN MÍNIMA INHIBITORIA Se realizó el estudio de la concentración mínima inhibitoria (CMI o MIC) de los antibióticos detallados. Resaltados los antibióticos sensibles. Bacteria y crotal: Actinobacillus pleuropneumoniae serotipo 4 aislado de Pulmón 1. Antibiótico CMI (microg/l) Interpretación Sensible Resistente Ceftiofur (XLN) Gentamicina (GEN) Florfenicol* (FFN) 0,125 > 8 0, Tiamulina (TIA) Clortetraciclina (CTET) Oxitetraciclina (OXY) Penicilina (PEN) > 4 > 4 > 4 0,5 0,5 0, Marbofloxacina (MAR) Ampicilina (AMP) Danofloxacin (DANO) Neomicina (NEO) Trimethoprim/sulfamethoxazole (SXT) Spectinomycin (SPE) > 8 > 0,5 > 16 1/ ,5 0, / Tylosin Tartrate (TYLT) Tulathromycin (TUL) Tilmicosin (TIL) Clindamicina (CLI) Sulfadimethoxine (SDM) Enrofloxacin (ENR) 1 >128 0,5 0, , COMENTARIO CMI Los resultados in vitro indica que la bacteria es sensible a 9 de los 18 antibióticos testados. En este caso la cepa de Actinobacillus pleuropneumoniae es sensible a espectinomicina, tilosina y tilmicosina mediante la técnica de CMI pero en concentraciones cercanas a concentraciones resistentes, por lo que no serían la primera opción de tratamiento. Sin embargo es una cepa muy sensible al ceftiofur y al florfenicol con concentraciones inhibitorias muy bajas. La elección final del producto terapeútico a utilizar deberá tener en cuenta también la distribución del mismo a nivel pulmonar, vía de administración, tiempos de supresión, etc. El método de CMI es mucho más exacto que el antibiograma por la técnica de difusión en disco.

10 REAL TIME PCR ENFERMEDAD MUESTRA RESULTADO VALOR Cq PRRS cepas Europeas 2 Pulmones PRRS cepas Americanas 2 Pulmones Circovirus Tipo 2 2 Pulmones Influenza tipo A 2 Pulmones Mycoplasma hyopneumoniae 2 Pulmones 35,45 Mycoplasma hyorhinis 2 Pulmones Haemophilus parasuis 2 Pulmones Actinobacillus pleuropneumoniae 2 Pulmones 18,87 Streptococcus suis 2 Pulmones 30,59 PRRS Europeo: detección de virus PRRS (cepas europea) mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 40. PRRS AMER: detección de virus PRRS (cepas americanas) realizada mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq <40. Circovirus Tipo 2: detección de Circovirus tipo 2 mediante PCR en tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Influenza A: detección de Influenza A mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyopneumoniae: detección del Mycoplasma hyopneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyorhinis: detección de Mycoplasma hyorhinis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Haemophilus parasuis: detección del Haemophilus parasuis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 Actinobacillus pleuropneumoniae: detección del Actinobacillus pleuropneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 Streptococcus suis: detección del Streptococcus suis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 COMENTARIO DEL CASO En este caso se confirma la sospecha clínica de Actinobacillus pleuropneumoniae (serotipo 4). Se descarta la implicación de virus en el proceso y confirmamos la presencia en menor cantidad de Mycoplasma hyopneumoniae y Streptococcus suis (serotipo 9). Hemos realizado el estudio de sensibilidad antibiótica mediante la concentración mínima inhibitoria que aporta información de utilidad respecto al antibiograma clásico de discos impregnados (técnica de Kirby Bahuer). De esta manera se puede ajustar mejor el tratamiento de los animales.

11 CASO 2: Resultados de la Analítica: M92XXX DATOS DEL CASO Proceso respiratorio a final de cebo. Bajas a Kg. Recibimos como muestra un pulmón. OBSERVACIONES MACROSCÓPICAS Pulmón: congestión generalizada de pulmón con consolidación en lóbulos mediales. CULTIVO MICROBIOLÓGICO CROTAL IDENTIFICACIÓN Pulmón: Pasteurella multocida**, Sensible a: CN, ENR, S, E, TE, SXT, N, P,EFT, AMP, AMC, KF, CAZ, FL, SH, CT, TMS Streptococcus suis*, Sensible a: CN, ENR, SXT, P, DA, EFT, MAR, B, FL, SH Haemophilus parasuis* Enterobacterias*

12 *** Cultivo masivo. **Se observa un número elevado de colonias. *Se observan sólo unas pocas colonias. Antibióticos testados en el antibiograma: Acetamidas: FL: Florfenicol; Penicilinas: AMC: Amoxicilina-Acido clavulónico; AMP*: Ampicilina; P: Penicilina; Cefalosporinas: KF*: Cefalotina; EFT: Ceftiofur; CAZ: Ceftazidime. Aminociclitoles: SH: Spectinomicina; Aminoglicósidos: APR: Apramicina; CN: Gentamicina; N: Neomicina; S: Streptomicina; Fluoroquinolonas: ENR: Enrofloxacina; Macrólidos: E: Eritromicina; DA*: Clindamicina; TMS: tilmicosina; Polipéptidos: B: Bacitracina; CT: Colistina sulfato; Tetraciclinas: TE*: Tetraciclina; Inhibidores folato: SxT :Sulfametoxazol + Trimethoprim. Nota*: las bacterias sensibles a AMP se consideran sensibles a amoxicilina. Si son sensibles a KF también lo son a todas las cefalosporina de primera generación. Si son sensible a DA también lo son a lincomicina. Si son sensibles a TE también lo son a clortetraciclina, doxiciclina, oxitetraciclina y minociclina. REAL TIME PCR ENFERMEDAD MUESTRA RESULTADO VALOR Cq PRRS cepas Europeas Pulmón 36,8 PRRS cepas Americanas Pulmón Circovirus Tipo 2 Pulmón Influenza tipo A Mycoplasma hyopneumoniae Pulmón Pulmón 25,27 Mycoplasma hyorhinis Haemophilus parasuis Pulmón Pulmón 29,6 Actinobacillus pleuropneumoniae Pulmón PRRS Europeo: detección de virus PRRS (cepas europea) mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 40. PRRS AMER: detección de virus PRRS (cepas americanas) realizada mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq <40. Circovirus Tipo 2: detección de Circovirus tipo 2 mediante PCR en tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Influenza A: detección de Influenza A mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyopneumoniae: detección del Mycoplasma hyopneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyorhinis: detección de Mycoplasma hyorhinis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Haemophilus parasuis: detección del Haemophilus parasuis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 Actinobacillus pleuropneumoniae: detección del Actinobacillus pleuropneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38

13 HISTOPATOLOGÍA: Diagnóstico emitido por Micros Veterinaria Histológicamente se observa una intensa neumonía exudativa, de carácter purulento, que se caracteriza por existencia de un intenso infiltrado inflamatorio, conformado por linfocitos y neutrófilos, que infiltran tanto los tabiques alveolares, como las propias luces alveolares, provocando su completa oclusión. Presencia de abundante exudado ácidofilo (probablemente moco) el interior de los bronquios de mayor tamaño, con presencia de algunas células inflamatorias.hiperplasia de las glándulas de la submucosa de los bronquios de mayor tamaño. Exudado muy denso de neutrófilos en la luz de los bronquios más pequeños. También se observan algunas áreas de pulmón, muy escasamente afectadas, con únicamente un leve infiltrado inflamatorio peribronquiolar, y exudado mucopurulento en el interior de los bronquios. Estas zonas presentan una separación neta de las áreas afectadas, mediante los tabiques interlobulillares. También se observan algunas zonas intermedias que presentan neumonía intersticial, aunque de carácter purulento. Mediante la tinción de Gram se observan algunos cocos Gram positivos en las zonas de parénquima más afectadas, y sobre todo en el contenido de los bronquios. La presencia de bacilos Gram negativos de muy pequeño tamaño es esporádica. COMENTARIO DEL CASO Las lesiones macroscópicas son características de un proceso bacteriano con participación importante de Mycoplasma hyopneumoniae. Hemos confirmado mediante cultivo y/o PCR la presencia de Mycoplasma hyopneumoniae y Pasteurella multocida. Detectándose también Streptococcus suis y Haemophilus parasuis en menor concentración. Además este caso es positivo a PRRS, la recirculación de PRRS puede empeorar la clínica dentro del complejo respiratorio porcino. Si bien, en estas muestras en particular. No se observan lesiones histológicas claras que se puedan relacionar con virus, si bien las lesiones bacterianas podrían enmascararlas

14 CASO 3: Resultados de la Analítica: M92XXX DATOS DEL CASO Granja libre de Mycoplasmas y PRRS. Animales de cebo. El muestreo se ha llevado a cabo porque en la granja de origen se hizo un tratamiento de erradicación de mycoplasma, y se quiere comprobar que los animales continúan negativos. Los animales están tratando con un pienso de entrada medicado que lleva amoxicilina y colistina. Recibimos como muestra 5 lavados bronquioalveolares de animales que presentan toses CULTIVO MICROBIOLÓGICO CROTAL Lavado s/n 1: Lavado s/n 2: Lavado s/n 3: Lavado s/n 4: Lavado s/n 5: IDENTIFICACIÓN Streptococcus suis*, Sensible a: B, AMC, KF, FL, SH Haemophilus parasuis*/bordetella bronchiseptica* Streptococcus sp.*/bordetella bronchiseptica* Streptococcus sp.* Sin Crecimiento

15 *** Cultivo masivo. **Se observa un número elevado de colonias. *Se observan sólo unas pocas colonias. Antibióticos testados en el antibiograma: Acetamidas: FL: Florfenicol; Penicilinas: AMC: Amoxicilina-Acido clavulónico; AMP*: Ampicilina; P: Penicilina; Cefalosporinas: KF*: Cefalotina; EFT: Ceftiofur; CAZ: Ceftazidime. Aminociclitoles: SH: Spectinomicina; Aminoglicósidos: APR: Apramicina; CN: Gentamicina; N: Neomicina; S: Streptomicina; Fluoroquinolonas: ENR: Enrofloxacina; Macrólidos: E: Eritromicina; DA*: Clindamicina; TMS: tilmicosina; Polipéptidos: B: Bacitracina; CT: Colistina sulfato; Tetraciclinas: TE*: Tetraciclina; Inhibidores folato: SxT :Sulfametoxazol + Trimethoprim. Nota*: las bacterias sensibles a AMP se consideran sensibles a amoxicilina. Si son sensibles a KF también lo son a todas las cefalosporina de primera generación. Si son sensible a DA también lo son a lincomicina. Si son sensibles a TE también lo son a clortetraciclina, doxiciclina, oxitetraciclina y minociclina. REAL TIME PCR ENFERMEDAD MUESTRA RESULTADO VALOR Cq PRRS cepas Europeas 5 lavados PRRS cepas Americanas 5 lavados Circovirus Tipo 2 5 lavados 30,91 Influenza tipo A 5 lavados 33,58 Mycoplasma hyopneumoniae 5 lavados Mycoplasma hyorhinis 5 lavados 34,99 Haemophilus parasuis 5 lavados 39,38 Actinobacillus pleuropneumoniae 5 lavados Streptococcus suis 5 lavados 37,39 PRRS Europeo: detección de virus PRRS (cepas europea) mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 40. PRRS AMER: detección de virus PRRS (cepas americanas) realizada mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq <40. Circovirus Tipo 2: detección de Circovirus tipo 2 mediante PCR en tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Influenza A: detección de Influenza A mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyopneumoniae: detección del Mycoplasma hyopneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyorhinis: detección de Mycoplasma hyorhinis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Haemophilus parasuis: detección del Haemophilus parasuis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 Actinobacillus pleuropneumoniae: detección del Actinobacillus pleuropneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 Streptococcus suis: detección del Streptococcus suis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38

16 COMENTARIO DEL CASO Mediante qpcr hemos detectado PCV2, Influenza tipo A, Mycoplasma hyorhinis, y Streptococcus suis en el pool de los 5 lavados. En caso de Haemophilus parasuis hemos tenido un pico de amplificación en el ciclo 39. Valores por debajo de 38 se consideran negativos por la alta probabilidad de amplificaciones inespecíficas. Sin embargo, el cultivo microbiológico confirma la presencia de Haemophilus parasuis en pequeña cantidad en uno de los 5 lavados. Los resultados señalan a la presencia en la explotación de animales con un complejo respiratorio porcino con base vírica (Influenza tipo A y Circovirus tipo II) e implicación bacteriana (Streptococcus suis, Mycoplasma hyorhinis y Haemophilus parasuis). Se descarta en estas muestras la presencia de Mycoplasma hyopneumoniae y PRRS.

17 CASO 4: Resultados de la Analítica: M95XXX DATOS DEL CASO Fluidos Orales tomados de cerdas de reposición con 12 y 16 semanas de vida. Se desea saber si está circulando PRRS. INDENTIFICACIÓN DE MUESTRAS FO 1: cerdas de 12 semanas de vida. FO 2: cerdas de 12 semanas de vida. FO 3: cerdas de 16 semanas de vida. Leyenda: FO: Fluidos Orales REAL TIME PCR ENFERMEDAD MUESTRA RESULTADO VALOR Cq PRRS cepas Europeas 1. FO 1 36,9 PRRS cepas Europeas 2. FO 2 39,95 PRRS cepas Europeas 3. FO 3 PRRS cepas Americanas 1. FO 1 PRRS cepas Americanas 2. FO 2 PRRS cepas Americanas 3. FO 3 PRRS AMER: detección de virus PRRS (cepas americanas) realizada mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq <40. PRRS Europeo: detección de virus PRRS (cepas europea) mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 40. COMENTARIO DEL CASO Se confirma la recirculación de PRRS a las 12 semanas de vida mientras que no se detecta en las cerdas de 16 semanas de vida.

18 CASO 5: Resultados de la Analítica: M95XXX DATOS DEL CASO Lechones de transición para valorar la circulación de agentes implicados en el Complejo Respiratorio porcino. Recibimos 1 muestra de fluido oral REAL TIME PCR ENFERMEDAD MUESTRA RESULTADO VALOR Cq PRRS cepas Europeas FO PRRS cepas Americanas FO Circovirus Tipo 2 FO Influenza tipo A FO Mycoplasma hyopneumoniae Mycoplasma hyorhinis Haemophilus parasuis Actinobacillus pleuropneumoniae Streptococcus suis FO FO FO FO FO 29,76 30,73 29,88 29,99

19 PRRS Europeo: detección de virus PRRS (cepas europea) mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 40. PRRS AMER: detección de virus PRRS (cepas americanas) realizada mediante PCR Real Time. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq <40. Circovirus Tipo 2: detección de Circovirus tipo 2 mediante PCR en tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Influenza A: detección de Influenza A mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyopneumoniae: detección del Mycoplasma hyopneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Mycoplasma hyorhinis: detección de Mycoplasma hyorhinis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38. Haemophilus parasuis: detección del Haemophilus parasuis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 Actinobacillus pleuropneumoniae: detección del Actinobacillus pleuropneumoniae mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 Streptococcus suis: detección del Streptococcus suis mediante PCR en Tiempo Real. Una muestra se considera positiva si tiene un valor de Cq 38 COMENTARIO DEL CASO Se confirma la recirculación de agentes bacterianos: Mycoplasma hyorhinis, Haemophilus parasuis, Actinobacillus pleuropneumoniae y Streptococcus suis. No se detecta la presencia de virus implicados en el Complejo respiratorio porcino.

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